Характеристика жидкости десневой борозды во время ортодонтического лечения

Критерии приемлемости для сбора жидкости из десневой борозды Сто здоровых некурящих пациентов в возрасте 11–35 лет, которым требуется ортодонтическое лечение с удалением первого премоляра в ортодонтической клинике Стоматологического колледжа Иллинойского университета в Чикаго (UIC). быть включенным. Информированное согласие будет представлено пациентам и родителям (родителям) [законным опекунам] и подписано до процедуры. Пациент будет проверен на критерии включения во время согласия. Письменное согласие также будет получено от несовершеннолетних субъектов. Перед лечением будут сделаны периапикальные рентгенограммы обоих клыков верхней челюсти, чтобы проверить длину и морфологию корня, чтобы предварительно изготовленные силовые рычаги на брекетах для клыков были сомкнуты с центром сопротивления клыков. Несъемные ортодонтические аппараты (0,018 дюйма; предписание MBT) будут размещены в субъекте с дополнительным вертикальным пазом в брекетах для верхних клыков (Dentsply International, York, NY) для размещения сборных силовых рычагов. Субъекты будут направлены на удаление первых премоляров верхней челюсти. Временное фиксирующее устройство будет помещено между вторым премоляром верхней челюсти и первым моляром верхней челюсти на расстоянии 5 мм от альвеолярного гребня для фиксации и контроля. Зубы на верхней челюсти будут выровнены и выровнены до ретракции клыка. Один раз 0,016x0,016 устанавливаются дуги из нержавеющей стали (Dentsply International), ретракция клыка будет достигаться с помощью калиброванных 70-граммовых никель-титановых замыкающих спиральных пружин (Dentsply International), соединенных от временного крепежного устройства с приводным рычагом на брекетах для клыков, что позволило применить силы ближе к центру сопротивления зуба.

Сбор жидкости из десневой борозды Пациенты сидят в стоматологическом кресле в вертикальном положении. Выбранный участок будет высушен на воздухе и изолирован ватными тампонами. Не касаясь маргинальной десны, наддесневой налет будет удален, чтобы избежать загрязнения бумажных полосок. Абсорбирующие бумажные полоски осторожно помещают в борозду, абсорбированные бумажные полоски объединяют и помещают в стерильную пробирку Эппендорфа, содержащую 200 мкл фосфатно-солевого буфера. Собранный образец будет закодирован уникальными идентификационными номерами и будет храниться при температуре -80°C до анализа. Ключ для идентификации будет храниться в запертом шкафу в кабинете № 237B Стоматологического колледжа. Пациент будет проинформирован о том, что после ортодонтического лечения следует принимать не НПВП, а парацетамол. Сбор GCF будет проводиться до установки брекетов, перед ретракцией клыка, через 2 недели после ретракции клыка, через 5 недель после ретракции клыка и через 7 недель после ретракции клыка.

Внутриротовое сканирование Прикус и челюсти пациентов будут сканироваться с помощью внутриротового цифрового сканера. Внутриротовое сканирование будет выполняться с максимальным разрешением в каждый изучаемый момент времени. Данные сканирования будут экспортированы в виде двоичного файла стереолитографии (.stl) и импортированы в сложный пакет программного обеспечения для обработки (Geomagic® Control 14, Geomagic®, Research Triangle Park, Северная Каролина, США). Минивинты и структура небных складок будут использоваться в качестве контрольных точек.

Размещение проволоки и ортодонтическое лечение Проволока из нержавеющей стали будет размещена и перевязана на брекетах с помощью резиновых колец. Пациенту будет назначено повторное посещение для ортодонтического лечения в соответствии со временем сбора образцов и один раз в месяц после исследования.

ELISA Образцы GCF сначала гомогенизируют в течение 30 с и центрифугируют в течение 5 мин при 1500 g для элюирования. Затем элюат будет использован в качестве образца для оценки ELISA из образцов GCF. В образце GCF будут обнаружены OPG и RANKL. Рацион OPG и RANKL будет рассчитан и определит потенциал PDL для активации остеокластов.

Анализ микроРНК Общая РНК будет извлечена из хранящихся образцов GCF с использованием набора miRNeasy для сыворотки/плазмы (Qiagen, Валенсия, Калифорния). Количество общей РНК будет определяться спектрофотометром NanoDrop (Thermoscientific). Суммарная РНК будет подвергнута количественной ОТ-ПЦР в реальном времени с использованием анализов Taqman® microRNA RT-PCR, специфичных для hsa-miR-21, -29a, b и c. hsa-let-7d, g и i будут использоваться в качестве внутреннего контроля. Образцы от каждого субъекта будут проанализированы с использованием системы ПЦР в реальном времени 7900HT (Applied Biosystems).