Prediktivní role nových biomarkerů pro hypersenzitivní pacienty k záření u rakoviny prsu (Biorise) (BIORISE)

Molekulární mechanismy zapojené do odpovědí vyvolaných zářením jsou složité a proteomické přístupy lze použít k lepšímu porozumění celkovému reakčnímu procesu ionizujícího záření a k identifikaci potenciálních prediktivních markerů citlivých na rádia. Až dosud jen málo publikací se zabývalo stanovením radiosenzitivních pacientů.

Na základě našich předchozích výsledků a za účelem zlepšení pozitivní prediktivní hodnoty testu pozdního účinku vyvolaného záření jsme vyvinuli kvantitativní proteomický přístup k identifikaci prediktivních radiobiologických markerů u pacientů se závažnou toxicitou. Nejprve byli čtyři pacienti vybráni s nízkou hodnotou RILA z výše uvedených prospektivních studií. Dva pacienti neměli žádnou toxicitu nejméně čtyři roky po ukončení léčby, zatímco dva další pacienti se vyvinuli závažnou toxicitu větší než stupeň 2. T-lymfocyty byly izolovány z celé krve a polovina z nich byla ozářena in vitro. Poté provede kvantitativní proteomický pracovní postup s použitím značení 8-PLEX ITRAQ a po několika frakcích pro optimalizaci rozlišení analýzy (vypnuto gelové frakcionaci následované nanoliquidní chromatografií) byly proteiny identifikovány tandemovou hmotnostní spektrometrií (4800 plus maldi TOF/TOF). Více než 1300 celkových proteinů bylo identifikováno s vysokou důvěrou (95%, jeden jedinečný peptid). Při 0 Gy bylo odlišně exprimováno 135 proteinů mezi pacienty s vážnou radiofikovanou toxicitou nebo bez něj. U ozářených T-lymfocytů (8 Gy) bylo 107 proteinů odlišně exprimováno u pacientů s těžkou radio-indukovanou toxicitou nebo bez ní. Mezi nimi pět proteinů (AK2, adenylát kináza 2; IDH2, isocitrát dehydrogenáza 2 (NADP+); úzkosti1, Annexin 1; Apex1, DNA- (apurinická nebo apyrimidinická hodnota) lyázy a HSC70, tepelný šok 71 kDa) s nejvyšším proteinem (> 1,5) a prokázal bez rozdílu v hodnotě) a prokázal neměny v hodnotě bez rozdílu) a prokázaly, že neměnily) a to, že je to v hodnotě, a to, co prokázalo, a apyrimidinická hodnota) a na to, že je to v hodnotě. kontroly, byly vybrány pro po sobě jdoucí ověření. Tyto proteiny jsou zapojeny do několika mechanismů, včetně metabolismu a produkce energie, apoptózy, proteinu vázání vápníku a opravy poškození DNA. Těchto pět proteinů je v současné době předmětem patentové aplikace.

Poté bude přijato 10 dalších pacientů (5 pacientů se stupněm ≥ 2 fibrózy prsu a 5 pacientů bez toxicity), kteří představovali nízkou hodnotu RILA pro ověření exprese proteinů westernovým blotem. Výsledky ukázaly, že všechny proteiny byly nadměrně exprimovány u ozářených pacientů s T-lymfocyty se závažnou toxicitou relativně s pacienty bez toxicity.

Avšak pro potvrzení úrovně exprese proteinu u pacientů s pozdními účinky vyvolanými zářením a stanovení hodnoty výkonu, zejména pozitivní prediktivní hodnoty, krevního testu založeného na dávkování panelu pěti proteinů, je nutné tyto předběžné výsledky ověřit prospektivní studií na velké soubor pacientů