Werkzaamheid van azithromycine als aanvulling op niet-chirurgische parodontale behandeling

Definitie van de steekproef: Patiënten ouder dan 18 jaar die in 2016 zijn opgenomen op de Diagnostische Eenheid van de Faculteit der Tandheelkunde (DUFD), campus Viña del Mar van de Universidad Nacional Andres Bello (UNAB), met een diagnose van ernstige parodontitis, die voldoen aan zowel de in- en uitsluitingscriteria en vrijwillig akkoord gaan met deelname aan het huidige onderzoekswerk, ondertekening van een geïnformeerde toestemming. De gekozen deelnemers werden geïnformeerd over de aard van het onderzoek, mogelijke risico's en compensatie voor deelname aan het onderzoek, waarbij van elke patiënt geïnformeerde toestemming werd verkregen.

Berekening van de steekproefomvang: Om de minimale steekproefomvang te berekenen die nodig is voor de samenstelling van de controle- en interventiegroepen, werd de variantie van het peildiepteverschil beschouwd als vaste waarden, die waren gebaseerd op de hierboven beschreven resultaten. Gezien het bovenstaande en het gebruik van een niveau met een significantie van 5%, een statistisch vermogen van 80% en een schattingsfout van 1 mm, werden ten minste 7 patiënten verkregen voor elke groep, waardoor er in totaal minimaal 14 proefpersonen waren om te bestuderen.

Protocol en klinisch onderzoek: van de in totaal 32 patiënten die werden geselecteerd, werden 20 van degenen die voldeden aan de inclusiecriteria willekeurig toegewezen door de studiecoördinator aan een van de twee groepen met behulp van een willekeurige generatievolgorde met behulp van software. Twee proefpersonen weigerden deel te nemen aan het onderzoek, dus de studie had 9 deelnemers in elke groep. Op deze manier werden twee onderzoeksgroepen gevormd: een interventiegroep die NSPT plus 500 mg azithromycine eenmaal daags gedurende drie dagen direct na de NSPT kreeg, en een controlegroep die NSPT plus placebo kreeg onder dezelfde omstandigheden als de interventiegroep .

Randomisatie: alleen de hoofdonderzoeker, die de randomisatie maakte met behulp van het Epidat 4.0-programma, had kennis over de inhoud van de containers en de groep waartoe elke patiënt in het onderzoek behoorde. op deze manier wisten medewerkers en deelnemers aan het onderzoek hun inhoud pas na afloop van het onderzoek.

Standaardisatie en kalibratie: De gegevens zijn verzameld met instrumenten en benodigdheden van dezelfde commerciële merken, in één stoel, onder dezelfde verlichting en door één onderzoeker in het geval van klinische gegevens en een andere onderzoeker voor microbiologische variabelen.

Voor standaardisatie werden metingen uitgevoerd onder dezelfde omstandigheden en met hetzelfde type instrument, om de bijbehorende vertekening te verminderen. De instrumenten die werden gebruikt voor het verzamelen van gegevens waren allemaal hetzelfde qua ontwerp en merk: Basisonderzoekskit: spiegel, cariëssonde, pincet (Hu-Friedy® Manufacturing Inc., Chicago, IL, VS), handmatige parodontale sonde (North Carolina Probe. Hu-Friedy® Manufacturing Inc., Chicago, IL, VS), plaquezoekertabletten (Curaprox © CURADEN AG, Zwitserland) en nummer 40 steriele papieren conussen (Johnson & Johnson, Tokio, Japan). Aangezien er maar één onderzoeker was (KL ) die bij het onderzoek betrokken waren, werd een intra-examinator-betrouwbaarheidsbeoordeling uitgevoerd. Deze examinator (intra-class correlatiecoëfficiënt van 0,96 en 0,95 voor PPD en CAL) legde alle vastgestelde variabelen vast in een speciaal voor de studie ontworpen klinisch dossier. Microbiologische bemonstering en NSPT werden uitgevoerd door een enkele clinicus (PO). Het volledige PCR-proces werd uitgevoerd door een biochemicus die deel uitmaakte van het microbiologisch laboratorium, campus Santiago van de UNAB.

Parodontopathogenen: De aanwezigheid van parodontopathogenen werd overwogen bij het blootstellen van de agarosegel van de elektroforese aan ultraviolet licht, een band op de plaats van de 197 basenparen (bp) werd waargenomen in de baan met het subgingivale bioflora-monster van de patiënt van Pg, 316 basenparen voor Td, 745 voor Tf en 167 voor Fn.

Gegevensverzameling en instrument: Voorafgaand aan de gegevensverzameling werd alle proefpersonen die bij het onderzoek betrokken waren, gevraagd om een ​​panoramische röntgenfoto voor diagnostische doeleinden. Vervolgens werd het parodontaal onderzoek uitgevoerd waarbij de hierboven beschreven klinische variabelen werden geregistreerd in een klinisch dossier.

Verkrijgen van microbiologische monsters: Het microbiologische onderzoek werd uitgevoerd vóór NSPT bij beide groepen. De verzameling van microbiologische monsters was gebaseerd op een protocol dat wordt gebruikt aan de Universiteit van Chili. Met behulp van steriele papieren kegels nummer 40 werd een monster van subgingivale bioflora genomen van de plaats met de hoogste CAL, binnen die met PD ≥ 5 mm, en er werd een instructie voor mondhygiëne gegeven. Voordat de subgingivale bioflora werd verzameld, werd het gebied schoongemaakt met een steriel gaasje om de supragingivale biofilm te verwijderen. Vervolgens werd met een pincet een papieren kegel genomen en de punt ervan werd gedurende 20 seconden in de sulcus van de studieplaats geplaatst om de absorptie van het creviculaire vocht en de subgingivale bioflora te verzekeren. Elk verkregen biologisch monster werd gesuspendeerd in een Eppendorf-buis met 1 ml gedestilleerd water en vervoerd in een koelkast bij een temperatuur van ongeveer 4°C, binnen een tijdsbestek van maximaal 3 uur, om vervolgens tijdelijk te worden bewaard bij -80°C, tot de overdracht en daaropvolgende extractie van deoxyribonucleïnezuur (DNA) en PCR-techniekverwerking. De tijd tussen bemonstering en DNA-extractie was niet langer dan 48 uur, om aantasting van het biologische materiaal te voorkomen.

Parodontale behandeling: Nadat de voorlopige verzameling van alle variabelen was voltooid, werd een niet-chirurgische parodontale behandeling (NSPT) uitgevoerd, te beginnen met supra- en subgingivale decontaminatie van de volledige mond, met behulp van een elektrische piëzo (DTE®, Guilin Woodpecker Medical Instrument Co. , Ltd., Guilin, Guangxi, Volksrepubliek China), gevolgd door wortelplanning op locaties met PD ≥ 5 mm en CAL ≥ 4 mm, met behulp van Gracey-curettes (Hu-Friedy® Manufacturing Inc., Chicago, Illinois (IL), VS) . Deze therapie werd uitgevoerd bij alle patiënten, zowel in de interventie- als in de controlegroep, volgens het volledige mondbehandelingsprotocol, in 1 of 2 werksessies van 1 tot 2 uur, waarbij de behandeling binnen 24 uur werd bereikt.

Toediening van azithromycine of placebo: Aan het einde van de laatste behandelingssessie werd het antibioticum azithromycine (Azithromycin, Laboratory Chile) of een placebo (Lactose, Galenic Pharmacy) toegediend, afhankelijk van de groep, respectievelijk interventie of controle, waartoe de patiënt behoorde . Voor beide therapieën was het toedieningsregime 1 tablet van 500 mg oraal per dag, gedurende 3 opeenvolgende dagen. Om de dubbelblindheid te behouden, vertoonden de containers die werden gebruikt voor azithromycine en placebo dezelfde kenmerken wat betreft grootte en kleur. Over de azithromycine-tabletten en placebo, deze waren visueel identiek.

Vervolgens werd op de eerste, derde en zesde maand na het einde van de niet-chirurgische behandeling een nieuwe verzameling uitgevoerd van alle klinische variabelen die aan het begin van de studie waren gemeten, terwijl de microbiologische variabelen opnieuw werden gemeten op de derde en zesde maand. maanden na de behandeling, van dezelfde plaats die werd gebruikt bij de eerste bemonstering.

Statistische analyse: De analyse van de gegevens werd uitgevoerd volgens de specifieke doelstellingen van het onderzoek, met behulp van het computerprogramma Statistical Package for the Social Sciences (SPSS). Er is een beschrijvende analyse uitgevoerd waarbij de kwalitatieve variabelen zijn bestudeerd op basis van frequentie, terwijl de kwantitatieve zijn geanalyseerd op basis van het gemiddelde. De verkregen resultaten werden in beide gevallen uitgedrukt in frequentietabellen. Voor elke variabele werd de gegevensnormaliteitstest uitgevoerd volgens de Shapiro-Wilk-test. Daarna werd een inferentiële analyse uitgevoerd voor de kwantitatieve variabelen. Het niveau van statistische significantie werd vastgesteld volgens de Student t- en Chi-Square-test, terwijl voor de kwalitatieve variabelen de niet-parametrische McNemar-test werd uitgevoerd. Er werd rekening gehouden met significante p-waarden <0,05, waarbij werd gestreefd naar een betrouwbaarheidsniveau van 95%.

Ethische implicaties, bioveiligheid en andere Elke patiënt werd gedetailleerd geïnformeerd over alles wat het uitvoeren van het onderzoekswerk met zich meebrengt, volgens het niveau van begrip van elk onderwerp en kreeg een geïnformeerde toestemming, waarin het doel van het onderzoek schriftelijk wordt gespecificeerd samen met de uit te voeren procedures voor zowel de controlegroep als de interventiegroep, naast de kosten en baten van deelname. Het ontwerp, samen met het protocol van de huidige studie, was gebaseerd op de Verklaring van Helsinki en werd goedgekeurd door de Wetenschappelijke Ethische Commissie van de Faculteit der Tandheelkunde, campus Viña del Mar van de UNAB. Aan de andere kant, voor de juiste ontwikkeling van het onderzoek werden relevante klinische onderzoeken uitgevoerd volgens de bioveiligheidsvoorschriften die van kracht waren in die inrichting. Het monster dat uit de subgingivale bioflora van de patiënt wordt genomen, bestaat uit een volkomen onschadelijke, snelle en eenvoudige techniek, die alleen van een parodontale plaats werd verkregen. Nadat het onderzoek was voltooid, werd al het geëxtraheerde materiaal vernietigd, waarbij de eliminatie werd bereikt door middel van de internationale normen voor het hanteren van biologische monsters. Alle deelnemers kregen gratis de nodige elementen voor een goede mondhygiëne en leerden hen de juiste manier om hun mond te ontsmetten. Daarnaast werden zij op de hoogte gebracht van de diagnose, het behandelplan en de behaalde resultaten. Wat betreft de onderzochte patiënten die niet voldeden aan de inclusie- en/of exclusiecriteria van de studie, werden ze voor het vierde jaar doorverwezen naar het vak Klinische Parodontologie, als onderwijsassistent of Postgraduaat Parodontologie aan de UNAB, naargelang het geval, om parodontaal te behandelen. Wat betreft het gebruik van systemische antibiotica als adjuvante behandeling, is aangetoond dat dit klinisch effectiever is dan de parodontale behandeling in combinatie met placebo. Azithromycin daarentegen heeft een werkingsspectrum waarbij aerobe en anaerobe Gram-negatieve bacteriën betrokken zijn, waaronder de parodontopathogenen, het heeft een uitstekende gastro-intestinale absorptie, lange halfwaardetijd en beperkte bijwerkingen. Vanwege zijn eigenschappen zou het in de parodontologie een levensvatbaar alternatief kunnen worden voor het huidige adjuvante antibioticumregime van amoxicilline met metronidazol. komt overeen met een inerte stof die geen farmacologische werking heeft bij de patiënt, en daarom is het meestal het type placebo bij uitstek in studies of klinische studies. Lactose is een disacharide die het resultaat is van de binding van glucose en galactose, en deze placebo's komen overeen met capsules met een kristallijn poeder, wit, geurloos en met een lichtzoete smaak, waarvan de bijwerkingen bij het gebruik niet vaak voorkomen, voornamelijk bij patiënten die te veel hebben ingenomen. hoeveelheden lactose binnenkrijgen en/of er een intolerantie voor hebben, wat symptomen veroorzaakt zoals buikpijn, winderigheid, diarree, opgeblazen gevoel, misselijkheid en braken. Opgemerkt moet worden dat, ondanks de lage prevalentie van bijwerkingen bij zowel lactose als azithromycine, waarschuwde voor de mogelijke effecten, wat aangeeft dat ze bij enig ongemak dat te wijten is aan de consumptie van de tabletten naar de onderzoekers zouden gaan om de toediening ervan te stoppen en uit de studie te worden verwijderd.