Caractérisation du fluide créviculaire gingival pendant le traitement orthodontique

Critères d'éligibilité pour le prélèvement du liquide créviculaire gingival Cent patients en bonne santé, non-fumeurs, âgés de 11 à 35 ans qui nécessitent un traitement orthodontique avec extraction de la première prémolaire à la clinique d'orthodontie du College of Dentistry de l'Université de l'Illinois à Chicago (UIC) être compris. Le consentement éclairé sera présenté aux patients et au(x) parent(s) [tuteur(s) légal(aux)] et signé avant la procédure. Le patient sera dépisté pour les critères d'inclusion au moment du consentement. L'assentiment écrit sera également obtenu des matières mineures. Avant le traitement, des radiographies périapicales seront prises sur les deux canines maxillaires pour vérifier la longueur et la morphologie des racines afin que les bras de puissance préfabriqués sur les supports canins soient fermés au centre de résistance des canines. Des appareils orthodontiques fixes (0,018 pouce ; prescription MBT) seront placés dans le sujet avec une fente verticale auxiliaire dans les supports canins maxillaires (Dentsply International, York, NY) pour accueillir les bras électriques préfabriqués. Les sujets seront référés pour extraction des premières prémolaires maxillaires. Un dispositif d'ancrage temporaire sera placé entre la deuxième prémolaire maxillaire et la première molaire maxillaire, à 5 mm de la crête alvéolaire à des fins d'ancrage et de référence. Les dents de l'arcade maxillaire seront nivelées et alignées avant la rétraction canine. Une fois 0,016x0,016 des arcs en acier inoxydable (Dentsply International) sont placés, la rétraction canine sera réalisée à l'aide de ressorts hélicoïdaux de fermeture en nickel-titane calibrés de 70 g (Dentsply International) connectés à partir d'un dispositif d'ancrage temporaire au bras de puissance sur les supports canins qui ont permis l'application de la force plus près du centre de résistance de la dent.

Prélèvement du liquide créviculaire gingival Les patients seront assis dans le fauteuil dentaire en position verticale. Le site sélectionné sera séché à l'air et isolé avec des rouleaux de coton. Sans toucher la gencive marginale, la plaque supragingivale sera enlevée pour éviter la contamination des bandes de papier. Les bandes de papier absorbant seront placées délicatement dans le sulcus et les bandes de papier absorbées seront regroupées et placées dans un tube Eppendorf stérile contenant 200 ul de tampon phosphate salin. L'échantillon collecté sera codé avec des numéros d'identification uniques et conservé à -80 ° C jusqu'à analyse. La clé des pièces d'identité sera conservée dans une armoire verrouillée dans la pièce 237B, Collège de médecine dentaire. Le patient sera informé de ne pas prendre d'AINS mais de paracétamol après le traitement orthodontique. La collecte de GCF sera effectuée avant la pose du support, avant la rétraction canine, 2 semaines après la rétraction canine, 5 semaines après la rétraction canine et 7 semaines après la rétraction canine.

Scannage intra-oral L'occlusion et les mâchoires des patients seront scannées à l'aide d'un scanner numérique intra-oral. Le balayage intra-oral sera effectué à la résolution la plus élevée à chaque point de temps étudié. Les données de numérisation seront exportées au format de fichier binaire de stéréolithographie (.stl) et importées dans un progiciel de traitement sophistiqué (Geomagic® Control 14, Geomagic®, Research Triangle Park, NC, USA). Les minivis et la structure des rugosités palatines serviront de points de référence

Placement de fil et traitement orthodontique Les patients seront collés avec des brackets et 0.016x0.016" fil d'acier inoxydable sera placé et ligaturé sur les supports avec des anneaux en caoutchouc. Le patient devra revenir pour le traitement orthodontique en fonction de l'heure de prélèvement de l'échantillon et une fois par mois après l'étude.

ELISA Les échantillons de GCF seront d'abord homogénéisés pendant 30 s et centrifugés pendant 5 min à 1500 g pour éluer. L'éluat sera ensuite utilisé comme échantillon pour l'estimation ELISA à partir d'échantillons GCF. L'échantillon GCF sera détecté OPG et RANKL. La ration d'OPG et de RANKL sera calculée et déterminera le potentiel de PDL à activer les ostéoclastes.

analyse de microARN L'ARN total sera extrait des échantillons de GCF stockés à l'aide du kit de sérum/plasma miRNeasy (Qiagen, Valencia, CA). La quantité d'ARN total sera déterminée par le spectrophotomètre NanoDrop (Thermoscientific). L'ARN total sera soumis à une RT-PCR quantitative en temps réel à l'aide des tests de RT-PCR microARN Taqman® spécifiques à hsa-miR-21, -29a, b et c. hsa-let-7d, g et i seront utilisés comme contrôle interne. Les échantillons de chaque sujet seront analysés à l'aide d'un système de PCR en temps réel 7900HT (Applied Biosystems).