Skuteczność azytromycyny jako środka wspomagającego niechirurgiczne leczenie periodontologiczne

Definicja próby: Pacjenci w wieku powyżej 18 lat przyjęci do Zakładu Diagnostyki Wydziału Stomatologicznego (DUFD) kampusu Viña del Mar Universidad Nacional Andres Bello (UNAB) w 2016 roku z rozpoznaniem ciężkiego zapalenia przyzębia, spełniający zarówno kryteriów włączenia i wyłączenia oraz dobrowolnie wyrażają zgodę na udział w niniejszej pracy badawczej, podpisując świadomą zgodę. Wybranych uczestników poinformowano o charakterze badania, potencjalnych zagrożeniach i wynagrodzeniu za udział w badaniu, uzyskując świadomą zgodę od każdego pacjenta.

Obliczanie wielkości próby: Aby obliczyć minimalną wielkość próby niezbędną do utworzenia grupy kontrolnej i interwencyjnej, wariancję różnicy głębokości sondowania uznano za wartości stałe, które oparto na wynikach opisanych powyżej. Biorąc pod uwagę powyższe i stosując poziom o istotności 5%, mocy statystycznej 80% i błędzie oszacowania 1 mm, uzyskano co najmniej 7 pacjentów dla każdej grupy, co daje w sumie 14 minimalnych pacjentów do badania.

Protokół i badanie kliniczne: Spośród ogółem 32 wybranych pacjentów, 20 z tych, którzy spełnili kryteria włączenia, zostało losowo przydzielonych przez koordynatora badania do jednej z dwóch grup przy użyciu losowej sekwencji generowania z wykorzystaniem oprogramowania. Dwie osoby odmówiły udziału w badaniu, więc w badaniu wzięło udział 9 uczestników w każdej grupie. W ten sposób utworzono dwie grupy do zbadania: grupę interwencyjną, która otrzymywała NSPT plus 500 mg azytromycyny raz dziennie przez trzy dni bezpośrednio po NSPT, oraz grupę kontrolną, która otrzymywała NSPT plus placebo w takich samych warunkach jak grupa interwencyjna .

Randomizacja: Tylko główny badacz, który dokonał randomizacji za pomocą programu Epidat 4.0, posiadał wiedzę na temat zawartości pojemników i grupy, do której należał każdy pacjent w badaniu, dlatego był odpowiedzialny za oznakowanie pojemników, osiągając w w ten sposób współpracownicy i uczestnicy badania nie znali ich treści aż do zakończenia badania.

Standaryzacja i kalibracja: Dane zostały zebrane przy użyciu instrumentów i materiałów eksploatacyjnych tych samych marek handlowych, na jednym krześle, przy tym samym oświetleniu i przez jednego egzaminatora w przypadku danych klinicznych i innego egzaminatora w przypadku zmiennych mikrobiologicznych.

W celu standaryzacji pomiary przeprowadzono w tych samych warunkach i przy użyciu tego samego typu instrumentu, aby zmniejszyć związane z tym obciążenie. Instrumenty użyte do zbierania danych były takie same pod względem projektu i marki: Podstawowy zestaw do badania: lusterko, sonda do próchnicy, pinceta (Hu-Friedy® Manufacturing Inc., Chicago, IL, USA), ręczna sonda periodontologiczna (North Carolina Probe. Hu-Friedy® Manufacturing Inc., Chicago, IL, USA), tabletki do wykrywania płytki nazębnej (Curaprox © CURADEN AG, Szwajcaria) i sterylne papierowe pałeczki numer 40 (Johnson & Johnson, Tokio, Japonia). Ponieważ był tylko jeden egzaminator (KL ) biorących udział w badaniu, przeprowadzono ocenę wiarygodności egzaminatora. Badacz ten (współczynnik korelacji wewnątrzklasowej 0,96 i 0,95 dla PPD i CAL) zarejestrował wszystkie określone zmienne w dokumentacji klinicznej zaprojektowanej specjalnie na potrzeby badania. Pobieranie próbek mikrobiologicznych i NSPT zostały przeprowadzone przez jednego klinicystę (PO). Cały proces PCR został przeprowadzony przez biochemika należącego do laboratorium mikrobiologicznego kampusu UNAB w Santiago.

Patogeny przyzębia: Podczas ekspozycji żelu agarozowego z elektroforezy na światło ultrafioletowe wzięto pod uwagę obecność patogenów przyzębia, zaobserwowano prążek w miejscu 197 par zasad (bp) w ścieżce zawierającej próbkę bioflory poddziąsłowej pacjenta Pg, 316 par zasad dla Td, 745 dla Tf i 167 dla Fn.

Zbieranie danych i instrument: Przed zebraniem danych wszyscy uczestnicy badania zostali poproszeni o zdjęcie panoramiczne w celach diagnostycznych. Następnie wykonano badanie periodontologiczne rejestrując opisane powyżej zmienne kliniczne w dokumentacji klinicznej.

Pobieranie próbek mikrobiologicznych: Badanie mikrobiologiczne wykonano przed NSPT w obu grupach. Pobieranie próbek mikrobiologicznych opierało się na protokole stosowanym na Uniwersytecie w Chile. Za pomocą sterylnych stożków papierowych nr 40 pobrano próbkę bioflory poddziąsłowej z miejsca o najwyższym CAL, w obrębie tych o PD ≥ 5mm i przeprowadzono instruktaż higieny jamy ustnej. Przed pobraniem bioflory poddziąsłowej obszar ten oczyszczono sterylną gazą w celu wyeliminowania biofilmu naddziąsłowego. Następnie za pomocą pęsety pobierano papierowy stożek, którego czubek umieszczano w bruździe badanego miejsca na 20 sekund, aby zapewnić wchłanianie płynu szczelinowego i bioflory poddziąsłowej. Każdą otrzymaną próbkę biologiczną zawieszono w probówce Eppendorfa z 1 ml wody destylowanej i przetransportowano do lodówki w temperaturze ok. jego przeniesienie, a następnie ekstrakcja kwasu dezoksyrybonukleinowego (DNA) i obróbka techniką PCR. Czas między pobraniem próbki a ekstrakcją DNA nie przekraczał 48 godzin, aby uniknąć pogorszenia jakości materiału biologicznego.

Leczenie przyzębia: Po zakończeniu wstępnego zbierania wszystkich zmiennych przeprowadzono niechirurgiczne leczenie przyzębia (NSPT), rozpoczynając od pełnej dekontaminacji nad- i poddziąsłowej przy użyciu piezoelektrycznego piezoelektryka (DTE®, Guilin Woodpecker Medical Instrument Co. , Ltd., Guilin, Guangxi, Chińska Republika Ludowa), a następnie planowanie korzeni w miejscach wykazujących PD ≥ 5 mm i CAL ≥ 4 mm przy użyciu kiret Gracey (Hu-Friedy® Manufacturing Inc., Chicago, Illinois (IL), USA) . Terapię tę przeprowadzono u wszystkich pacjentów, zarówno w grupie interwencyjnej, jak i kontrolnej, w schemacie leczenia pełnego jamy ustnej, w 1 lub 2 sesjach roboczych, trwających od 1 do 2 godzin, uzyskując leczenie w ciągu 24 godzin.

Podawanie azytromycyny lub placebo: Pod koniec ostatniej sesji leczenia podano antybiotyk azytromycynę (Azithromycin, Laboratory Chile) lub placebo (Lactose, Galenic Pharmacy), w zależności od odpowiednio grupy, interwencji lub kontroli, do której należał pacjent . W przypadku obu terapii schemat podawania obejmował 1 tabletkę 500 mg doustnie dziennie przez 3 kolejne dni. Aby utrzymać podwójnie ślepą próbę, pojemniki stosowane dla azytromycyny i placebo miały te same cechy pod względem wielkości i koloru. Jeśli chodzi o tabletki azytromycyny i placebo, były one wizualnie identyczne.

Następnie w pierwszym, trzecim i szóstym miesiącu po zakończeniu leczenia niechirurgicznego wykonano nowy zbiór wszystkich zmiennych klinicznych mierzonych na początku badania, natomiast zmienne mikrobiologiczne mierzono ponownie w trzecim i szóstym miesiącu miesięcy po zabiegu, z tego samego miejsca, z którego pobrano pierwszą próbkę.

Analiza statystyczna: Analiza danych została przeprowadzona zgodnie z celami szczegółowymi badań, z wykorzystaniem programu komputerowego Pakiet Statystyczny do Nauk Społecznych (SPSS). Przeprowadzono analizę opisową, w której zmienne jakościowe badano według częstości, natomiast ilościowe pod kątem średniej. Wyniki uzyskane w obu przypadkach wyrażono w tablicach częstości. Dla każdej zmiennej przeprowadzono test normalności danych według testu Shapiro-Wilka. Następnie przeprowadzono analizę wnioskowania dla zmiennych ilościowych. Poziom istotności statystycznej ustalono za pomocą testu t Studenta oraz testu Chi-Square, natomiast dla zmiennych jakościowych przeprowadzono nieparametryczny test McNemara. Uwzględniono istotne wartości p <0,05, dążąc do przedstawienia poziomu ufności 95%.

Implikacje etyczne, bioasekuracja i inne Każdy pacjent został szczegółowo poinformowany o wszystkim, co wiąże się z przeprowadzeniem pracy badawczej, zgodnie ze stopniem zrozumienia każdego tematu i otrzymał świadomą zgodę, w której pisemnie określono cel badania wraz z procedury, które należy przeprowadzić zarówno dla grupy kontrolnej, jak i grupy interwencyjnej, oprócz kosztów i korzyści wynikających z uczestnictwa. Projekt wraz z protokołem niniejszego badania powstał w oparciu o Deklarację Helsińską i został zatwierdzony przez Komisję Etyki Naukowej Wydziału Stomatologii kampusu Viña del Mar UNAB. Z drugiej strony dla prawidłowego rozwoju dochodzenia przeprowadzono stosowne badania kliniczne zgodnie z przepisami bezpieczeństwa biologicznego obowiązującymi w tej placówce. Próbka pobrana z bioflory poddziąsłowej pacjenta składa się z całkowicie nieszkodliwej, szybkiej i prostej techniki, którą uzyskano wyłącznie z miejsca przyzębia. Po zakończeniu badań cały wydobyty materiał został zniszczony, osiągając jego eliminację za pomocą międzynarodowych standardów postępowania z próbkami biologicznymi. Wszyscy uczestnicy otrzymali nieodpłatnie niezbędne elementy do prawidłowej higieny jamy ustnej, ucząc ich prawidłowego sposobu dezynfekcji jamy ustnej. Ponadto zostali poinformowani o rozpoznaniu, planie leczenia i uzyskanych wynikach. W odniesieniu do badanych pacjentów, którzy nie spełniali kryteriów włączenia i/lub wyłączenia z badania, zostali oni skierowani na przedmiot Periodontologia kliniczna na czwarty rok odpowiednio jako asystent lub absolwent studiów podyplomowych z periodontologii w UNAB w celu do leczenia periodontologicznego. Jeśli chodzi o stosowanie ogólnoustrojowych antybiotyków jako leczenia uzupełniającego, wykazano, że jest ono klinicznie skuteczniejsze niż leczenie periodontologiczne związane z placebo. Z kolei azytromycyna ma spektrum działania obejmujące tlenowe i beztlenowe bakterie Gram-ujemne, w tym patogeny przyzębia, ma doskonałe wchłanianie w przewodzie pokarmowym, długi okres półtrwania i ograniczone działania niepożądane. Ze względu na swoje właściwości może stać się realną alternatywą w periodontologii dla obecnie stosowanej antybiotykoterapii uzupełniającej amoksycyliny z metronidazolem. Jeśli chodzi o stosowanie placebo (laktozy), charakteryzuje się tym, że jest typu czystego lub nieaktywnego, czyli co odpowiada obojętnej substancji, która nie ma działania farmakologicznego na pacjenta, dlatego jest zwykle rodzajem placebo z wyboru w badaniach klinicznych. Laktoza jest disacharydem powstałym w wyniku wiązania glukozy i galaktozy, a tym placebo odpowiadają kapsułki z krystalicznym proszkiem, białym, bezwonny i o lekko słodkim smaku, którego skutki uboczne przy jej stosowaniu występują rzadko, głównie u pacjentów, którzy spożyli nadmierne ilości ilości laktozy i/lub mają na nią nietolerancję, powodującą objawy, takie jak ból brzucha, wzdęcia, biegunka, wzdęcia, nudności i wymioty. ostrzegł przed możliwymi skutkami, wskazując, że w obliczu jakiegokolwiek dyskomfortu związanego ze spożyciem tabletek zwrócą się do naukowców, aby zaprzestali ich podawania i zostali wyeliminowani z badania.