Effekten af ​​Azithromycin som et supplement til ikke-kirurgisk periodontal behandling

Definition af prøven: Patienter over 18 år indlagt på Diagnostic Unit of the Dentistry Faculty (DUFD), Viña del Mar campus på Universidad Nacional Andres Bello (UNAB) i løbet af 2016, med en diagnose af svær paradentose, der opfylder både inklusions- og eksklusionskriterier og frivilligt indvilliger i at deltage i dette forskningsarbejde ved at underskrive et informeret samtykke. De udvalgte deltagere blev informeret om arten af ​​forskningen, potentielle risici og kompensation for at deltage i undersøgelsen, idet de indhentede informeret samtykke fra hver patient.

Prøvestørrelsesberegning: For at beregne den minimale stikprøvestørrelse, der er nødvendig for sammensætningen af ​​kontrol- og interventionsgrupperne, blev variansen af ​​sonderingsdybdeforskellen betragtet som faste værdier, som var baseret på resultaterne beskrevet ovenfor. I betragtning af ovenstående og anvendelse af et niveau med en signifikans på 5 %, en statistisk styrke på 80 % og en estimeringsfejl på 1 mm, blev der opnået mindst 7 patienter for hver gruppe, hvilket giver i alt 14 minimumspersoner til undersøgelse.

Protokol og klinisk undersøgelse: Ud af i alt 32 patienter, der blev udvalgt, blev 20 af dem, der opfyldte inklusionskriterierne, tilfældigt tildelt af studiekoordinatoren til en af ​​de to grupper ved hjælp af en tilfældig genereringssekvens ved brug af en software. To forsøgspersoner afviste at deltage i forskningen, så undersøgelsen havde 9 deltagere i hver gruppe. På denne måde blev der dannet to grupper til at undersøge: en interventionsgruppe, der fik NSPT plus 500 mg azithromycin én gang dagligt i tre dage umiddelbart efter NSPT, og en kontrolgruppe, der fik NSPT plus placebo under samme betingelser som interventionsgruppen .

Randomisering: Kun hovedinvestigatoren, som foretog randomiseringen ved hjælp af Epidat 4.0-programmet, havde viden om indholdet af beholderne og den gruppe, som hver patient tilhørte i undersøgelsen, var derfor ansvarlig for at mærke beholderne og opnå i på den måde, at samarbejdspartnere og deltagere i undersøgelsen først kendte deres indhold efter undersøgelsen var afsluttet.

Standardisering og kalibrering: Dataene blev indsamlet ved hjælp af instrumenter og forsyninger med de samme kommercielle mærker, i en enkelt stol, under samme belysning og af en enkelt undersøger i tilfælde af kliniske data og en anden undersøger for mikrobiologiske variabler.

Til standardisering blev målinger udført under de samme forhold og med samme type instrument, for at reducere den tilhørende bias. Instrumenterne, der blev brugt til dataindsamling, var alle ens i design og mærke: Basic Examination Kit: Spejl, cariesprobe, pincet (Hu-Friedy® Manufacturing Inc., Chicago, IL, USA), manuel parodontalsonde (North Carolina Probe. Hu-Friedy® Manufacturing Inc., Chicago, IL, USA), plaquefinder-tabletter (Curaprox © CURADEN AG, Schweiz) og nummer 40 sterile papirkegler (Johnson & Johnson, Tokyo, Japan). Da der kun var én eksaminator (KL) ) involveret i undersøgelsen, blev intra-eksaminator pålidelighedsvurdering udført. Denne eksaminator (intra-klasse korrelationskoefficient på 0,96 og 0,95 for PPD og CAL) registrerede alle angivne variabler i en klinisk fil designet specielt til undersøgelsen. Mikrobiologisk prøveudtagning og NSPT blev udført af en enkelt kliniker (PO). Den komplette PCR-proces blev udført af en biokemiker tilhørende mikrobiologilaboratoriet, Santiago campus på UNAB.

Parodontopatogener: Tilstedeværelsen af ​​parodontopatogener blev overvejet, når agarosegelen fra elektroforesen blev udsat for ultraviolet lys, et bånd på stedet for de 197 basepar (bp) blev observeret i banen med patientens subgingivale biofloraprøve på Pg, 316 basepar for Td, 745 for Tf og 167 for Fn.

Dataindsamling og instrument: Forud for dataindsamlingen blev alle forsøgspersoner, der hørte til undersøgelsen, bedt om et panoramisk røntgenbillede til diagnostiske formål. Efterfølgende blev den parodontale undersøgelse udført, hvor de ovenfor beskrevne kliniske variable blev registreret i en journal.

Indhentning af mikrobiologiske prøver: Den mikrobiologiske undersøgelse blev udført før NSPT på begge grupper. Indsamlingen af ​​mikrobiologiske prøver var baseret på en protokol, der bruges på University of Chile. Ved hjælp af sterile papirkegler nummer 40 blev en prøve af subgingival bioflora taget fra stedet med den højeste CAL, inden for dem med PD ≥ 5 mm, og en mundhygiejneinstruktion blev udført. Før indsamlingen af ​​subgingival bioflora blev området renset med en steril gaze for at fjerne den supragingival biofilm. Derefter, med en pincet, blev en papirkegle taget, og dens spids blev placeret i sulcus af undersøgelsesstedet i 20 sekunder for at sikre absorptionen af ​​crevicular væske og subgingival bioflora. Hver opnået biologisk prøve blev suspenderet i et Eppendorf-rør med 1 ml destilleret vand og transporteret i et køleskab ved en temperatur på ca. 4°C inden for en tid på højst 3 timer for derefter at blive midlertidigt opbevaret ved -80°C, indtil dets overførsel og efterfølgende ekstraktion af deoxyribonukleinsyre (DNA) og PCR-teknik. Tiden mellem prøvetagning og DNA-ekstraktion oversteg ikke 48 timer for at undgå forringelse af det biologiske materiale.

Parodontal behandling: Når den foreløbige indsamling af alle variablerne var afsluttet, blev ikke-kirurgisk parodontal behandling (NSPT) udført, begyndende med supra og subgingival fuldmundsdekontaminering ved hjælp af en elektrisk piezo (DTE®, Guilin Woodpecker Medical Instrument Co. , Ltd., Guilin, Guangxi, Folkerepublikken Kina), efterfulgt af rodplanlægning på steder med PD ≥ 5 mm og CAL≥ 4 mm ved brug af Gracey curetter (Hu-Friedy® Manufacturing Inc., Chicago, Illinois (IL), USA) . Denne terapi blev udført hos alle patienter, både i interventions- og kontrolgruppen, under fuldmundbehandlingsprotokol, i 1 eller 2 arbejdssessioner, der varede fra 1 til 2 timer, og opnåede behandling inden for 24 timer.

Administration af azithromycin eller placebo: Ved afslutningen af ​​den sidste behandlingssession blev antibiotikummet azithromycin (Azithromycin, Laboratory Chile) eller en placebo (Lactose, Galenic Pharmacy) administreret, afhængigt af henholdsvis den gruppe, intervention eller kontrol, som patienten tilhørte . For begge behandlinger var administrationsregimet 1 tablet á 500 mg oralt dagligt i 3 på hinanden følgende dage. For at opretholde dobbeltblindet udviste beholderne, der blev brugt til azithromycin og placebo, de samme karakteristika med hensyn til størrelse og farve. Med hensyn til azithromycin-tabletter og placebo var disse visuelt identiske.

Efterfølgende blev der ved første, tredje og sjette måned efter afslutningen af ​​den ikke-kirurgiske behandling udført en ny samling af alle de kliniske variable målt i starten af ​​undersøgelsen, mens de mikrobiologiske variable blev målt igen ved tredje og sjette måneder efter behandling, fra samme sted, som blev brugt i den første prøveudtagning.

Statistisk analyse: Analysen af ​​dataene blev udført i overensstemmelse med de specifikke mål for forskningen ved hjælp af computerprogrammet Statistical Package for the Social Sciences (SPSS). Der blev udført en deskriptiv analyse, hvor de kvalitative variable blev undersøgt efter frekvens, mens de kvantitative blev analyseret gennem gennemsnittet. De opnåede resultater i begge tilfælde blev udtrykt i frekvenstabeller. For hver variabel blev datanormalitetstesten udført i henhold til Shapiro-Wilk-testen. Derefter blev der udført en inferentiel analyse for de kvantitative variable. Niveauet af statistisk signifikans blev fastsat i henhold til Student t og Chi-Square testen, mens for de kvalitative variable blev den ikke-parametriske McNemar test udført. Signifikante p-værdier <0,05 blev overvejet med det formål at præsentere et konfidensniveau på 95 %.

Etiske implikationer, biosikkerhed og andet. Hver patient blev informeret i detaljer om alt, hvad der indebærer udførelse af forskningsarbejdet, i overensstemmelse med niveauet af forståelse for hvert emne og fik et informeret samtykke, hvor formålet med undersøgelsen er specificeret skriftligt sammen med de procedurer, der skal udføres for begge, kontrolgruppen og interventionsgruppen, foruden omkostninger og fordele ved at deltage. Designet, sammen med protokollen for nærværende undersøgelse, var baseret på Helsinki-erklæringen og blev godkendt af den videnskabsetiske komité på Det Odontologiske Fakultet, Viña del Mar campus på UNAB. På den anden side for den korrekte udvikling af undersøgelsen blev relevante kliniske undersøgelser udført i henhold til de gældende biosikkerhedsregler på den pågældende virksomhed. Prøven taget fra patientens subgingivale bioflora består af en fuldstændig uskadelig, hurtig og enkel teknik, som kun blev opnået fra et parodontalt sted. Da undersøgelsen var afsluttet, blev alt udvundet materiale destrueret, hvilket opnåede dets eliminering ved hjælp af de internationale standarder for håndtering af biologiske prøver. Alle deltagere fik gratis de nødvendige elementer til korrekt mundhygiejne, og lærte dem den korrekte måde at rense deres mund på. Derudover blev de gjort opmærksomme på diagnosen, behandlingsplanen og opnåede resultater. Med hensyn til de undersøgte patienter, som ikke opfyldte undersøgelsens inklusions- og/eller eksklusionskriterier, blev de henvist til faget Klinisk parodonti på fjerde år som undervisningsassistent eller postgraduate of periodontics ved UNAB, alt efter hvad der var relevant, mhp. skal behandles parodontalt. Hvad angår brugen af ​​systemiske antibiotika som adjuverende behandling, har dette vist sig at være klinisk mere effektivt end den parodontale behandling forbundet med placebo. Azithromycin har på den anden side et virkningsspektrum, der involverer aerobe og anaerobe gramnegative bakterier, blandt hvilke parodontopatogene stoffer, det har en fremragende gastrointestinal absorption, lang halveringstid og begrænsede bivirkninger. På grund af dets egenskaber kan det blive et levedygtigt alternativ i parodontika til den nuværende adjuverende antibiotikakur af amoxicillin med metronidazol. Med hensyn til brugen af ​​placebo (laktose) er den karakteriseret ved at være af den rene eller inaktive type, dvs. svarer til et inert stof, som ikke har nogen farmakologisk virkning hos patienten, hvorfor det normalt er den type placebo, man foretrækker i studier af kliniske forsøg. Lactose er et disaccharid, der er et resultat af bindingen af ​​glucose og galactose, og disse placeboer svarer til kapsler med et krystallinsk pulver, hvidt, lugtfrit og med en let sødlig smag, hvis bivirkninger ved dets anvendelse forekommer sjældent, hovedsageligt hos patienter, der har indtaget for meget mængder af laktose og/eller har intolerance over for det, hvilket genererer symptomer såsom mavesmerter, flatulens, diarré, oppustethed, kvalme og opkastning. Det skal bemærkes, at på trods af den lave forekomst af bivirkninger hos både laktose og azithromycin, advaret om de mulige virkninger, hvilket indikerer, at i lyset af ethvert ubehag, der kan tilskrives forbruget af tabletterne, ville de gå til forskerne for at stoppe administrationen af ​​disse og blive elimineret fra undersøgelsen.