Identification de nouvelles cibles moléculaires pour les patients atteints de polyarthrite rhumatoïde

L'objectif général est d'étudier les mécanismes de la dissociation entre l'activité inflammatoire et la destruction articulaire chez des patients atteints de polyarthrite rhumatoïde (PR) en rémission mais présentant une progression des érosions osseuses.

L'objectif principal est de détecter les différences entre les patients atteints de RA en rémission clinique, mais présentant une érosion articulaire progressive et les patients en rémission clinique et radiologique complète, en caractérisant les protéines, en particulier la chromogranine A (CHGA), présentes à la fois au niveau articulaire et systémique.

Les objectifs secondaires sont : de caractériser l'infiltrat cellulaire inflammatoire intra-articulaire et les cellules du système immunitaire présentes dans la circulation ; pour caractériser le profil protéique des cellules résidant dans la synoviale, le cartilage et l'os de l'articulation endommagée. On émet l'hypothèse qu'avec cette approche, il est possible de détecter des marqueurs protéiques ou cellulaires capables d'identifier précocement les patients à risque d'évoluer vers l'érosion articulaire et d'identifier des cibles cellulaires et protéiques spécifiques pour le développement de thérapies locales ou systémiques adaptées au contrôle de la PR érosive.

Il s'agit d'une étude observationnelle avec procédure supplémentaire, cour, prospective. 160 patients 80 patients PR (Groupe 1) dont :

• Groupe 1A : au moins 10 patients, maximum 70, ayant une PR en rémission, mais présentant une érosion osseuse progressive devant subir une intervention chirurgicale.
• Groupe 1B : au moins 10 patients maximum 70, avec PR en rémission, sans érosion osseuse Un groupe de 80 témoins,
• Groupe 2 : 10 patients souffrant d'arthrose (OA) devant subir une intervention chirurgicale.
• Groupe 3 :70 sans PR ni OA mais hospitalisé pour toute autre pathologie orthopédique devant subir une intervention chirurgicale.

Étant donné que plusieurs problèmes pratiques (par ex. inadéquation ou faible quantité de matériel biologique) peut survenir, nous envisageons la possibilité de recruter des patients supplémentaires jusqu'à l'obtention d'échantillons complets pour les groupes décrits.

Seront inclus des hommes et des femmes atteints de PR en rémission clinique ou non, des patients arthrosiques et des patients hospitalisés pour toute autre pathologie orthopédique (utilisés comme témoins). Pour les patients atteints de PR, le traitement pharmacologique, les données de laboratoire, l'activité de la PR, l'évaluation des érosions osseuses par radiographie des mains et des pieds seront enregistrés.

Du sang total de patients atteints de PR présentant une érosion osseuse, de patients OA et de témoins sera prélevé ; de patients atteints de PR sans érosion osseuse, du sang total sera prélevé. Des cellules mononucléaires du sang total seront isolées et le plasma sera récolté. Un autre tube sera collecté pour la récupération du sérum afin d'effectuer le dosage de CHGA. Chez les patients atteints de PR et d'OA, le liquide synovial sera collecté avec les cellules mononucléaires présentes dans ce liquide et chez les patients atteints de PR et d'OA candidats au remplacement articulaire total, des fragments de membrane synoviale, de cartilage, d'os et de moelle osseuse seront collectés pendant la chirurgie en tant que déchets. .

Les cellules nucléaires isolées du sang total, du liquide synovial et de la moelle osseuse seront caractérisées à l'aide d'un panel de marqueurs indiqués par le Human Immunology Project.

Des puces à protéines sur des échantillons de plasma provenant de patients atteints de PR, d'OA et de témoins seront réalisées pour identifier un panel de protéines de phase aiguë, de cytokines et de chimiokines présentes à des niveaux systémiques et pour mettre en évidence les analogies et les différences dans le profil protéique systémique.

Le liquide synovial sera utilisé pour identifier les protéines présentes dans le liquide synovial des patients atteints de PR et d'OA. La cible principale identifiée sera quantifiée et utilisée comme marqueurs de la progression de l'érosion, pour développer des thérapies pharmacologiques intra-articulaires et proposer des doses thérapeutiques de médicaments. Le même type d'analyse sera effectué même sur des tissus provenant de patients chirurgicaux (patients PR et OA) pour établir les voies impliquées et les cibles spécifiques des tissus à stimuler, c'est-à-dire avec des facteurs trophiques, pour favoriser l'homéostasie tissulaire après l'arrêt du processus auto-immuns et inflammatoires.

Pour atteindre cet objectif, les profils protéiques caractérisés seront évalués fonctionnellement en utilisant des techniques de Biologie des Systèmes basées sur l'étude des réseaux d'interaction protéine-protéine (PPI) (8). De plus, les profils protéiques seront traités à l'aide de statistiques (Pearson, Spearman) capables d'évaluer la dépendance entre variables et de permettre la construction de réseaux de co-expression protéique (9). Dans les deux cas, IPP et/ou réseaux de co-expression, l'étude de la structure des réseaux permettra d'identifier les hubs, les goulots d'étranglement et les modules (10) typiques des patients PR avec ou sans érosion.

Le sérum sera envoyé à l'IRCCS Ospedale San Raffaele pour la quantification de la chromogranine A. Une partie des cellules obtenues à partir de sang total et de liquide synovial sera envoyée à l'IRCCS Ospedale pédiatrique Bambino Gesù (Rome, Italie) pour une analyse immunologique plus approfondie.