Eficacia de la azitromicina como complemento del tratamiento periodontal no quirúrgico

Definición de la muestra: Pacientes mayores de 18 años ingresados ​​en la Unidad de Diagnóstico de la Facultad de Odontología (DUFD), campus Viña del Mar de la Universidad Nacional Andrés Bello (UNAB) durante el año 2016, con diagnóstico de periodontitis severa, cumpliendo tanto con el criterios de inclusión y exclusión y aceptan voluntariamente participar del presente trabajo de investigación, firmando un consentimiento informado. Los participantes elegidos fueron informados de la naturaleza de la investigación, los riesgos potenciales y la compensación por participar en el estudio, obteniendo el consentimiento informado de cada paciente.

Cálculo del tamaño de la muestra: Para calcular el tamaño de muestra mínimo necesario para la constitución de los grupos de control e intervención, se consideró como valores fijos la varianza de la diferencia de profundidad de sondaje, que se basó en los resultados descritos anteriormente. Considerando lo anterior y utilizando un nivel de significación del 5%, una potencia estadística del 80% y un error de estimación de 1 mm, se obtuvieron al menos 7 pacientes por cada grupo, dando un total de 14 sujetos mínimos a estudiar.

Protocolo y examen clínico: De un total de 32 pacientes seleccionados, 20 de los que cumplieron con los criterios de inclusión fueron asignados aleatoriamente por el coordinador del estudio a uno de los dos grupos mediante una secuencia de generación aleatoria mediante un software. Dos sujetos se negaron a participar en la investigación, por lo que el estudio contó con 9 participantes en cada grupo. De esta forma, se formaron dos grupos a investigar: un grupo de intervención que recibió NSPT más 500 mg de azitromicina una vez al día durante tres días inmediatamente después de la NSPT, y un grupo control que recibió NSPT más placebo en las mismas condiciones que el grupo de intervención .

Aleatorización: Solo el investigador principal, quien realizó la aleatorización utilizando el programa Epidat 4.0, tenía conocimiento sobre el contenido de los envases y el grupo al que pertenecía cada paciente en estudio, por lo tanto, se encargó de rotular los envases, logrando en de esta forma, los colaboradores y participantes en la investigación no conocieron su contenido hasta después de finalizado el estudio.

Estandarización y calibración: Los datos fueron recolectados utilizando instrumentos e insumos de las mismas marcas comerciales, en una sola silla, bajo la misma iluminación y por un solo examinador en el caso de datos clínicos y otro examinador para variables microbiológicas.

Para la estandarización, las mediciones se realizaron en las mismas condiciones y utilizando el mismo tipo de instrumento, con el fin de reducir el sesgo asociado. Los instrumentos utilizados para la recolección de datos fueron todos iguales en diseño y marca: Kit de examen básico: espejo, sonda de caries, pinzas (Hu-Friedy® Manufacturing Inc., Chicago, IL, EE. UU.), sonda periodontal manual (Sonda de Carolina del Norte. Hu-Friedy® Manufacturing Inc., Chicago, IL, EE. UU.), tabletas detectoras de placa (Curaprox © CURADEN AG, Suiza) y conos de papel estériles número 40 (Johnson & Johnson, Tokio, Japón). Como solo había un examinador (KL ) involucrados en el estudio, se realizó una evaluación de la confiabilidad intraexaminador. Este examinador (coeficiente de correlación intraclase de 0,96 y 0,95 para PPD y CAL), registró todas las variables estipuladas, en un expediente clínico diseñado especialmente para el estudio. El muestreo microbiológico y NSPT fue realizado por un solo clínico (PO). El proceso completo de PCR fue realizado por un bioquímico perteneciente al laboratorio de microbiología sede Santiago de la UNAB.

Periodontopatógenos: Se consideró la presencia de periodontopatógenos al exponer el gel de agarosa de la electroforesis a la luz ultravioleta, se observó una banda en el sitio de los 197 pares de bases (pb) en el carril que poseía la muestra de bioflora subgingival del paciente de Pg, 316 pares de bases para Td, 745 para Tf y 167 para Fn.

Toma de datos e instrumento: Previo a la toma de datos, a todos los sujetos pertenecientes al estudio se les solicitó una radiografía panorámica con fines diagnósticos. Posteriormente se realizó el examen periodontal registrando las variables clínicas antes descritas en una ficha clínica.

Obtención de muestras microbiológicas: El examen microbiológico se realizó antes del NSPT en ambos grupos. La recolección de muestras microbiológicas se basó en un protocolo que se utiliza en la Universidad de Chile. Utilizando conos de papel estériles número 40, se tomó una muestra de bioflora subgingival del sitio con mayor CAL, dentro de aquellos con DP ≥ 5mm, y se realizó una instrucción de higiene bucal. Previo a la recolección de la bioflora subgingival, se limpió el área con una gasa estéril para eliminar el biofilm supragingival. Luego, con una pinza, se tomó un cono de papel y se colocó su punta en el surco del sitio de estudio durante 20 segundos, para asegurar la absorción del líquido crevicular y la bioflora subgingival. Cada muestra biológica obtenida fue suspendida en un tubo Eppendorf con 1 ml de agua destilada y transportada en refrigerador a una temperatura de 4°C aproximadamente, en un tiempo no mayor a 3 horas, para luego ser almacenada temporalmente a -80°C, hasta su transferencia y posterior extracción de ácido desoxirribonucleico (ADN) y procesamiento mediante técnica PCR. El tiempo entre el muestreo y la extracción de ADN no superó las 48 horas, para evitar el deterioro del material biológico.

Tratamiento periodontal: Una vez finalizada la recolección preliminar de todas las variables, se procedió al tratamiento periodontal no quirúrgico (NSPT), comenzando con descontaminación supra y subgingival de toda la boca, utilizando un piezo eléctrico (DTE®, Guilin Woodpecker Medical Instrument Co. , Ltd., Guilin, Guangxi, República Popular de China), seguido de alisado radicular en sitios que presenten PD ≥ 5 mm y CAL ≥ 4 mm, utilizando curetas Gracey (Hu-Friedy® Manufacturing Inc., Chicago, Illinois (IL), EE. UU.) . Esta terapia se realizó en todos los pacientes, tanto en el grupo de intervención como en el de control, bajo protocolo de tratamiento de boca completa, en 1 o 2 sesiones de trabajo, con una duración de 1 a 2 horas, lográndose el tratamiento en 24 horas.

Administración de azitromicina o placebo: Al final de la última sesión de tratamiento se administró el antibiótico azitromicina (Azitromicina, Laboratorio Chile) o un placebo (Lactosa, Farmacia Galénica), dependiendo del grupo, intervención o control respectivamente, al que pertenecía el paciente . Para ambas terapias, la pauta de administración fue de 1 comprimido de 500 mg por vía oral al día, durante 3 días consecutivos. Para mantener el doble ciego, los envases utilizados para la azitromicina y el placebo presentaron las mismas características en cuanto a tamaño y color. En cuanto a las tabletas de azitromicina y el placebo, estos eran visualmente idénticos.

Posteriormente, al primer, tercer y sexto mes tras finalizar el tratamiento no quirúrgico, se realizó una nueva recogida de todas las variables clínicas medidas al inicio del estudio, mientras que las variables microbiológicas se volvieron a medir al tercer y sexto mes. meses después del tratamiento, del mismo sitio utilizado en el primer muestreo.

Análisis estadístico: El análisis de los datos se realizó de acuerdo con los objetivos específicos de la investigación, utilizando el programa informático Statistical Package for the Social Sciences (SPSS). Se realizó un análisis descriptivo en el que las variables cualitativas se estudiaron por frecuencia, mientras que las cuantitativas se analizaron por media. Los resultados obtenidos en ambos casos se expresaron en tablas de frecuencia. Para cada variable se realizó la prueba de normalidad de los datos según la prueba de Shapiro-Wilk. Posteriormente, se realizó un análisis inferencial para las variables cuantitativas. El nivel de significancia estadística se estableció según la prueba t de Student y Chi-Cuadrado, mientras que para las variables cualitativas se realizó la prueba no paramétrica de McNemar. Se consideraron valores de p significativos <0,05, con el objetivo de presentar un nivel de confianza del 95%.

Implicaciones éticas, bioseguridad y otras Se informó detalladamente a cada paciente todo lo que implica la realización del trabajo de investigación, según el nivel de comprensión de cada sujeto y se le entregó un consentimiento informado, en el que se especifica por escrito el objetivo del estudio junto con los procedimientos a realizar tanto para el grupo control como para el grupo intervención, además de los costos y beneficios de participar. El diseño, junto con el protocolo del presente estudio, se basó en la Declaración de Helsinki y fue aprobado por el Comité de Ética Científica de la Facultad de Odontología, sede Viña del Mar de la UNAB. Por otro lado, para el correcto desarrollo de la investigación, se realizaron los exámenes clínicos pertinentes siguiendo las normas de bioseguridad vigentes en dicho establecimiento. La toma de muestra de la bioflora subgingival del paciente consiste en una técnica totalmente inocua, rápida y sencilla, la cual se obtuvo únicamente de un sitio periodontal. Una vez finalizada la investigación, se destruyó todo el material extraído, lográndose su eliminación mediante los estándares internacionales de manejo de muestras biológicas. A todos los participantes se les entregó gratuitamente los elementos necesarios para una correcta higiene bucal, enseñándoles la forma correcta de higienizar su boca. Además, se les dio a conocer el diagnóstico, plan de tratamiento y resultados obtenidos. Respecto a los pacientes examinados que no cumplieron con los criterios de inclusión y/o exclusión del estudio, fueron derivados a la asignatura de Periodoncia Clínica de cuarto año, como ayudante de cátedra o Posgrado de Periodoncia en la UNAB, según corresponda, a fin de ser tratado periodontalmente. En cuanto al uso de antibióticos sistémicos como tratamiento adyuvante, este ha demostrado ser clínicamente más eficaz que el tratamiento periodontal asociado a placebo. La azitromicina, por su parte, tiene un espectro de acción que involucra bacterias Gram negativas aerobias y anaerobias, entre las que se encuentran los periodontopatógenos, tiene una excelente absorción gastrointestinal, vida media larga y efectos adversos limitados. Por sus propiedades, podría convertirse en una alternativa viable en periodoncia al actual régimen antibiótico adyuvante de amoxicilina con metronidazol. En cuanto al uso del placebo (lactosa), se caracteriza por ser del tipo puro o inactivo, es decir, que corresponde a una sustancia inerte que no tiene acción farmacológica en el paciente, por lo que suele ser el tipo de placebo de elección en estudios de ensayos clínicos. La lactosa es un disacárido resultante de la unión de glucosa y galactosa, y estos placebos corresponden a cápsulas con un polvo cristalino, blanco, inodoro y de sabor ligeramente dulce, cuyos efectos secundarios a su uso se presentan con poca frecuencia, principalmente en pacientes que han ingerido en exceso cantidades de lactosa y/o presentan intolerancia a la misma, generando síntomas como dolor abdominal, flatulencia, diarrea, distensión abdominal, náuseas y vómitos. Cabe señalar que, a pesar de la baja prevalencia de reacciones adversas tanto en lactosa como en azitromicina, los pacientes fueron advirtió sobre los posibles efectos, indicando que ante cualquier malestar atribuible al consumo de las tabletas acudirían a los investigadores para suspender la administración de estas y ser eliminados del estudio.