Bewertung der Wirksamkeit des Melanozyten-Keratinozyten-Transplantationsverfahrens bei der Behandlung von Vitiligo

Im ersten Arm der Studie wurde ein normal pigmentierter Bereich des Patienten mit 1 % Lidocain mit Epinephrin anästhesiert. Unter Verwendung eines chirurgischen Messers entfernte der Forscher einen kleinen Teil der Epidermis, die nicht von Vitiligo befallen war, aus einem kleinen Bereich (2 cm2) am Oberschenkel des Patienten, um Spenderzellen zu erhalten. Epidermis, die mit dem chirurgischen Messer geerntet wurde, wurde dreimal mit Ringer-Laktat-Lösung gewaschen und dann unter Verwendung von Trypsin dissoziiert, um die Zellen in eine Einzelzellsuspension zu trennen. Der zu transplantierende Empfängerbereich wurde mit einem Erbium-YAG(Yttrium-Aluminium-Granat)-Laser abgetragen. Die Hälfte der dissoziierten Einzelzellen aus dem Spenderbereich (Oberschenkel) wurde dann auf den von Vitiligo betroffenen Bereich transplantiert, an dem der Teilnehmer an einer Transplantation interessiert ist (5 cm2 Fläche).

Der Prüfarzt bewertete dann das Ansprechen auf die Behandlung in den transplantierten Bereichen nach 1 Tag, 1 Woche, 1 Monat und 3 Monaten und 6 Monaten sowohl durch Fotografieren als auch durch Quantifizieren des VASI-Scores (Vitiligo Area Scoring Index).

VASI (Vitiligo Area Scoring Index) ist der Prozentsatz der Vitiligo-Beteiligung und wird in Form von Handeinheiten berechnet. Eine Handeinheit entspricht etwa 1 % der gesamten Körperoberfläche.

Im zweiten Arm der Studie verwendete der Prüfarzt ein minimalinvasives Verfahren (Saugblasentransplantation), um Proben der transplantierten Haut und der Spenderhaut zu nehmen – diese Methode kann die Epidermis von der Dermis trennen, ohne eine Narbe zu verursachen. Ein normal pigmentierter Bereich am Oberschenkel wurde mit 1% Lidocain mit Epinephrin anästhesiert. Unter Verwendung einer Saugblasentechnik entfernte der Forscher einen kleinen Teil der Epidermis, der nicht von Vitiligo befallen war, aus einem kleinen Bereich (4 cm2 oder 0,6 Zoll cm2) am Oberschenkel des Patienten, um Spenderzellen zu erhalten. Die geerntete Epidermis wurde dreimal mit Ringer-Laktat-Lösung gewaschen und dann unter Verwendung von Trypsin dissoziiert, um die Zellen in eine Einzelzellsuspension zu trennen. Die zu transplantierenden Empfängerbereiche wurden verwendet, um Epidermis unter Verwendung eines Saugblistergeräts zu gewinnen. Die Hälfte der dissoziierten Einzelzellen aus dem Spenderbereich (Oberschenkel) wurde dann auf den von Vitiligo betroffenen Bereich transplantiert, an dem der Patient an einer Transplantation interessiert war (5 cm2 Fläche oder 0,7 Zoll2). Die Saugblasenhaut von den Empfängerstellen wurde gleichzeitig in eine Einzelzellsuspension dissoziiert. Ein Teil der restlichen Zellen (sowohl von der Spender- als auch von der Empfängerstelle) wurde einer Durchflusssortierung unterzogen, um die Melanozyten- und Keratinozytenpopulationen zu quantifizieren, und einer detaillierten molekularen Analyse (Einzelzell-RNA-Sequenzierung und Histologie) unterzogen, um die molekularen Merkmale zu charakterisieren chronische Vitiligo. Der Prüfarzt bewertete dann das Ansprechen auf die Behandlung in den transplantierten Bereichen nach 1 Tag, 1 Woche, 1 Monat und 3 Monaten und 6 Monaten sowohl durch Fotografieren als auch durch Quantifizieren des VASI-Scores. Dieser Teil der Studie ist abgeschlossen.

Im dritten Arm der Studie verwendet der Prüfarzt ein minimal-invasives Verfahren (Saugblasentransplantation ohne Zelldissoziation), um Proben von der transplantierten Haut und der Spenderhaut zu nehmen – diese Methode kann die Epidermis von der Dermis trennen, ohne eine Narbe zu verursachen. Ein normal pigmentierter Bereich am Oberschenkel wird mit 1% Lidocain mit Epinephrin betäubt. Unter Verwendung eines epidermalen Entnahmesystems, bei dem es sich um eine Saugblasentechnik handelt, entfernt der Prüfarzt mehrere kleine Teile (etwa 128 Blasen mit einem Durchmesser von 1,8 mm) der Epidermis, die nicht von Vitiligo befallen sind, aus einem kleinen normalen Bereich (5 cm 2 ) am Oberschenkel des Patienten, um sie zu erhalten Spenderzellen und Verwendung eines normalen Unterdruckinstruments zur Entnahme von vier Proben für die histopathologische Untersuchung (zwei aus dem Vitiligo-Bereich und zwei von der normalen Spenderhaut). Die Epidermis aus dem Spenderbereich (Oberschenkel) wird dann auf den von Vitiligo betroffenen Bereich transplantiert, an dem der Patient transplantieren möchte. Außerdem werden die vier Portionen von der normalen Haut und der Empfängerstelle zur histopathologischen Bewertung gesendet.

Der Prüfarzt bewertet dann das Ansprechen auf die Behandlung in den transplantierten Bereichen nach 1 Tag, 1 Woche, 1 Monat und 3 Monaten sowie 6 Monaten sowohl durch Fotografie, quantifiziert die Veränderung der depigmentierten Oberfläche als auch den VASI-Score (Vitiligo Area Scoring Index). . Außerdem wird der Prüfarzt die beiden Vitiligo-Proben und zwei normale Hautproben durch Histopathologie auswerten, um festzustellen, wo die einzigartigen Populationen von Zellen lokalisiert sind, die in ihrer RNA-Sequenzierungsanalyse identifiziert wurden (erhalten aus Arm 2). Der Prüfarzt geht davon aus, dass sein Transplantationsverfahren zu einer hervorragenden bis guten Repigmentierung führen wird, was zu einer durchschnittlichen Verringerung der Oberfläche um 60 % (SD = 30 %) vom Ausgangswert bis zur 6-monatigen Nachsorge führt. Mit einer Stichprobengröße von 5 Patienten wird diese Studie eine Power von 90 % erreichen, um diese Hypothese basierend auf einem zweiseitigen gepaarten t-Test auf einem Signifikanzniveau von p = 0,05 zu testen. Darüber hinaus vergleicht der Prüfarzt die Ergebnisse von 7 Patienten, die mit der chirurgischen Klingentechnik entnommen wurden (Verfahren bereits abgeschlossen und Folgeergebnisse stehen noch aus), mit den Ergebnissen von 7 Patienten, die mit Saugblasen entnommen wurden (abgeschlossen) und sieben Patienten der neu vorgeschlagenen Versuchsgruppe (bisher drei abgeschlossen).