Identificatie van nieuwe moleculaire doelen voor patiënten met reumatoïde artritis

Het algemene doel is het bestuderen van de mechanismen van de dissociatie tussen de inflammatoire activiteit en de vernietiging van de gewrichten bij patiënten met reumatoïde artritis (RA) in remissie maar met progressie van de boterosie.

Het primaire doel is om verschillen op te sporen tussen patiënten met AR in klinische remissie, maar met progressieve articulaire erosie en patiënten in volledige klinische en radiologische remissie, door de eiwitten te karakteriseren, met name de chromogranine A (CHGA), die zowel op articulair als systemisch niveau aanwezig zijn.

De secundaire doelstellingen zijn: karakterisering van het cellulaire inflammatoire intra-articulaire infiltraat en de cellen van het immuunsysteem die aanwezig zijn in de bloedsomloop; om het eiwitprofiel van de cellen in het synovium, kraakbeen en bot van het beschadigde gewricht te karakteriseren. Er wordt verondersteld dat het met deze benadering mogelijk is om eiwit- of cellulaire markers te detecteren die in staat zijn om in een vroeg stadium de patiënten te identificeren die risico lopen op articulaire erosie en om specifieke cellulaire en eiwitdoelen te identificeren voor de ontwikkeling van lokale of systemische therapieën die geschikt zijn voor de controle van articulaire erosie. de eroderende RA.

Dit is een, observationele met aanvullende procedure, rechtbank, prospectieve studie. 160 patiënten 80 RA-patiënten (Groep 1) waarvan:

• Groep 1A: minimaal 10 patiënten, maximaal 70, met RA in remissie, maar met progressieve boterosie die een chirurgische ingreep moeten ondergaan.
• Groep 1B: minimaal 10 patiënten maximaal 70, met RA in remissie, zonder boterosie Een groep van 80 controles,
• Groep 2: 10 patiënten met artrose (OA) die een chirurgische ingreep moeten ondergaan.
• Groep 3:70 zonder RA en artrose, maar opgenomen in het ziekenhuis voor een andere orthopedische pathologie die een chirurgische ingreep moet ondergaan.

Aangezien verschillende praktische problemen (bijv. ongeschiktheid of lage hoeveelheid biologisch materiaal) kan optreden, voorzien we de mogelijkheid om extra patiënten te rekruteren tot het bereiken van complete monsters voor de beschreven groepen.

Mannelijke en vrouwelijke RA-patiënten in klinische remissie of niet, artrosepatiënten en patiënten die in het ziekenhuis zijn opgenomen voor een andere orthopedische pathologie (gebruikt als controles) zullen worden ingeschreven. Voor de RA-patiënten worden farmacologische behandeling, laboratoriumgegevens, RA-activiteit en beoordeling van boterosie met röntgenfoto's van handen en voeten geregistreerd.

Van RA-patiënten met boterosie, artrose-patiënten en controles zal volbloed worden afgenomen; van RA-patiënten zonder botafbraak zal volbloed worden afgenomen. Uit volbloed zullen mononucleaire cellen worden geïsoleerd en plasma worden geoogst. Er wordt nog een buis verzameld voor het ophalen van serum om de CHGA-dosering uit te voeren. Van zowel RA- als OA-patiënten zal synoviaal vocht worden verzameld samen met mononucleaire cellen die in dit vocht aanwezig zijn en van zowel RA- als OA-patiënten die kandidaat zijn voor totale gewrichtsvervanging zullen tijdens de operatie fragmenten van synoviaal membraan, kraakbeen, bot en beenmerg worden verzameld als afvalmateriaal .

De kerncellen geïsoleerd uit volbloed, gewrichtsvloeistof en beenmerg zullen worden gekarakteriseerd met behulp van een panel van markers aangegeven door het Human Immunology Project.

Eiwitarrays op plasmamonsters verkregen van RA, OA-patiënten en controles zullen worden uitgevoerd om een ​​panel van acute fase-eiwitten, cytokines en chemokinen aanwezig op systemische niveaus te identificeren en om analogieën en verschillen in het systemische eiwitprofiel te benadrukken.

Het gewrichtsvocht zal gebruikt worden om de eiwitten te identificeren die aanwezig zijn in het gewrichtsvocht van RA- en OA-patiënten. Het belangrijkste geïdentificeerde doelwit zal worden gekwantificeerd en gebruikt als markers van erosieprogressie, om intra-articulaire farmacologische therapieën te ontwikkelen en om de therapeutische doses van geneesmiddelen voor te stellen. Dezelfde soort analyse zal zelfs worden uitgevoerd op weefsels die zijn verkregen van chirurgische patiënten (RA- en OA-patiënten) om de betrokken paden en de weefselspecifieke doelen die moeten worden gestimuleerd vast te stellen, d.w.z. met trofische factoren, om de weefselhomeostase te bevorderen na het uitschakelen van de auto-immuun- en ontstekingsprocessen.

Om dit doel te bereiken, zullen de gekarakteriseerde eiwitprofielen functioneel geëvalueerd worden door gebruik te maken van systeembiologische technieken gebaseerd op de studie van eiwit-eiwit (PPI) interactienetwerken (8). Bovendien zullen de eiwitprofielen worden verwerkt met behulp van statistieken (Pearson, Spearman) die in staat zijn om de afhankelijkheid tussen variabelen te evalueren en om de opbouw van eiwit-co-expressienetwerken mogelijk te maken (9). In beide gevallen, PPI- en/of co-expressienetwerken, zal de studie van de netwerkstructuur de identificatie mogelijk maken van knooppunten, knelpunten en moduli (10) die kenmerkend zijn voor RA-patiënten met of zonder erosie.

Serum zal naar het IRCCS Ospedale San Raffaele worden gestuurd voor de kwantificering van chromogranine A. Een deel van de cellen verkregen uit volbloed en gewrichtsvloeistof zal naar het IRCCS Ospedale pediatrische Bambino Gesù (Rome, Italië) worden gestuurd voor verdere immunologische analyse.