Évaluation de l'efficacité de la procédure de transplantation de mélanocytes et de kératinocytes dans le traitement du vitiligo

Dans le premier bras de l'étude, une zone normalement pigmentée du patient a été anesthésiée avec de la lidocaïne à 1 % avec de l'épinéphrine. À l'aide d'un couteau chirurgical, l'investigateur a prélevé une petite partie de l'épiderme qui n'est pas affectée par le vitiligo d'une petite zone (2 cm2) sur la cuisse du patient pour obtenir des cellules donneuses. L'épiderme qui a été récolté avec le couteau chirurgical a été lavé trois fois avec une solution de Lactate Ringer, puis dissocié à l'aide de trypsine pour séparer les cellules en une suspension cellulaire unique. La zone receveuse à greffer a été ablatée avec un laser Erbium YAG (yttrium aluminium garnet). La moitié des cellules individuelles dissociées de la zone donneuse (cuisse) a ensuite été transplantée sur la zone atteinte de vitiligo que le participant souhaite greffer (surface de 5 cm2).

L'investigateur a ensuite évalué la réponse au traitement dans les zones transplantées à 1 jour, 1 semaine, 1 mois et 3 mois, et 6 mois à la fois par la photographie et en quantifiant le score VASI (Vitiligo Area Scoring Index).

VASI (Vitiligo Area Scoring Index) est le pourcentage d'implication du vitiligo et est calculé en termes d'unités de main. Une unité manuelle équivaut approximativement à 1 % de la surface corporelle totale.

Dans le deuxième bras de l'étude, l'investigateur a utilisé une procédure peu invasive (greffe par aspiration) pour prélever la peau greffée et la peau du donneur - cette méthode peut séparer l'épiderme du derme sans induire de cicatrice. Une zone normalement pigmentée sur le haut de la cuisse a été anesthésiée avec de la lidocaïne à 1 % avec de l'épinéphrine. À l'aide d'une technique de cloque d'aspiration, l'investigateur a retiré une petite partie de l'épiderme qui n'était pas affectée par le vitiligo d'une petite zone (4 cm2 ou 0,6 pouce cm2) sur la cuisse du patient pour obtenir des cellules donneuses. L'épiderme qui a été récolté a été lavé trois fois avec une solution de Lactate Ringer, puis dissocié à l'aide de trypsine pour séparer les cellules en une suspension cellulaire unique. Les zones réceptrices à greffer ont été utilisées pour prélever de l'épiderme à l'aide d'un dispositif de blister à aspiration. La moitié des cellules individuelles dissociées de la zone donneuse (cuisse) ont ensuite été transplantées sur la zone affectée par le vitiligo que le patient souhaitait greffer (surface de 5 cm2 ou 0,7 pouce2). La peau des cloques d'aspiration des sites receveurs a été simultanément dissociée en une suspension cellulaire unique. Une partie du reste des cellules (du site donneur et du site receveur) a été soumise à un tri en flux pour quantifier les populations de mélanocytes et de kératinocytes et à une analyse moléculaire détaillée (séquençage d'ARN unicellulaire et histologie) pour caractériser les caractéristiques moléculaires de vitiligo chronique. L'investigateur a ensuite évalué la réponse au traitement dans les zones transplantées à 1 jour, 1 semaine, 1 mois et 3 mois, et 6 mois à la fois par la photographie et en quantifiant le score VASI. Ce volet de l'étude est terminé.

Dans le troisième bras de l'étude, l'investigateur utilise une procédure peu invasive (greffe par vésication sans dissociation cellulaire) pour prélever la peau greffée et la peau du donneur - cette méthode peut séparer l'épiderme du derme sans induire de cicatrice. Une zone normalement pigmentée sur le haut de la cuisse sera anesthésiée avec de la lidocaïne à 1 % avec de l'épinéphrine. À l'aide d'un système de prélèvement épidermique qui est une technique de cloques d'aspiration, l'investigateur prélèvera plusieurs petites portions (environ 128 cloques - 1,8 mm de diamètre) de l'épiderme non affecté par le vitiligo d'une petite zone normale (5 cm2) sur la cuisse du patient pour obtenir cellules du donneur et en utilisant un instrument à pression négative régulier pour prélever quatre échantillons pour une étude histopathologique (deux de la zone du vitiligo et deux de la peau normale du donneur). L'épiderme de la zone donneuse (cuisse) sera ensuite transplanté sur la zone atteinte de vitiligo que le patient souhaite greffer. De plus, les quatre portions de peau normale et le site receveur seront envoyés pour l'évaluation histopathologique.

L'investigateur évaluera ensuite la réponse au traitement dans les zones transplantées à 1 jour, 1 semaine, 1 mois et 3 mois et 6 mois par la photographie, en quantifiant le changement de la surface dépigmentée, et le score VASI (Vitiligo Area Scoring Index) . En outre, l'investigateur évaluera les deux échantillons de vitiligo et deux échantillons de peau normale par histopathologie pour déterminer où sont localisées les populations uniques de cellules identifiées dans leur analyse de séquençage d'ARN (obtenues à partir du bras 2). L'investigateur émet l'hypothèse que sa procédure de greffe donnera une repigmentation excellente à bonne, entraînant une réduction moyenne de 60 % de la surface (ET = 30 %) entre le départ et le suivi de 6 mois. Avec un échantillon de 5 patients, cette étude atteindra une puissance de 90 % pour tester cette hypothèse sur la base d'un test t apparié bilatéral à un niveau de signification de p = 0,05. En outre, l'investigateur comparera les résultats des 7 patients prélevés à l'aide de la technique de la lame chirurgicale (procédure déjà terminée et résultats de suivi en attente) avec les résultats de 7 patients prélevés avec les cloques d'aspiration (terminées) et de sept patients de la nouvelle méthode proposée. groupe expérimental (trois terminés à ce jour).