Effekten av Azitromycin som ett komplement till icke-kirurgisk parodontitbehandling

Definition av provet: Patienter över 18 år som togs in på den diagnostiska enheten vid den odontologiska fakulteten (DUFD), Viña del Mar campus vid Universidad Nacional Andres Bello (UNAB) under 2016, med en diagnos av svår parodontit, som uppfyller både inklusions- och uteslutningskriterier och samtycker frivilligt till att delta i det aktuella forskningsarbetet och undertecknar ett informerat samtycke. De utvalda deltagarna informerades om forskningens natur, potentiella risker och kompensation för att delta i studien, och fick informerat samtycke från varje patient.

Beräkning av provstorlek: För att beräkna den minsta provstorlek som är nödvändig för sammansättningen av kontroll- och interventionsgrupperna, betraktades variansen av sonderingsdjupsskillnaden som fasta värden, som baserades på resultaten som beskrivits ovan. Med hänsyn till ovanstående och med användning av en nivå med en signifikans på 5 %, en statistisk styrka på 80 % och ett uppskattningsfel på 1 mm, erhölls minst 7 patienter för varje grupp, vilket gav totalt 14 minsta försökspersoner att studera.

Protokoll och klinisk undersökning: Av totalt 32 patienter som valdes ut, tilldelades 20 av dem som uppfyllde inklusionskriterierna slumpmässigt av studiekoordinatorn till en av de två grupperna med hjälp av en slumpmässig genereringssekvens med hjälp av en programvara. Två försökspersoner avböjde att delta i forskningen, så studien hade 9 deltagare i varje grupp. På detta sätt bildades två grupper för att undersöka: en interventionsgrupp som fick NSPT plus 500 mg azitromycin en gång om dagen i tre dagar omedelbart efter NSPT, och en kontrollgrupp som fick NSPT plus placebo under samma förhållanden som interventionsgruppen .

Randomisering: Endast huvudutredaren, som gjorde randomiseringen med hjälp av programmet Epidat 4.0, hade kunskap om innehållet i behållarna och den grupp som varje patient tillhörde i studien, var därför ansvarig för att märka behållarna och uppnå i på så sätt att medarbetare och deltagare i undersökningen inte visste deras innehåll förrän efter att studien var klar.

Standardisering och kalibrering: Data samlades in med hjälp av instrument och tillbehör med samma kommersiella märken, i en enda stol, under samma belysning och av en enda granskare när det gäller kliniska data och en annan granskare för mikrobiologiska variabler.

För standardisering utfördes mätningar under samma förhållanden och med samma typ av instrument, för att minska den associerade bias. Instrumenten som användes för datainsamling var alla desamma i design och märke: Basic Examination Kit: Spegel, kariessond, pincett (Hu-Friedy® Manufacturing Inc., Chicago, IL, USA), manuell tandlossningssond (North Carolina Probe. Hu-Friedy® Manufacturing Inc., Chicago, IL, USA), plackfinnartabletter (Curaprox © CURADEN AG, Schweiz) och nummer 40 sterila papperskoner (Johnson & Johnson, Tokyo, Japan). Eftersom det bara fanns en granskare (KL) ) involverade i studien utfördes en tillförlitlighetsbedömning inom examinatorn. Denna examinator (intra-klasskorrelationskoefficient på 0,96 och 0,95 för PPD och CAL), registrerade alla föreskrivna variabler, i en klinisk fil utformad speciellt för studien. Mikrobiologisk provtagning och NSPT utfördes av en enda kliniker (PO). Den fullständiga PCR-processen utfördes av en biokemist som tillhörde mikrobiologilaboratoriet, Santiago campus vid UNAB.

Parodontopatogener: Närvaron av parodontopatogener övervägdes när agarosgelen från elektroforesen exponerades för ultraviolett ljus, ett band på platsen för de 197 basparen (bp) observerades i banan som innehöll patientens subgingivala biofloraprov av Pg, 316 baspar för Td, 745 för Tf och 167 för Fn.

Datainsamling och instrument: Inför datainsamlingen ombads alla försökspersoner som tillhörde studien en panoramaröntgenbild för diagnostiska ändamål. Därefter genomfördes den parodontala undersökningen med registrering av de ovan beskrivna kliniska variablerna i en journal.

Inhämtning av mikrobiologiska prover: Den mikrobiologiska undersökningen gjordes före NSPT på båda grupperna. Insamlingen av mikrobiologiska prover baserades på ett protokoll som används vid University of Chile. Med hjälp av sterila papperskoner nummer 40 togs ett prov av subgingival bioflora från platsen med högsta CAL, inom de med PD ≥ 5 mm, och en munhygieninstruktion utfördes. Innan insamlingen av subgingival bioflora rengjordes området med en steril gasväv för att eliminera den supragingivala biofilmen. Sedan, med en pincett, togs en papperskon och dess spets placerades i sulcus på studieplatsen i 20 sekunder för att säkerställa absorptionen av spiralvätskan och subgingival bioflora. Varje erhållet biologiskt prov suspenderades i ett Eppendorf-rör med 1 ml destillerat vatten och transporterades i ett kylskåp vid en temperatur på cirka 4°C, inom en tid som inte översteg 3 timmar, för att sedan tillfälligt förvaras vid -80°C, tills dess överföring och efterföljande extraktion av deoxiribonukleinsyra (DNA) och PCR-teknik. Tiden mellan provtagning och DNA-extraktion översteg inte 48 timmar för att undvika försämring av det biologiska materialet.

Parodontal behandling: När den preliminära insamlingen av alla variabler var klar, utfördes icke-kirurgisk periodontal behandling (NSPT), som började med supra och subgingival helmunsdekontaminering med en elektrisk piezo (DTE®, Guilin Woodpecker Medical Instrument Co. , Ltd., Guilin, Guangxi, Folkrepubliken Kina), följt av rotplanering på platser med PD ≥ 5 mm och CAL≥ 4 mm, med Gracey-kyretter (Hu-Friedy® Manufacturing Inc., Chicago, Illinois (IL), USA) . Denna terapi utfördes på alla patienter, både i interventions- och kontrollgruppen, under behandlingsprotokoll för full mun, i 1 eller 2 arbetspass, som varade från 1 till 2 timmar, för att uppnå behandling inom 24 timmar.

Azitromycin eller placeboadministrering: I slutet av den sista behandlingssessionen administrerades antibiotikan azitromycin (Azithromycin, Laboratory Chile) eller placebo (Lactose, Galenic Pharmacy), beroende på vilken grupp, intervention eller kontroll som patienten tillhörde. . För båda behandlingarna var administreringsregimen 1 tablett på 500 mg oralt per dag, under 3 dagar i följd. För att bibehålla dubbelblindheten uppvisade behållarna som användes för azitromycin och placebo samma egenskaper vad gäller storlek och färg. När det gäller azitromycintabletterna och placebo var dessa visuellt identiska.

Därefter, den första, tredje och sjätte månaden efter slutet av den icke-kirurgiska behandlingen, genomfördes en ny samling av alla kliniska variabler som mättes i början av studien, medan de mikrobiologiska variablerna mättes igen vid den tredje och sjätte månader efter behandling, från samma ställe som användes vid den första provtagningen.

Statistisk analys: Analysen av data utfördes i enlighet med de specifika målen för forskningen, med hjälp av datorprogrammet Statistical Package for the Social Sciences (SPSS). En deskriptiv analys gjordes där de kvalitativa variablerna studerades efter frekvens, medan de kvantitativa analyserades genom genomsnittet. Resultaten som erhölls i båda fallen uttrycktes i frekvenstabeller. För varje variabel utfördes datanormalitetstestet enligt Shapiro-Wilk-testet. Därefter genomfördes en inferentiell analys för de kvantitativa variablerna. Nivån på statistisk signifikans fastställdes enligt Student t och Chi-Square test, medan för de kvalitativa variablerna utfördes det icke-parametriska McNemar testet. Signifikanta p-värden <0,05 övervägdes, med målet att presentera en konfidensnivå på 95 %.

Etiska implikationer, biosäkerhet och annat. Varje patient informerades i detalj allt som innebär att utföra forskningsarbetet, i enlighet med graden av förståelse för varje ämne och fick ett informerat samtycke, där syftet med studien specificeras skriftligen tillsammans med de procedurer som ska utföras för båda, kontrollgruppen och interventionsgruppen, utöver kostnaderna och fördelarna med att delta. Designen, tillsammans med protokollet för denna studie, baserades på Helsingforsdeklarationen och godkändes av den vetenskapsetiska kommittén vid Odontologiska fakulteten, Viña del Mar campus vid UNAB. Å andra sidan, för korrekt utveckling av utredningen har relevanta kliniska undersökningar genomförts enligt de biosäkerhetsbestämmelser som gäller vid den anläggningen. Provet som tas från patientens subgingivala bioflora består av en helt ofarlig, snabb och enkel teknik, som endast erhölls från ett parodontalt ställe. När undersökningen var avslutad förstördes allt utvunnet material, vilket uppnåddes med hjälp av internationella standarder för hantering av biologiska prover. Alla deltagare fick gratis de nödvändiga elementen för korrekt munhygien, vilket lärde dem det korrekta sättet att desinficera sin mun. Dessutom fick de kännedom om diagnos, behandlingsplan och erhållna resultat. När det gäller de undersökta patienterna som inte uppfyllde studiens inklusions- och/eller exkluderingskriterier remitterades de till ämnet Klinisk parodontologi för fjärde året, som lärarassistent eller postgraduate of periodontics vid UNAB, beroende på vad som var lämpligt, för att ska behandlas parodontalt. När det gäller användningen av systemiska antibiotika som adjuvant behandling har detta visat sig vara kliniskt mer effektivt än den parodontala behandlingen i samband med placebo. Azitromycin, å andra sidan, har ett verkansspektrum som involverar aeroba och anaeroba gramnegativa bakterier, bland vilka är parodontopatogener, det har en utmärkt gastrointestinal absorption, lång halveringstid och begränsade biverkningar. På grund av dess egenskaper kan det bli ett lönsamt alternativ inom parodontik till den nuvarande adjuvantantibiotikakuren av amoxicillin med metronidazol. När det gäller användningen av placebo (laktos) kännetecknas den av att den är av ren eller inaktiv typ, dvs. motsvarar en inert substans som inte har någon farmakologisk verkan hos patienten, varför det vanligtvis är den typ av placebo man väljer i studier av kliniska prövningar. Laktos är en disackarid som härrör från bindningen av glukos och galaktos, och dessa placebo motsvarar kapslar med ett kristallint pulver, vitt, luktfritt och med en lätt söt smak, vars biverkningar av dess användning förekommer sällan, främst hos patienter som har intagit överdrivet mängder laktos och/eller har intolerans mot det, vilket genererar symtom som buksmärtor, flatulens, diarré, uppblåsthet, illamående och kräkningar. Det bör noteras att, trots den låga förekomsten av biverkningar hos båda, laktos och azitromycin, var patienterna varnade för de möjliga effekterna, vilket tyder på att de inför eventuella obehag som kan tillskrivas konsumtionen av tabletterna skulle gå till forskarna för att stoppa administreringen av dessa och elimineras från studien.