阿奇霉素辅助非手术牙周治疗的疗效

样本定义：2016 年入住安德烈斯贝洛国立大学 (UNAB) 比尼亚德尔马校区牙科学院 (DUFD) 诊断科的 18 岁以上患者，诊断为严重牙周炎，同时满足纳入和排除标准，自愿同意参加本研究工作，签署知情同意书。 被选中的参与者被告知研究的性质、潜在风险和参与研究的补偿，并获得每位患者的知情同意。

样本量计算：为了计算构成对照组和干预组所需的最小样本量，探查深度差异的方差被认为是固定值，这是基于上述结果。考虑到上述情况并使用水平5% 的显着性，80% 的统计功效和 1 mm 的估计误差，每组至少获得 7 名患者，总共至少有 14 名受试者进行研究。

协议和临床检查：在总共 32 名被选中的患者中，研究协调员使用软件随机生成序列将 20 名符合纳入标准的患者随机分配到两组中的一组。 两名受试者拒绝参加研究，因此该研究每组有 9 名参与者。 这样，分成两组进行调查：干预组在NSPT后立即接受NSPT加500mg阿奇霉素，每天一次，持续三天，对照组在与干预组相同的条件下接受NSPT加安慰剂.

随机化：只有使用 Epidat 4.0 程序进行随机化的主要研究者了解容器的内容和研究中每个患者所属的组，因此，负责标记容器，实现这样，调查的合作者和参与者直到研究完成后才知道他们的内容。

标准化和校准：数据是使用相同商业品牌的仪器和用品收集的，在一张椅子上，在相同的照明下，由一名临床数据检查员和另一名微生物变量检查员收集。

对于标准化，测量是在相同的条件下并使用相同类型的仪器进行的，以减少相关的偏差。 用于数据收集的仪器在设计和品牌上均相同：基本检查套件：镜子、龋齿探针、镊子（Hu-Friedy® Manufacturing Inc., Chicago, IL, USA）、手动牙周探针（North Carolina Probe. Hu-Friedy® Manufacturing Inc., Chicago, IL, USA)，斑块查找片 (Curaprox © CURADEN AG, Switzerland) 和 40 号无菌纸锥 (Johnson & Johnson, Tokyo, Japan)。因为只有一名检查员 (KL ) 参与研究，执行内部考官可靠性评估。 该检查员（PPD 和 CAL 的类内相关系数为 0.96 和 0.95）将所有规定的变量记录在专为该研究设计的临床文件中。 微生物取样和 NSPT 由一名临床医生 (PO) 执行。PCR 的完整过程由属于 UNAB 圣地亚哥校区微生物实验室的一名生物化学家执行。

牙周病原体：当将电泳的琼脂糖凝胶暴露于紫外光时，考虑到牙周病原体的存在，在拥有患者龈下生物群落样本 Pg 的泳道中观察到 197 个碱基对 (bp) 位点的条带，316 个碱基对对于 Td，对于 Tf 为 745，对于 Fn 为 167。

数据收集和仪器：在数据收集之前，所有参与研究的受试者都被要求拍摄全景 X 光片以用于诊断目的。 随后，进行牙周检查，将上述临床变量记录在临床记录中。

获得微生物样本：在两组的NSPT之前进行微生物检查。 微生物样本的收集基于智利大学使​​用的协议。 使用 40 号无菌纸锥，从 CAL 最高、PD ≥ 5mm 的部位采集龈下生物菌群样本，并进行口腔卫生指导。 在收集龈下生物菌群之前，用无菌纱布清洁该区域以消除龈上生物膜。 然后，用镊子取出一个纸锥，将其尖端置于研究部位的沟内20秒，以确保沟液和龈下生物群落的吸收。 将获得的每个生物样品悬浮于装有 1 ml 蒸馏水的 Eppendorf 管中，并在不超过 3 小时的时间内在约 4°C 的冰箱中运输，然后在-80°C 下暂存，直到其转移和随后的脱氧核糖核酸 (DNA) 提取和 PCR 技术处理。 取样和 DNA 提取之间的时间不超过 48 小时，以避免生物材料变质。

牙周治疗：完成所有变量的初步收集后，进行非手术牙周治疗 (NSPT)，首先使用电动压电（DTE®，桂林啄木鸟医疗器械有限公司）进行龈上和龈下全口去污。 , Ltd., Guilin, Guilin, People's Republic of China)，随后使用 Gracey 刮匙（Hu-Friedy® Manufacturing Inc., Chicago, Illinois (IL), USA）在 PD ≥ 5mm 和 CAL≥ 4mm 的部位进行根面整平. 干预组和对照组的所有患者均按照全口治疗方案进行了该治疗，分 1 或 2 个工作疗程，持续 1 至 2 小时，在 24 小时内达到治疗效果。

阿奇霉素或安慰剂给药：在最后一次治疗结束时，根据患者所属的组、干预或对照分别给予抗生素阿奇霉素（阿奇霉素，智利实验室）或安慰剂（乳糖，Galenic Pharmacy） . 对于这两种疗法，给药方案是每天口服 1 片 500 mg，连续 3 天。为了保持双盲，用于阿奇霉素和安慰剂的容器在大小和颜色方面具有相同的特征。 关于阿奇霉素片剂和安慰剂，这些在视觉上是相同的。

随后，在非手术治疗结束后的第一个月、第三个月和第六个月，对研究开始时测量的所有临床变量进行了新的收集，同时在第三个月和第六个月再次测量了微生物变量治疗后数月，从第一次取样时使用的同一部位。

统计分析：根据研究的具体目标，使用社会科学统计软件包（SPSS）计算机程序对数据进行分析。 进行了描述性分析，其中定性变量按频率进行研究，而定量变量则通过平均值进行分析。 两种情况下获得的结果都用频率表表示。 对于每个变量，根据 Shapiro-Wilk 检验进行数据正态性检验。 随后，对定量变量进行了推理分析。 根据学生 t 和卡方检验建立统计显着性水平，而对于定性变量，执行非参数 McNemar 检验。 考虑了显着的 p 值 <0.05，旨在提供 95% 的置信水平。

伦理意义、生物安全和其他 根据每个受试者的理解水平，每位患者都被详细告知需要开展研究工作的所有内容，并获得知情同意书，其中以书面形式规定了研究目的以及为对照组和干预组执行的程序，以及参与的成本和收益。 该设计以及本研究的方案基于赫尔辛基宣言，并得到了 UNAB 比尼亚德尔马校区牙科学院科学伦理委员会的批准。另一方面，为了正确发展在调查中，相关的临床检查是按照该机构现行的生物安全条例进行的。 从患者的龈下生物菌群中提取的样本由一种完全无害、快速且简单的技术组成，该技术仅从牙周部位获得。 一旦调查完成，所有提取的材料将被销毁，通过生物样本处理的国际标准实现其消除。 所有参与者都免费获得了适当口腔卫生的必要元素，教他们正确的口腔消毒方法。 此外，他们还了解了诊断、治疗计划和获得的结果。 对于不符合研究纳入和/或排除标准的受检患者，他们被转介到第四年的临床牙周病学科目，作为 UNAB 的助教或牙周病学研究生，视情况而定，以便进行牙周治疗。 关于使用全身性抗生素作为辅助治疗，这在临床上已被证明比与安慰剂相关的牙周治疗更有效。 另一方面，阿奇霉素的作用谱涉及需氧和厌氧的革兰氏阴性菌，其中包括牙周病原体，具有良好的胃肠道吸收，半衰期长，不良反应有限。 由于其特性，它可以成为牙周病学中目前阿莫西林和甲硝唑辅助抗生素方案的可行替代方案。关于安慰剂（乳糖）的使用，它的特点是纯或无活性类型，即，什么对应于对患者没有药理作用的惰性物质，这就是为什么它通常是临床试验研究中选择的安慰剂类型的原因。 乳糖是葡萄糖和半乳糖结合形成的双糖，这些安慰剂对应的胶囊是结晶性粉末，白色，无臭，微甜，其使用副作用很少发生，主要发生在摄入过量的患者大量乳糖和/或对其不耐受，产生腹痛、胀气、腹泻、腹胀、恶心和呕吐等症状。应该注意的是，尽管乳糖和阿奇霉素的不良反应发生率很低，但患者警告了可能的影响，表示面对因食用药片而引起的任何不适，他们会去研究人员那里停止服用这些药片，并从研究中剔除。