Identifikation af nye molekylære mål for reumatoid arthritispatienter

Det generelle formål er at studere mekanismerne for dissociationen mellem den inflammatoriske aktivitet og leddedestruktionen hos patienter med reumatoid arthritis (RA) i remission, men med en progression af knogleerosionerne.

Det primære formål er at påvise forskelle mellem patienter med AR i klinisk remission, men med progressiv artikulær erosion og patienter i fuldstændig klinisk og radiologisk remission, ved at karakterisere proteinerne, især chromogranin A (CHGA), der er til stede både på artikulære og systemiske niveauer.

De sekundære mål er: at karakterisere det cellulære inflammatoriske intraartikulære infiltrat og cellerne i immunsystemet, der er til stede i kredsløbet; at karakterisere proteinprofilen af ​​cellerne i synovium, brusk og knogler i den beskadigede led. Det er en hypotese, at det med denne tilgang er muligt at detektere protein eller cellulære markører, der er i stand til tidligt at identificere patienter med risiko for at udvikle sig mod artikulær erosion og at identificere specifikke cellulære og proteinmål for udvikling af lokale eller systemiske terapier, der er egnede til kontrol af den erosive RA.

Dette er en observationel med yderligere procedure, domstol, prospektiv undersøgelse. 160 patienter 80 RA-patienter (Gruppe 1), hvoraf:

• Gruppe 1A: mindst 10 patienter, maksimalt 70, med RA i remission, men med progressiv knogleerosion, som skal gennemgå et kirurgisk indgreb.
• Gruppe 1B: mindst 10 patienter maksimalt 70, med RA i remission, uden knogleerosion En gruppe på 80 kontroller,
• Gruppe 2: 10 patienter med slidgigt (OA), som skal gennemgå et kirurgisk indgreb.
• Gruppe 3:70 uden RA og OA, men indlagt for enhver anden ortopædisk patologi, der skal gennemgå et kirurgisk indgreb.

Da flere praktiske spørgsmål (f.eks. uegnethed eller lav mængde af biologisk materiale) kan forekomme, forestiller vi os muligheden for at rekruttere yderligere patienter indtil opnåelse af komplette prøver for de beskrevne grupper.

Mandlige og kvindelige RA-patienter i klinisk remission eller ej, slidgigtpatienter og patienter indlagt på grund af enhver anden ortopædisk patologi (brugt som kontroller) vil blive tilmeldt. For RA-patienterne vil farmakologisk behandling, laboratoriedata, RA-aktivitet, vurdering af knogleerosion med hænder og fødder blive optaget.

Fra RA-patienter med knogleerosion, OA-patienter og kontroller vil der blive indsamlet fuldblod; fra RA-patienter uden knogleerosion vil der blive opsamlet fuldblod. Fra fuldblod vil mononukleære celler blive isoleret, og plasma vil blive høstet. Et yderligere rør vil blive indsamlet til serumudvinding for at udføre CHGA-dosering. Fra både RA- og OA-patienter vil ledvæske blive opsamlet sammen med mononukleære celler til stede i denne væske, og fra både RA- og OA-patienter vil der blive opsamlet fragmenter af synovial membran, brusk, knogle og knoglemarv som affaldsmateriale under operationen. .

Nukleare celler isoleret fra fuldblod, ledvæske og knoglemarv vil blive karakteriseret ved hjælp af et panel af markører angivet af Human Immunology Project.

Proteinarrays på plasmaprøver opnået fra RA, OA-patienter og kontroller vil blive udført for at identificere et panel af akutfaseproteiner, cytokiner og kemokiner til stede på systemiske niveauer og for at fremhæve analogier og forskelle i den systemiske proteinprofil.

Synovialvæsken vil blive brugt til at identificere de proteiner, der er til stede i ledvæsken hos RA- og OA-patienter. Det primære identificerede mål vil blive kvantificeret og brugt som markører for erosionsprogression, til at udvikle intraartikulære farmakologiske terapier og til at foreslå de terapeutiske doser af lægemidler. Den samme type analyse vil blive udført selv på væv opnået fra kirurgiske patienter (RA- og OA-patienter) for at fastslå de involverede veje og de vævsspecifikke mål, der skal stimuleres, dvs. med trofiske faktorer, for at fremme vævshomeostasen efter slukning af autoimmune og inflammatoriske processer.

For at nå dette mål vil de karakteriserede proteinprofiler blive funktionelt evalueret ved hjælp af systembiologiske teknikker baseret på studiet af protein-protein (PPI) interaktionsnetværk (8). Desuden vil proteinprofilerne blive behandlet ved hjælp af statistik (Pearson, Spearman) i stand til at evaluere afhængigheden mellem variabler og til at tillade opbygningen af ​​protein co-ekspressionsnetværk (9). I begge tilfælde, PPI- og/eller co-ekspressionsnetværk, vil undersøgelsen af ​​netværksstrukturen tillade identifikation af hubs, flaskehalse og moduler (10) typiske for RA-patienter med eller uden erosion.

Serum vil blive sendt til IRCCS Ospedale San Raffaele til kvantificering af chromogranin A. En del af celler opnået fra fuldblod og ledvæske vil blive sendt til IRCCS Ospedale pediatrico Bambino Gesù (Rom, Italien) for yderligere immunologisk analyse.