Efficacité de l'azithromycine en complément d'un traitement parodontal non chirurgical

Définition de l'échantillon : Patients de plus de 18 ans admis à l'Unité de diagnostic de la Faculté de médecine dentaire (DUFD), campus Viña del Mar de l'Université nationale Andres Bello (UNAB) en 2016, avec un diagnostic de parodontite sévère, répondant à la fois aux critères d'inclusion et d'exclusion et accepter volontairement de participer au présent travail de recherche, en signant un consentement éclairé. Les participants choisis ont été informés de la nature de la recherche, des risques potentiels et de la compensation pour participer à l'étude, en obtenant le consentement éclairé de chaque patient.

Calcul de la taille de l'échantillon : Pour calculer la taille minimale de l'échantillon nécessaire à la constitution des groupes de contrôle et d'intervention, la variance de la différence de profondeur de sondage a été considérée comme des valeurs fixes, basées sur les résultats décrits ci-dessus. Compte tenu de ce qui précède et en utilisant un niveau de signification de 5 %, une puissance statistique de 80 % et une erreur d'estimation de 1 mm, au moins 7 patients ont été obtenus pour chaque groupe, soit un total de 14 sujets minimum à étudier.

Protocole et examen clinique : Sur un total de 32 patients sélectionnés, 20 de ceux qui répondaient aux critères d'inclusion ont été assignés au hasard par le coordinateur de l'étude à l'un des deux groupes selon une séquence de génération aléatoire à l'aide d'un logiciel. Deux sujets ont refusé de participer à la recherche, de sorte que l'étude comptait 9 participants dans chaque groupe. De cette manière, deux groupes ont été formés pour enquêter : un groupe d'intervention qui a reçu NSPT plus 500 mg d'azithromycine une fois par jour pendant trois jours immédiatement après le NSPT, et un groupe témoin qui a reçu NSPT plus placebo dans les mêmes conditions que le groupe d'intervention. .

Randomisation : seul l'investigateur principal, qui a effectué la randomisation en utilisant le programme Epidat 4.0, avait connaissance du contenu des conteneurs et du groupe auquel appartenait chaque patient dans l'étude, par conséquent, était en charge de l'étiquetage des conteneurs, réalisant en de cette manière, les collaborateurs et les participants à l'enquête ne connaissaient leur contenu qu'après la fin de l'étude.

Standardisation et étalonnage : Les données ont été recueillies à l'aide d'instruments et de fournitures de mêmes marques commerciales, dans une seule chaise, sous le même éclairage et par un seul examinateur dans le cas des données cliniques et un autre examinateur pour les variables microbiologiques.

Pour la standardisation, les mesures ont été réalisées dans les mêmes conditions et avec le même type d'instrument, afin de réduire le biais associé. Les instruments utilisés pour la collecte des données étaient tous les mêmes en termes de conception et de marque : Kit d'examen de base : miroir, sonde de carie, pince à épiler (Hu-Friedy® Manufacturing Inc., Chicago, IL, États-Unis), sonde parodontale manuelle (North Carolina Probe. Hu-Friedy® Manufacturing Inc., Chicago, IL, États-Unis), des comprimés détecteurs de plaque (Curaprox © CURADEN AG, Suisse) et des cônes en papier stériles numéro 40 (Johnson & Johnson, Tokyo, Japon). Comme il n'y avait qu'un examinateur (KL ) impliqués dans l'étude, une évaluation de la fiabilité intra-examinateur a été effectuée. Cet examinateur (coefficient de corrélation intra-classe de 0,96 et 0,95 pour PPD et CAL), a enregistré toutes les variables stipulées, dans un dossier clinique conçu spécialement pour l'étude. L'échantillonnage microbiologique et le NSPT ont été effectués par un seul clinicien (OP). Le processus complet de PCR a été effectué par un biochimiste appartenant au laboratoire de microbiologie, campus de Santiago de l'UNAB.

Parodontopathogènes : La présence de parodontopathogènes a été prise en compte lors de l'exposition du gel d'agarose de l'électrophorèse à la lumière ultraviolette, une bande au site des 197 paires de bases (pb) a été observée dans la voie possédant l'échantillon de bioflore sous-gingivale du patient de Pg, 316 paires de bases pour Td, 745 pour Tf et 167 pour Fn.

Collecte des données et instrument : Avant la collecte des données, tous les sujets appartenant à l'étude ont été invités à passer une radiographie panoramique à des fins de diagnostic. Par la suite, l'examen parodontal a été effectué en enregistrant les variables cliniques décrites ci-dessus dans un dossier clinique.

Obtention des prélèvements microbiologiques : L'examen microbiologique a été réalisé avant NSPT sur les deux groupes. La collecte d'échantillons microbiologiques était basée sur un protocole utilisé à l'Université du Chili. À l'aide de cônes en papier stériles numéro 40, un échantillon de la bioflore sous-gingivale a été prélevé sur le site avec le CAL le plus élevé, parmi ceux avec PD ≥ 5 mm, et une instruction d'hygiène buccale a été effectuée. Avant le prélèvement de la bioflore sous-gingivale, la zone a été nettoyée avec une gaze stérile pour éliminer le biofilm supragingival. Ensuite, avec une pince à épiler, un cône en papier a été prélevé et sa pointe a été placée dans le sulcus du site d'étude pendant 20 secondes, pour assurer l'absorption du liquide créviculaire et de la bioflore sous-gingivale. Chaque échantillon biologique obtenu a été mis en suspension dans un tube Eppendorf avec 1 ml d'eau distillée et transporté au réfrigérateur à une température de 4°C environ, dans un délai n'excédant pas 3 heures, pour être ensuite conservé temporairement à -80°C, jusqu'à son transfert et l'extraction ultérieure de l'acide désoxyribonucléique (ADN) et le traitement de la technique PCR. Le délai entre le prélèvement et l'extraction de l'ADN n'a pas dépassé 48 heures, pour éviter la détérioration du matériel biologique.

Traitement parodontal : Une fois la collecte préliminaire de toutes les variables terminée, un traitement parodontal non chirurgical (NSPT) a été effectué, en commençant par une décontamination supra et sous-gingivale de la bouche complète, à l'aide d'un piézo électrique (DTE®, Guilin Woodpecker Medical Instrument Co. , Ltd., Guilin, Guangxi, République populaire de Chine), suivi d'un surfaçage radiculaire sur les sites présentant PD ≥ 5 mm et CAL ≥ 4 mm, à l'aide de curettes Gracey (Hu-Friedy® Manufacturing Inc., Chicago, Illinois (IL), USA) . Cette thérapie a été réalisée chez tous les patients, tant dans le groupe d'intervention que dans le groupe témoin, selon le protocole de traitement de la bouche complète, en 1 ou 2 séances de travail, d'une durée de 1 à 2 heures, atteignant le traitement dans les 24 heures.

Administration d'azithromycine ou de placebo : A la fin de la dernière séance de traitement, l'antibiotique azithromycine (Azithromycine, Laboratoire du Chili) ou un placebo (Lactose, Pharmacie galénique) a été administré, selon le groupe, l'intervention ou le contrôle respectivement, auquel appartenait le patient . Pour les deux thérapies, le schéma d'administration était de 1 comprimé de 500 mg par voie orale par jour, pendant 3 jours consécutifs. Pour maintenir le double aveugle, les récipients utilisés pour l'azithromycine et le placebo présentaient les mêmes caractéristiques concernant la taille et la couleur. Concernant les comprimés d'azithromycine et le placebo, ceux-ci étaient visuellement identiques.

Par la suite, au premier, troisième et sixième mois après la fin du traitement non chirurgical, un nouveau recueil de toutes les variables cliniques mesurées au début de l'étude a été réalisé, tandis que les variables microbiologiques ont été mesurées à nouveau au troisième et sixième mois après le traitement, à partir du même site utilisé lors du premier échantillonnage.

Analyse statistique : L'analyse des données a été réalisée en fonction des objectifs spécifiques de la recherche, à l'aide du programme informatique Statistics Package for the Social Sciences (SPSS). Une analyse descriptive a été réalisée dans laquelle les variables qualitatives ont été étudiées par fréquence, tandis que les quantitatives ont été analysées par la moyenne. Les résultats obtenus dans les deux cas ont été exprimés dans des tableaux de fréquence. Pour chaque variable, le test de normalité des données a été réalisé selon le test de Shapiro-Wilk. Ensuite, une analyse inférentielle a été effectuée pour les variables quantitatives. Le niveau de signification statistique a été établi selon le test t de Student et Chi-Square, tandis que pour les variables qualitatives, le test de McNemar non paramétrique a été effectué. Des valeurs de p significatives <0,05 ont été considérées, visant à présenter un niveau de confiance de 95 %.

Implications éthiques, biosécurité et autres Chaque patient a été informé en détail de tout ce qui implique la réalisation des travaux de recherche, selon le niveau de compréhension de chaque sujet et a reçu un consentement éclairé, dans lequel l'objectif de l'étude est précisé par écrit ainsi que les procédures à effectuer pour le groupe de contrôle et le groupe d'intervention, en plus des coûts et des avantages de la participation. La conception, ainsi que le protocole de la présente étude, étaient basés sur la Déclaration d'Helsinki et ont été approuvés par le Comité d'éthique scientifique de la Faculté de médecine dentaire, campus Viña del Mar de l'UNAB. D'autre part, pour le développement correct de l'enquête, des examens cliniques pertinents ont été effectués selon les règles de biosécurité en vigueur dans cet établissement. Le prélèvement de la bioflore sous-gingivale du patient consiste en une technique totalement inoffensive, rapide et simple, qui n'a été obtenue qu'à partir d'un site parodontal. Une fois l'enquête terminée, tout le matériel extrait a été détruit, obtenant son élimination au moyen des normes internationales de manipulation d'échantillons biologiques. Tous les participants ont reçu gratuitement les éléments nécessaires à une bonne hygiène bucco-dentaire, leur enseignant la bonne façon de se désinfecter la bouche. De plus, ils ont été informés du diagnostic, du plan de traitement et des résultats obtenus. En ce qui concerne les patients examinés qui ne répondaient pas aux critères d'inclusion et / ou d'exclusion de l'étude, ils ont été référés au sujet de la parodontie clinique pour la quatrième année, en tant qu'assistant d'enseignement ou post-gradué de parodontie à l'UNAB, selon le cas, afin être traité parodontalement. Concernant l'utilisation d'antibiotiques systémiques comme traitement adjuvant, il s'est avéré cliniquement plus efficace que le traitement parodontal associé à un placebo. L'azithromycine, d'autre part, a un spectre d'action qui implique des bactéries Gram négatives aérobies et anaérobies, parmi lesquelles se trouvent les parodontopathogènes, elle a une excellente absorption gastro-intestinale, une longue demi-vie et des effets indésirables limités. En raison de ses propriétés, il pourrait devenir une alternative viable en parodontie à l'antibiothérapie adjuvante actuelle d'amoxicilline avec métronidazole. En ce qui concerne l'utilisation du placebo (lactose), il se caractérise pour être de type pur ou inactif, c'est-à-dire correspond à une substance inerte qui n'a pas d'action pharmacologique chez le patient, c'est pourquoi c'est généralement le type de placebo de choix dans les études d'essais cliniques. Le lactose est un disaccharide résultant de la liaison du glucose et du galactose, et ces placebos correspondent à des gélules d'une poudre cristalline, blanche, inodore et au goût légèrement sucré, dont les effets secondaires à son utilisation surviennent peu fréquemment, principalement chez les patients ayant ingéré de façon excessive quantités de lactose et/ou y sont intolérantes, générant des symptômes tels que douleurs abdominales, flatulences, diarrhée, ballonnements, nausées et vomissements. averti des effets possibles, indiquant que face à tout inconfort attribuable à la consommation des comprimés, ils iraient vers les chercheurs pour arrêter l'administration de ceux-ci et être éliminés de l'étude.