Förutsägbar roll av nya biomarkörer för överkänsliga patienter till strålning i bröstcancer (Biorise) (BIORISE)

Molekylära mekanismer som är involverade i strålningsinducerade svar är komplexa, och proteomiska tillvägagångssätt kan användas för att bättre förstå den övergripande reaktionsprocessen för joniserande strålning och för att identifiera potentiella radiokänsliga prediktiva markörer. Fram till nu har få publikationer behandlat bestämningen av radiosensitiva patienter.

Baserat på våra tidigare resultat och för att förbättra det positiva prediktiva värdet av strålningsinducerad analys av sen effekt utvecklade vi en kvantitativ proteomisk metod för att identifiera prediktiva radiobiologiska markörer hos patienter med svår toxicitet. Först valdes fyra patienter med ett lågt RILA -värde från de prospektiva studierna som nämns ovan. Två patienter hade ingen toxicitet minst fyra år efter behandlingens slut medan två andra patienter utvecklade en allvarlig toxicitet större än grad 2. T-lymfocyter har isolerats från helblod och hälften av dem har bestrålats in vitro. Den kommer sedan att utföra ett kvantitativt proteomikarbetsflöde med en 8-plex ITRAQ-märkning och efter flera fraktioneringar för att optimera upplösningen av analys (utanför gelfraktionering följt av nanolikidkromatografi) identifierades proteiner med tandemmasspektrometri (4800 plus MALDI OF/TOF). Mer än 1300 totala proteiner identifierades med högt förtroende (95%, en unik peptid). Vid 0 Gy uttrycktes 135 proteiner differentiellt mellan patienter med eller utan svår radioinducerad toxicitet. I bestrålade T-lymfocyter (8 Gy) uttrycktes 107 proteiner differentiellt mellan patienter med eller utan svår radioinducerad toxicitet. Bland dem är fem proteiner (Ak2, adenylatkinas 2; IDH2, isocitratdehydrogenas 2 (nadp+); Anx1, annexin 1; apex1, DNA- (apurinic eller apyrimidinic) lyas och HSc70, värmechockkognat 71 kda) med det högsta proteet (> 1) och det visade no-skillnaden (> 1) och det visade no-skillnaden (> 1) och det visade att det visade no skillnaden. Kontroller valdes för validering i följd. Dessa proteiner är involverade i flera mekanismer inklusive metabolism och energiproduktion, apoptos, kalciumbindande protein och DNA -skador reparation. Dessa fem proteiner är för närvarande föremål för patentansökan.

Sedan kommer 10 andra patienter att rekryteras (5 patienter med grad ≥ 2 bröstfibros och 5 patienter utan toxicitet) som presenterade ett lågt RILA-värde för att validera proteineruttryck genom västerländsk-blotting. Resultaten visade att alla proteiner var överuttryckta hos bestrålade T-lymfocyter patienter med svår toxicitet jämförelsevis med patienter utan toxicitet.

För att bekräfta proteinuttrycksnivån i strålningsinducerad seneffekter av sena effekter och för att bestämma prestandavärdet, särskilt det positiva prediktiva värdet, av ett blodprov baserat på dosen av en panel med fem proteiner, är det nödvändigt att validera dessa preliminära resultat genom en prospektiv studie på en stor kohort av patienter