Effekten av azitromycin som et tillegg til ikke-kirurgisk periodontal behandling

Definisjon av utvalget: Pasienter over 18 år innlagt ved diagnoseenheten ved Det odontologiske fakultet (DUFD), Viña del Mar campus ved Universidad Nacional Andres Bello (UNAB) i løpet av 2016, med en diagnose av alvorlig periodontitt, som møter både inkluderings- og eksklusjonskriterier og samtykker frivillig til å delta i dette forskningsarbeidet ved å signere et informert samtykke. De valgte deltakerne ble informert om forskningens art, potensielle risikoer og kompensasjon for å delta i studien, og innhentet informert samtykke fra hver pasient.

Beregning av prøvestørrelse: For å beregne minimum prøvestørrelse som er nødvendig for sammensetningen av kontroll- og intervensjonsgruppene, ble variansen av sonderingsdybdeforskjellen betraktet som faste verdier, som var basert på resultatene beskrevet ovenfor. med signifikans på 5 %, en statistisk styrke på 80 % og en estimeringsfeil på 1 mm, ble det oppnådd minst 7 pasienter for hver gruppe, noe som ga totalt 14 minimumsfag å studere.

Protokoll og klinisk undersøkelse: Av totalt 32 pasienter som ble valgt, ble 20 av de som oppfylte inklusjonskriteriene tilfeldig tildelt av studiekoordinatoren til en av de to gruppene ved bruk av en tilfeldig generasjonssekvens ved bruk av en programvare. To forsøkspersoner takket nei til å delta i forskningen, så studien hadde 9 deltakere i hver gruppe. På denne måten ble det dannet to grupper for å undersøke: en intervensjonsgruppe som fikk NSPT pluss 500 mg azitromycin én gang daglig i tre dager rett etter NSPT, og en kontrollgruppe som fikk NSPT pluss placebo under samme forhold som intervensjonsgruppen .

Randomisering: Bare hovedetterforskeren, som foretok randomiseringen ved å bruke Epidat 4.0-programmet, hadde kunnskap om innholdet i beholderne og gruppen som hver pasient tilhørte i studien, derfor hadde ansvaret for merking av beholderne, og oppnådde i på denne måten at samarbeidspartnere og deltakere i undersøkelsen ikke kjente innholdet før etter at studien var ferdig.

Standardisering og kalibrering: Dataene ble samlet inn ved hjelp av instrumenter og forsyninger med samme kommersielle merker, i en enkelt stol, under samme belysning og av en enkelt undersøker når det gjelder kliniske data og en annen undersøker for mikrobiologiske variabler.

For standardisering ble målinger utført under samme forhold og ved bruk av samme type instrument, for å redusere den tilhørende bias. Instrumentene som ble brukt til datainnsamling var alle de samme i design og merke: Grunnleggende undersøkelsessett: Speil, kariesprobe, pinsett (Hu-Friedy® Manufacturing Inc., Chicago, IL, USA), manuell periodontalsonde (North Carolina Probe. Hu-Friedy® Manufacturing Inc., Chicago, IL, USA), plakettsøker-tabletter (Curaprox © CURADEN AG, Sveits) og nummer 40 sterile papirkjegler (Johnson & Johnson, Tokyo, Japan). Siden det bare var én undersøker (KL) ) involvert i studien, ble intra-eksaminator pålitelighetsvurdering utført. Denne undersøkeren (intra-klasse korrelasjonskoeffisient på 0,96 og 0,95 for PPD og CAL), registrerte alle angitte variabler, i en klinisk fil designet spesielt for studien. Mikrobiologisk prøvetaking og NSPT ble utført av en enkelt kliniker (PO). Den komplette PCR-prosessen ble utført av en biokjemiker som tilhører mikrobiologilaboratoriet, Santiago campus ved UNAB.

Periodontopatogener: Tilstedeværelsen av periodontopatogener ble vurdert når agarosegelen i elektroforesen ble eksponert for ultrafiolett lys, et bånd på stedet for de 197 baseparene (bp) ble observert i banen som inneholdt pasientens subgingivale biofloraprøve på Pg, 316 basepar. for Td, 745 for Tf og 167 for Fn.

Datainnsamling og instrument: Før datainnsamlingen ble alle forsøkspersoner som tilhørte studien bedt om et panorama-røntgenbilde for diagnostiske formål. Deretter ble den periodontale undersøkelsen utført med registrering av de kliniske variablene beskrevet ovenfor i en journal.

Innhenting av mikrobiologiske prøver: Den mikrobiologiske undersøkelsen ble utført før NSPT på begge grupper. Innsamlingen av mikrobiologiske prøver var basert på en protokoll som brukes ved Universitetet i Chile. Ved bruk av sterile papirkjegler nummer 40 ble det tatt en prøve av subgingival bioflora fra stedet med høyest CAL, innenfor de med PD ≥ 5 mm, og en munnhygieneinstruksjon ble utført. Før innsamling av subgingival bioflora ble området renset med et sterilt gasbind for å eliminere den supragingival biofilm. Deretter, med en pinsett, ble en papirkjegle tatt, og tuppen ble plassert i sulcus på studiestedet i 20 sekunder, for å sikre absorpsjon av crevicular væske og subgingival bioflora. Hver biologisk prøve som ble oppnådd ble suspendert i et Eppendorf-rør med 1 ml destillert vann og transportert i kjøleskap ved en temperatur på ca. 4°C, innen en tid på ikke over 3 timer, for deretter å lagres midlertidig ved -80°C, til dens overføring og påfølgende ekstraksjon av deoksyribonukleinsyre (DNA) og PCR-teknikk. Tiden mellom prøvetaking og DNA-ekstraksjon oversteg ikke 48 timer, for å unngå forringelse av det biologiske materialet.

Periodontal behandling: Når den foreløpige innsamlingen av alle variablene var fullført, ble ikke-kirurgisk periodontal behandling (NSPT) utført, som begynte med supra og subgingival full-munn dekontaminering, ved bruk av en elektrisk piezo (DTE®, Guilin Woodpecker Medical Instrument Co. , Ltd., Guilin, Guangxi, Folkerepublikken Kina), etterfulgt av rotplanlegging på steder med PD ≥ 5 mm og CAL≥ 4 mm, ved bruk av Gracey-kyretter (Hu-Friedy® Manufacturing Inc., Chicago, Illinois (IL), USA) . Denne terapien ble utført på alle pasienter, både i intervensjons- og kontrollgruppen, under full munnbehandlingsprotokoll, i 1 eller 2 arbeidsøkter, som varte fra 1 til 2 timer, og oppnådde behandling innen 24 timer.

Azitromycin eller placeboadministrering: Ved slutten av siste behandlingsøkt ble antibiotikaen azitromycin (Azithromycin, Laboratory Chile) eller placebo (Lactose, Galenic Pharmacy) administrert, avhengig av henholdsvis gruppe, intervensjon eller kontroll som pasienten tilhørte . For begge behandlingene var administreringsregimet 1 tablett på 500 mg oralt per dag, i 3 påfølgende dager. For å opprettholde dobbeltblindet hadde beholderne som ble brukt for azitromycin og placebo de samme egenskapene med hensyn til størrelse og farge. Når det gjelder azitromycin-tabletter og placebo, var disse visuelt identiske.

Deretter, ved første, tredje og sjette måned etter avsluttet ikke-kirurgisk behandling, ble det utført en ny samling av alle de kliniske variablene målt i begynnelsen av studien, mens de mikrobiologiske variablene ble målt på nytt ved tredje og sjette måneder etter behandling, fra samme sted som ble brukt i den første prøvetakingen.

Statistisk analyse: Analysen av dataene ble utført i henhold til de spesifikke målene for forskningen, ved bruk av dataprogrammet Statistical Package for the Social Sciences (SPSS). Det ble utført en deskriptiv analyse hvor de kvalitative variablene ble studert etter frekvens, mens de kvantitative ble analysert gjennom gjennomsnittet. Resultatene oppnådd i begge tilfeller ble uttrykt i frekvenstabeller. For hver variabel ble datanormalitetstesten utført i henhold til Shapiro-Wilk-testen. Deretter ble det utført en slutningsanalyse for de kvantitative variablene. Nivået av statistisk signifikans ble fastsatt i henhold til Student t og Chi-Square testen, mens for de kvalitative variablene ble den ikke-parametriske McNemar testen utført. Signifikante p-verdier <0,05 ble vurdert, med sikte på å presentere et konfidensnivå på 95 %.

Etiske implikasjoner, biosikkerhet og annet. Hver pasient ble informert i detalj om alt som innebærer å utføre forskningsarbeidet, i henhold til forståelsesnivået for hvert enkelt emne og ble gitt et informert samtykke, hvor formålet med studien er spesifisert skriftlig sammen med prosedyrene som skal utføres for begge, kontrollgruppen og intervensjonsgruppen, i tillegg til kostnadene og fordelene ved å delta. Designet, sammen med protokollen for denne studien, var basert på Helsinki-erklæringen og ble godkjent av den vitenskapelige etiske komiteen ved Det odontologiske fakultet, Viña del Mar campus ved UNAB. På den annen side, for riktig utvikling av undersøkelsen ble relevante kliniske undersøkelser utført i henhold til gjeldende biosikkerhetsforskrifter ved den virksomheten. Prøven tatt fra den subgingivale biofloraen til pasienten består av en fullstendig uskadelig, rask og enkel teknikk, som kun ble oppnådd fra et periodontalt sted. Når undersøkelsen var fullført, ble alt utvunnet materiale destruert, og oppnådd det eliminert ved hjelp av internasjonale standarder for håndtering av biologiske prøver. Alle deltakerne fikk gratis de nødvendige elementene for riktig munnhygiene, og lærte dem den riktige måten å rense munnen på. I tillegg ble de gjort kjent med diagnose, behandlingsplan og oppnådde resultater. Når det gjelder de undersøkte pasientene som ikke oppfylte studiens inklusjons- og/eller eksklusjonskriterier, ble de henvist til faget klinisk periodonti for det fjerde året, som undervisningsassistent eller postgraduate of periodontics ved UNAB, etter behov, for skal behandles periodontalt. Når det gjelder bruk av systemiske antibiotika som adjuvant behandling, har dette vist seg å være klinisk mer effektivt enn periodontal behandling forbundet med placebo. Azitromycin, på den annen side, har et handlingsspektrum som involverer aerobe og anaerobe gramnegative bakterier, blant annet periodontopatogene, det har en utmerket gastrointestinal absorpsjon, lang halveringstid og begrensede bivirkninger. På grunn av egenskapene, kan det bli et levedyktig alternativ i periodonti til dagens adjuvante antibiotikakur av amoxicillin med metronidazol. Når det gjelder bruken av placebo (laktose), er det karakterisert for å være av ren eller inaktiv type, det vil si hva tilsvarer et inert stoff som ikke har noen farmakologisk virkning hos pasienten, og derfor er det vanligvis den type placebo som velges i studier av kliniske studier. Laktose er et disakkarid som oppstår ved binding av glukose og galaktose, og disse placeboene tilsvarer kapsler med et krystallinsk pulver, hvitt, luktfritt og med en lett søt smak, hvis bivirkninger av bruken forekommer sjelden, hovedsakelig hos pasienter som har inntatt overdreven mengder laktose og/eller har intoleranse mot det, som genererer symptomer som magesmerter, flatulens, diaré, oppblåsthet, kvalme og oppkast. Det skal bemerkes at til tross for lav forekomst av bivirkninger hos begge, laktose og azitromycin, ble pasientene advarte om mulige effekter, og indikerer at i møte med ethvert ubehag som kan tilskrives forbruket av tablettene, ville de gå til forskerne for å stoppe administreringen av disse og bli eliminert fra studien.