Forutsigende rolle for nye biomarkører for overfølsomme pasienter til stråling i brystkreft (Biorise) (BIORISE)

Molekylære mekanismer involvert i strålingsinduserte responser er komplekse, og proteomiske tilnærminger kan brukes til å bedre forstå den generelle reaksjonsprosessen for ioniserende stråling og for å identifisere potensielle radiosensitive prediktive markører. Til nå har få publikasjoner adressert bestemmelse av radiosensitive pasienter.

Basert på våre tidligere resultater og for å forbedre den positive prediktive verdien av strålingsindusert analyse av sen effekt, utviklet vi en kvantitativ proteomisk tilnærming for å identifisere prediktive radiobiologiske markører hos pasienter med alvorlig toksisitet. Først ble fire pasienter valgt med en lav RILA -verdi fra de prospektive studiene nevnt ovenfor. To pasienter hadde ingen toksisitet minst fire år etter behandlingen av behandlingen, mens to andre pasienter utviklet en alvorlig toksisitet større enn grad 2. T-lymfocytter er blitt isolert fra fullblod og halvparten av dem har blitt bestrålet in vitro. Den vil deretter utføre en kvantitativ proteomikk-arbeidsflyt ved bruk av en 8-plex ITRAQ-merking og etter flere fraksjoner for å optimalisere oppløsningen av analysen (off gelfraksjonering etterfulgt av nanolikvidekromatografi), ble proteiner identifisert ved tandem massespektrometri (4800 pluss MALDI TOF/TOF). Mer enn 1300 totale proteiner ble identifisert med høy tillit (95%, ett unikt peptid). Ved 0 Gy ble 135 proteiner differensielt uttrykt mellom pasienter med eller uten alvorlig radioindusert toksisitet. I bestrålte T-lymfocytter (8 Gy) ble 107 proteiner differensielt uttrykt mellom pasienter med eller uten alvorlig radioindusert toksisitet. Blant dem ble fem proteiner (AK2, adenylatkinase 2; IDH2, isocitrat dehydrogenase 2 (NADP+); ANX1, Annexin 1; Apex1, DNA- (apurinisk eller apyrimidisnett) LYASE, og HSC70, varmesjokkkognat 71 KDA) med Highest PROTIN (varmesjokkkognat 71 KDADA) med highst-kognatet. forholdet i 0 Gy -kontroller, ble valgt for påfølgende validering. Disse proteinene er involvert i flere mekanismer, inkludert metabolisme og energiproduksjon, apoptose, kalsiumbindende protein og DNA -skader reparasjon. Disse fem proteinene er for tiden gjenstand for patentsøknad.

Deretter vil 10 andre pasienter bli rekruttert (5 pasienter med grad ≥ 2 brystfibrose og 5 pasienter uten toksisitet) som presenterte en lav RILA-verdi for å validere proteinuttrykk ved vestlig blotting. Resultatene viste at alle proteiner ble overuttrykt hos bestrålte T-lymfocytter pasienter med alvorlig toksisitet sammenlignet med pasienter uten toksisitet.

For å bekrefte proteinuttrykknivået hos stråleinduserte pasienter med sene effekter og for å bestemme ytelsesverdien, spesielt den positive prediktive verdien, av en blodprøve basert på doseringen av et panel med fem proteiner, er det imidlertid nødvendig å validere disse foreløpige resultatene ved en prospektiv studie på en stor kohort av pasienter