Ruolo predittivo dei nuovi biomarcatori per i pazienti ipersensibili alle radiazioni nel carcinoma mammario (Biorio) (BIORISE)

I meccanismi molecolari coinvolti nelle risposte indotte dalle radiazioni sono complessi e gli approcci proteomici possono essere usati per comprendere meglio il processo di reazione complessivo di radiazioni ionizzanti e per identificare potenziali marcatori predittivi sensibili alla radio. Fino ad ora, poche pubblicazioni hanno affrontato la determinazione dei pazienti radiosensibili.

Sulla base dei nostri risultati precedenti e al fine di migliorare il valore predittivo positivo del test di effetto tardivo indotto dalle radiazioni, abbiamo sviluppato un approccio proteomico quantitativo per identificare marcatori radiobiologici predittivi in ​​pazienti con grave tossicità. Innanzitutto, quattro pazienti sono stati selezionati con un basso valore di Rila dagli studi prospettici sopra menzionati. Due pazienti non avevano tossicità almeno quattro anni dopo la fine del trattamento, mentre altri due pazienti hanno sviluppato una grave tossicità maggiore del grado 2. I linfociti T sono stati isolati dal sangue intero e la metà di essi è stata irradiata in vitro. Ha quindi eseguito un flusso di lavoro di proteomica quantitativa utilizzando un'etichettatura ITRAQ a 8 plex e dopo diversi frazionati per ottimizzare la risoluzione dell'analisi (frazionamento di gel off seguito da cromatografia nanoliquida), le proteine ​​sono state identificate dalla spettrometria di massa tandem (4800 più Maldi TOF/TOF). Più di 1300 proteine ​​totali sono state identificate con alta fiducia (95%, un peptide unico). A 0 Gy, 135 proteine ​​sono state espresse in modo differenziato tra i pazienti con o senza tossicità radiocariginosa. Nei linfociti T irradiati (8 Gy), 107 proteine ​​sono state espresse in modo differenziato tra pazienti con o senza tossicità radiosa indotta da gravi. Tra questi, cinque proteine ​​(Ak2, adenilato chinasi 2; IDH2, isocitrate deidrogenasi 2 (NADP+); anne1, annessina 1; apex1, DNA- (apurinico o apririmidinico) Liasi e che hanno mostrato il sito di differenza) e che ha mostrato il sito di differenza) e che ha mostrato la differenza di differenza) Controlli, sono stati selezionati per la convalida consecutiva. Queste proteine ​​sono coinvolte in diversi meccanismi tra cui il metabolismo e la produzione di energia, l'apoptosi, la proteina legante il calcio e la riparazione dei danni al DNA. Queste cinque proteine ​​sono attualmente oggetto di applicazione di brevetto.

Quindi, verranno reclutati altri 10 pazienti (5 pazienti con fibrosi mammaria di grado ≥ 2 e 5 pazienti senza tossicità) che hanno presentato un basso valore di Rila per convalidare l'espressione delle proteine ​​mediante la fioritura occidentale. I risultati hanno mostrato che tutte le proteine ​​sono state sovraespresse nei pazienti di T-linfociti irradiati con grave tossicità comparativamente ai pazienti senza tossicità.

Tuttavia, per confermare il livello di espressione delle proteine ​​nei pazienti con effetti tardivi indotti dalle radiazioni e per determinare il valore delle prestazioni, in particolare il valore predittivo positivo, di un esame del sangue basato sul dosaggio di un panel di cinque proteine, è necessario convalidare questi risultati preliminari da uno studio prospettico su una grande coorte di pazienti