Efficacia dell'azitromicina in aggiunta al trattamento parodontale non chirurgico

Definizione del campione: Pazienti di età superiore ai 18 anni ricoverati presso l'Unità Diagnostica della Facoltà di Odontoiatria (DUFD), campus di Viña del Mar dell'Universidad Nacional Andres Bello (UNAB) nel corso del 2016, con diagnosi di parodontite grave, che soddisfano sia il criteri di inclusione ed esclusione e accetta volontariamente di partecipare al presente lavoro di ricerca, firmando un consenso informato. I partecipanti scelti sono stati informati della natura della ricerca, dei potenziali rischi e del compenso per la partecipazione allo studio, ottenendo il consenso informato da ogni paziente.

Calcolo della dimensione del campione: per calcolare la dimensione minima del campione necessaria per la costituzione dei gruppi di controllo e di intervento, la varianza della differenza di profondità di sondaggio è stata considerata come valori fissi, basati sui risultati sopra descritti. Considerando quanto sopra e utilizzando un livello di significatività del 5%, una potenza statistica dell'80% e un errore di stima di 1 mm, sono stati ottenuti almeno 7 pazienti per ciascun gruppo, per un totale di 14 soggetti minimi da studiare.

Protocollo ed esame clinico: su un totale di 32 pazienti selezionati, 20 di quelli che soddisfacevano i criteri di inclusione sono stati assegnati in modo casuale dal coordinatore dello studio a uno dei due gruppi utilizzando una sequenza di generazione casuale utilizzando un software. Due soggetti hanno rifiutato di partecipare alla ricerca, quindi lo studio ha avuto 9 partecipanti in ciascun gruppo. In questo modo, sono stati formati due gruppi per indagare: un gruppo di intervento che ha ricevuto NSPT più 500 mg di azitromicina una volta al giorno per tre giorni immediatamente dopo il NSPT, e un gruppo di controllo che ha ricevuto NSPT più placebo nelle stesse condizioni del gruppo di intervento .

Randomizzazione: solo il ricercatore principale, che ha effettuato la randomizzazione utilizzando il programma Epidat 4.0, era a conoscenza del contenuto dei contenitori e del gruppo a cui apparteneva ogni paziente nello studio, pertanto, era incaricato di etichettare i contenitori, ottenendo in in questo modo i collaboratori ei partecipanti all'indagine non ne conoscevano il contenuto se non dopo la conclusione dello studio.

Standardizzazione e calibrazione: I dati sono stati raccolti utilizzando strumenti e forniture con gli stessi marchi commerciali, in un'unica sedia, sotto la stessa illuminazione e da un unico esaminatore nel caso di dati clinici e un altro esaminatore per le variabili microbiologiche.

Per la standardizzazione, le misurazioni sono state eseguite nelle stesse condizioni e utilizzando lo stesso tipo di strumento, al fine di ridurre il bias associato. Gli strumenti utilizzati per la raccolta dei dati erano tutti uguali per design e marca: Basic Examination Kit: Specchio, sonda carie, pinzette (Hu-Friedy® Manufacturing Inc., Chicago, IL, USA), sonda parodontale manuale (North Carolina Probe. Hu-Friedy® Manufacturing Inc., Chicago, IL, USA), pastiglie cercaplacche (Curaprox © CURADEN AG, Svizzera) e 40 coni di carta sterili (Johnson & Johnson, Tokyo, Giappone). ) coinvolti nello studio, è stata eseguita la valutazione dell'affidabilità intra-esaminatore. Questo esaminatore (coefficiente di correlazione intraclasse di 0,96 e 0,95 per PPD e CAL), ha registrato tutte le variabili previste, in una cartella clinica progettata appositamente per lo studio. Il campionamento microbiologico e il NSPT sono stati eseguiti da un singolo medico (PO). Il processo completo di PCR è stato eseguito da un biochimico appartenente al laboratorio di microbiologia, campus di Santiago dell'UNAB.

Parodontopatogeni: la presenza di parodontopatogeni è stata considerata quando si espone il gel di agarosio dell'elettroforesi alla luce ultravioletta, è stata osservata una banda nel sito delle 197 paia di basi (bp) nella corsia che possiede il campione di bioflora sottogengivale del paziente di Pg, 316 paia di basi per Td, 745 per Tf e 167 per Fn.

Raccolta dati e strumento: Prima della raccolta dati, a tutti i soggetti appartenenti allo studio è stata richiesta una radiografia panoramica a scopo diagnostico. Successivamente è stato eseguito l'esame parodontale registrando le variabili cliniche sopra descritte in una cartella clinica.

Prelievo di campioni microbiologici: l'esame microbiologico è stato eseguito prima del NSPT su entrambi i gruppi. La raccolta di campioni microbiologici si è basata su un protocollo utilizzato presso l'Università del Cile. Utilizzando i coni di carta sterili numero 40, è stato prelevato un campione di bioflora sottogengivale dal sito con il CAL più alto, all'interno di quelli con PD ≥ 5 mm, ed è stata eseguita un'istruzione di igiene orale. Prima della raccolta della bioflora sottogengivale, l'area è stata pulita con una garza sterile per eliminare il biofilm sopragengivale. Quindi, con una pinzetta, è stato prelevato un cono di carta e la sua punta è stata posta nel solco del sito di studio per 20 secondi, per garantire l'assorbimento del fluido crevicolare e della bioflora sottogengivale. Ogni campione biologico ottenuto è stato sospeso in una provetta Eppendorf con 1 ml di acqua distillata e trasportato in frigorifero ad una temperatura di circa 4°C, entro un tempo non superiore alle 3 ore, per essere poi temporaneamente conservato a -80°C, fino al suo trasferimento e successiva estrazione dell'acido desossiribonucleico (DNA) e lavorazione con tecnica PCR. Il tempo tra il prelievo e l'estrazione del DNA non ha superato le 48 ore, per evitare il deterioramento del materiale biologico.

Trattamento parodontale: Una volta completata la raccolta preliminare di tutte le variabili, è stato effettuato il trattamento parodontale non chirurgico (NSPT), iniziando con la decontaminazione della bocca intera sopra e sottogengivale, utilizzando un piezo elettrico (DTE®, Guilin Woodpecker Medical Instrument Co. , Ltd., Guilin, Guangxi , Repubblica popolare cinese), seguita dalla pianificazione radicolare nei siti che presentano PD ≥ 5 mm e CAL ≥ 4 mm, utilizzando le curette di Gracey (Hu-Friedy® Manufacturing Inc., Chicago, Illinois (IL), USA) . Questa terapia è stata eseguita in tutti i pazienti, sia nel gruppo di intervento che in quello di controllo, in protocollo di trattamento full mouth, in 1 o 2 sessioni di lavoro, della durata da 1 a 2 ore, raggiungendo il trattamento entro 24 ore.

Somministrazione di azitromicina o placebo: al termine dell'ultima sessione di trattamento, è stato somministrato l'antibiotico azitromicina (Azitromicina, Laboratorio Cile) o un placebo (Lattosio, Farmacia Galenica), a seconda del gruppo, intervento o controllo rispettivamente, a cui apparteneva il paziente . Per entrambe le terapie, il regime di somministrazione è stato di 1 compressa da 500 mg per via orale al giorno, per 3 giorni consecutivi. Per mantenere il doppio cieco, i contenitori utilizzati per l'azitromicina e il placebo presentavano le stesse caratteristiche per quanto riguarda dimensione e colore. Per quanto riguarda le compresse di azitromicina e il placebo, questi erano visivamente identici.

Successivamente, al primo, terzo e sesto mese dopo la fine del trattamento non chirurgico, è stata effettuata una nuova raccolta di tutte le variabili cliniche misurate all'inizio dello studio, mentre le variabili microbiologiche sono state nuovamente misurate al terzo e sesto mese. mesi dopo il trattamento, dallo stesso sito utilizzato nel primo campionamento.

Analisi statistica: L'analisi dei dati è stata effettuata secondo gli obiettivi specifici della ricerca, utilizzando il programma per computer Statistical Package for the Social Sciences (SPSS). È stata effettuata un'analisi descrittiva in cui le variabili qualitative sono state studiate per frequenza, mentre quelle quantitative sono state analizzate per media. I risultati ottenuti in entrambi i casi sono stati espressi in tabelle di frequenza. Per ogni variabile è stato eseguito il test di normalità dei dati secondo il test di Shapiro-Wilk. Successivamente, è stata effettuata un'analisi inferenziale per le variabili quantitative. Il livello di significatività statistica è stato stabilito secondo il test Student t e Chi-Quadro, mentre per le variabili qualitative è stato eseguito il test non parametrico di McNemar. Sono stati considerati valori p significativi <0,05, con l'obiettivo di presentare un livello di confidenza del 95%.

Implicazioni etiche, biosicurezza e altro Ogni paziente è stato informato dettagliatamente di tutto ciò che comporta lo svolgimento del lavoro di ricerca, in base al livello di comprensione di ciascun soggetto e ha ricevuto un consenso informato, in cui l'obiettivo dello studio è specificato per iscritto insieme a le procedure da eseguire sia per il gruppo di controllo che per il gruppo di intervento, oltre ai costi e ai benefici della partecipazione. Il progetto, insieme al protocollo del presente studio, si è basato sulla Dichiarazione di Helsinki ed è stato approvato dal Comitato Etico Scientifico della Facoltà di Odontoiatria, campus di Viña del Mar dell'UNAB. dell'indagine, sono stati effettuati gli esami clinici pertinenti seguendo le norme di biosicurezza in vigore presso tale stabilimento. Il campione prelevato dalla bioflora sottogengivale del paziente consiste in una tecnica totalmente innocua, veloce e semplice, che è stata prelevata solo da un sito parodontale. Una volta completata l'indagine, tutto il materiale estratto è stato distrutto, ottenendone l'eliminazione mediante gli standard internazionali di manipolazione dei campioni biologici. A tutti i partecipanti sono stati forniti gratuitamente gli elementi necessari per una corretta igiene orale, insegnando loro il modo corretto di igienizzare la bocca. Inoltre, sono stati messi a conoscenza della diagnosi, del piano di trattamento e dei risultati ottenuti. Per quanto riguarda i pazienti esaminati che non soddisfacevano i criteri di inclusione e/o esclusione dello studio, sono stati indirizzati alla materia di Parodontologia clinica per il quarto anno, come assistente alla didattica o Post-laurea di Parodontologia presso l'UNAB, a seconda dei casi, al fine da trattare parodontalmente. Per quanto riguarda l'uso di antibiotici sistemici come trattamento adiuvante, questo si è dimostrato clinicamente più efficace del trattamento parodontale associato al placebo. L'azitromicina ha invece uno spettro d'azione che coinvolge batteri Gram negativi aerobi ed anaerobi, tra cui i parodontopatogeni, ha un ottimo assorbimento gastrointestinale, lunga emivita e limitati effetti avversi. Per le sue proprietà potrebbe diventare una valida alternativa in parodontologia all'attuale regime antibiotico adiuvante di amoxicillina con metronidazolo. Per quanto riguarda l'uso del placebo (lattosio), si caratterizza per essere del tipo puro o inattivo, cioè quello che corrisponde a una sostanza inerte che non ha alcuna azione farmacologica nel paziente, motivo per cui è solitamente il tipo di placebo di scelta negli studi di sperimentazione clinica. Il lattosio è un disaccaride derivante dal legame di glucosio e galattosio, e questi placebo corrispondono a capsule dalla polvere cristallina, bianca, inodore e dal sapore leggermente dolce, i cui effetti collaterali al suo uso si manifestano raramente, soprattutto in pazienti che hanno ingerito quantità eccessive di quantità di lattosio e/o hanno intolleranza ad esso, generando sintomi quali dolori addominali, flatulenza, diarrea, meteorismo, nausea e vomito. Va notato che, nonostante la bassa prevalenza di reazioni avverse in entrambi, lattosio e azitromicina, i pazienti sono stati ha messo in guardia sui possibili effetti, indicando che di fronte a qualsiasi disagio riconducibile al consumo delle compresse si sarebbero rivolti ai ricercatori per sospendere la somministrazione di queste ed essere eliminati dallo studio.