Účinnost azithromycinu jako doplněk k nechirurgické parodontální léčbě

Definice vzorku: Pacienti starší 18 let přijatí na diagnostickou jednotku Fakulty zubního lékařství (DUFD), kampus Viña del Mar Universidad Nacional Andres Bello (UNAB) v průběhu roku 2016, s diagnózou těžké parodontitidy, splňující oba kritéria pro zařazení a vyloučení a dobrovolně souhlasí s účastí na této výzkumné práci a podepíší informovaný souhlas. Vybraní účastníci byli informováni o povaze výzkumu, potenciálních rizicích a kompenzaci za účast ve studii, přičemž od každého pacienta získali informovaný souhlas.

Výpočet velikosti vzorku: Pro výpočet minimální velikosti vzorku nutné pro sestavení kontrolní a intervenční skupiny byl rozptyl rozdílu hloubky sondování považován za pevné hodnoty, které vycházely z výše popsaných výsledků. S ohledem na výše uvedené a použití úrovně s významností 5 %, statistickou silou 80 % a chybou odhadu 1 mm, bylo získáno alespoň 7 pacientů pro každou skupinu, což dává celkem 14 minimálních subjektů ke studiu.

Protokol a klinické vyšetření: Z celkového počtu 32 pacientů, kteří byli vybráni, bylo 20 z těch, kteří splnili kritéria pro zařazení, koordinátorem studie náhodně rozděleno do jedné ze dvou skupin pomocí náhodné generovací sekvence s využitím softwaru. Dva subjekty odmítly účast ve výzkumu, takže studie měla 9 účastníků v každé skupině. Tímto způsobem byly vytvořeny dvě skupiny pro zkoumání: intervenční skupina, která dostávala NSPT plus 500 mg azithromycinu jednou denně po dobu tří dnů bezprostředně po NSPT, a kontrolní skupina, která dostávala NSPT plus placebo za stejných podmínek jako intervenční skupina. .

Randomizace: Pouze hlavní výzkumník, který provedl randomizaci pomocí programu Epidat 4.0, měl znalosti o obsahu nádob a skupině, do které každý pacient ve studii patřil, měl tedy na starosti označování nádob, dosahující v tak, že spolupracovníci a účastníci výzkumu neznali jejich obsah až po ukončení studie.

Standardizace a kalibrace: Data byla shromážděna pomocí přístrojů a zásob stejných komerčních značek, v jedné židli, pod stejným osvětlením a jedním vyšetřujícím v případě klinických dat a dalším vyšetřujícím pro mikrobiologické proměnné.

Pro standardizaci byla měření provedena za stejných podmínek a za použití stejného typu přístroje, aby se snížilo související zkreslení. Nástroje použité pro sběr dat byly všechny stejné v designu a značce: Základní vyšetřovací sada: Zrcadlo, sonda proti zubnímu kazu, pinzeta (Hu-Friedy® Manufacturing Inc., Chicago, IL, USA), manuální periodontální sonda (North Carolina Probe. Hu-Friedy® Manufacturing Inc., Chicago, IL, USA), tablety pro vyhledávání plaků (Curaprox © CURADEN AG, Švýcarsko) a sterilní papírové kornouty číslo 40 (Johnson & Johnson, Tokio, Japonsko). Protože byl pouze jeden zkoušející (KL ), kteří byli do studie zapojeni, bylo provedeno hodnocení spolehlivosti vnitro-examinátorem. Tento vyšetřující (vnitrotřídní korelační koeficient 0,96 a 0,95 pro PPD a CAL) zaznamenal všechny stanovené proměnné do klinického souboru určeného speciálně pro tuto studii. Mikrobiologické odběry vzorků a NSPT byly prováděny jediným klinickým lékařem (PO). Kompletní proces PCR provedl biochemik mikrobiologické laboratoře v kampusu Santiago UNAB.

Parodontopatogeny: Přítomnost parodontopatogenů byla zvažována při vystavení agarózového gelu elektroforézy ultrafialovému světlu, pás v místě 197 párů bází (bp) byl pozorován v dráze obsahující vzorek subgingivální bioflóry pacienta Pg, 316 párů bází pro Td, 745 pro Tf a 167 pro Fn.

Sběr dat a přístroj: Před sběrem dat byly všechny subjekty patřící do studie požádány o panoramatický rentgenový snímek pro diagnostické účely. Následně bylo provedeno parodontologické vyšetření registrující klinické proměnné popsané výše v klinickém záznamu.

Získávání mikrobiologických vzorků: Mikrobiologické vyšetření bylo provedeno před NSPT u obou skupin. Sběr mikrobiologických vzorků byl založen na protokolu, který se používá na Chilské univerzitě. Pomocí sterilních papírových kornoutů číslo 40 byl odebrán vzorek subgingivální bioflóry z místa s nejvyšší CAL, v rámci těch s PD ≥ 5 mm, a byla provedena instruktáž ústní hygieny. Před odběrem subgingivální bioflóry byla oblast očištěna sterilní gázou k odstranění supragingiválního biofilmu. Poté byl pinzetou odebrán papírový kužel a jeho špička byla umístěna do žlábku studovaného místa na 20 sekund, aby se zajistila absorpce crevikulární tekutiny a subgingivální bioflóry. Každý získaný biologický vzorek byl suspendován v Eppendorfově zkumavce s 1 ml destilované vody a transportován v chladničce při teplotě přibližně 4 °C po dobu nepřesahující 3 hodiny, aby byl poté dočasně skladován při -80 °C, dokud její přenos a následná extrakce deoxyribonukleové kyseliny (DNA) a zpracování technikou PCR. Doba mezi odběrem vzorků a extrakcí DNA nepřesáhla 48 hodin, aby se zabránilo znehodnocení biologického materiálu.

Parodontální ošetření: Jakmile byl dokončen předběžný sběr všech proměnných, bylo provedeno nechirurgické periodontální ošetření (NSPT), počínaje supra a subgingivální celoústní dekontaminací za použití elektrického piezoelektrického piezoelektrického zdroje (DTE®, Guilin Woodpecker Medical Instrument Co. , Ltd., Guilin, Guangxi, Čínská lidová republika), následované kořenovým plánováním na místech vykazujících PD ≥ 5 mm a CAL ≥ 4 mm pomocí kyret Gracey (Hu-Friedy® Manufacturing Inc., Chicago, Illinois (IL), USA) . Tato terapie byla prováděna u všech pacientů, jak v intervenční, tak kontrolní skupině, podle protokolu léčby plnými ústy, v 1 nebo 2 pracovních sezeních, trvajících 1 až 2 hodiny, s dosažením léčby do 24 hodin.

Podávání azithromycinu nebo placeba: Na konci posledního léčebného sezení bylo podáno antibiotikum azithromycin (Azithromycin, Laboratory Chile) nebo placebo (Laktóza, Galenic Pharmacy) v závislosti na skupině, intervenci nebo kontrole, do které pacient patřil. . U obou terapií byl režim podávání 1 tableta 500 mg orálně denně po 3 po sobě jdoucí dny. Pro zachování dvojitého zaslepení vykazovaly nádobky používané pro azithromycin a placebo stejné vlastnosti, pokud jde o velikost a barvu. Pokud jde o tablety azithromycinu a placebo, byly vizuálně totožné.

Následně, v prvním, třetím a šestém měsíci po ukončení nechirurgické léčby, byl proveden nový sběr všech klinických proměnných měřených na začátku studie, zatímco mikrobiologické proměnné byly měřeny znovu ve 3. a 6. měsíců po ošetření, ze stejného místa použitého při prvním odběru vzorků.

Statistická analýza: Analýza dat byla provedena podle specifických cílů výzkumu pomocí počítačového programu Statistical Package for the Social Sciences (SPSS). Byla provedena deskriptivní analýza, ve které byly kvalitativní proměnné studovány podle frekvence, zatímco kvantitativní byly analyzovány prostřednictvím průměru. Výsledky získané v obou případech byly vyjádřeny ve frekvenčních tabulkách. Pro každou proměnnou byl proveden test normality dat podle Shapiro-Wilkova testu. Poté byla provedena inferenční analýza pro kvantitativní proměnné. Hladina statistické významnosti byla stanovena podle Studentova t a Chí-kvadrát testu, u kvalitativních proměnných byl proveden neparametrický McNemarův test. Byly uvažovány signifikantní p-hodnoty <0,05 s cílem poskytnout úroveň spolehlivosti 95 %.

Etické důsledky, biologická bezpečnost a další Každý pacient byl podrobně informován o všem, co obnáší provádění výzkumné práce, podle úrovně porozumění každého subjektu a dostal informovaný souhlas, ve kterém je písemně specifikován cíl studie spolu s postupy, které mají být provedeny jak pro kontrolní skupinu, tak pro intervenční skupinu, kromě nákladů a přínosů účasti. Návrh spolu s protokolem této studie vycházel z Helsinské deklarace a byl schválen Vědeckou etickou komisí Fakulty zubního lékařství v kampusu Viña del Mar UNAB. Na druhou stranu pro správný vývoj šetření byla provedena příslušná klinická vyšetření v souladu s předpisy biologické bezpečnosti platnými v tomto zařízení. Vzorek odebraný ze subgingivální bioflóry pacientky sestává z naprosto neškodné, rychlé a jednoduché techniky, která byla získána pouze z parodontu. Po ukončení šetření byl veškerý vytěžený materiál zlikvidován, čímž bylo dosaženo jeho eliminace pomocí mezinárodních standardů nakládání s biologickými vzorky. Všichni účastníci dostali zdarma potřebné prvky pro správnou ústní hygienu a naučili je správnému způsobu dezinfekce úst. Kromě toho byli seznámeni s diagnózou, léčebným plánem a získanými výsledky. Pokud jde o vyšetřené pacienty, kteří nesplnili zařazovací a/nebo vylučovací kritéria studie, byli čtvrtým rokem zařazeni do předmětu Klinická parodontologie, případně jako asistent pedagoga nebo postgraduál parodontologie na UNAB, aby k léčbě parodontu. Pokud jde o použití systémových antibiotik jako adjuvantní léčby, ukázalo se, že je klinicky účinnější než parodontální léčba spojená s placebem. Naproti tomu azithromycin má spektrum účinku, které zahrnuje aerobní a anaerobní gramnegativní bakterie, mezi které patří i parodontopatogeny, má vynikající gastrointestinální vstřebávání, dlouhý poločas a omezené nežádoucí účinky. Díky svým vlastnostem by se mohl stát v parodontologii životaschopnou alternativou současného adjuvantního antibiotického režimu amoxicilinu s metronidazolem. Co se týče použití placeba (laktózy), vyznačuje se tím, že je čistého nebo neaktivního typu, tj. odpovídá inertní látce, která nemá u pacienta žádný farmakologický účinek, a proto je ve studiích klinických studií obvykle typem placeba. Laktóza je disacharid vznikající vazbou glukózy a galaktózy a tato placeba odpovídají kapslím s krystalickým práškem, bílé, bez zápachu a s mírně nasládlou chutí, jejichž vedlejší účinky při jeho užívání se vyskytují zřídka, zejména u pacientů, kteří požili nadměrné množství množství laktózy a/nebo trpíte její nesnášenlivostí, což vyvolává příznaky, jako je bolest břicha, plynatost, průjem, nadýmání, nevolnost a zvracení. Je třeba poznamenat, že i přes nízkou prevalenci nežádoucích účinků u laktózy i azithromycinu byli pacienti varovali před možnými účinky a naznačili, že tváří v tvář jakémukoli nepohodlí, které lze přičíst konzumaci tablet, půjdou k výzkumníkům, aby zastavili jejich podávání a byli ze studie vyloučeni.