Étude de la maladie plaquettaire constitutionnelle (EVGPP)

Les plaquettes sont des cellules sanguines en circulation. Ils se lient les uns aux autres et à la paroi du vaisseau endommagé pour éviter une perte de sang excessive.

Les plaquettes peuvent être :

• en nombre insuffisant en cas de thrombocytopénie ;
• ou non fonctionnel en cas de thrombopathie. Les thrombopathies constitutionnelles et les thrombopénies sont des maladies rares. Les thrombopénies constitutionnelles provoquent des hémorragies d'intensité variable et sont parfois le signe de pathologies hématologiques plus graves. Le risque évolutif de certaines thrombopénies constitutionnelles est l'apparition d'une myélofibrose, d'une dysmyélopoïèse ou d'une prolifération maligne. Alors que les enjeux évolutifs de certaines thrombopénies et notamment des thrombopénies syndromiques seront plus susceptibles de toucher d'autres organes (rein, cœur, os, cerveau, ...), d'autres thrombopénies constitutionnelles auront peu de conséquences. Leur diagnostic aura alors pour enjeu majeur de les distinguer des thrombopénies immunologiques et d'éviter le recours à des traitements inadaptés et parfois sévères (corticoïdes, immunoglobulines IV, immunosuppresseurs, splénectomie). Des mutations dans plus de quarante gènes ont été identifiées à ce jour et sont responsables de thrombocytopénies.

Les thrombopathies constitutionnelles sont hétérogènes et peuvent impliquer différents constituants plaquettaires. En bref, lorsque les plaquettes sont stimulées au niveau d'un site de lésion, divers agonistes solubles ou matriciels se lient aux récepteurs plaquettaires pour induire le flux de calcium, la sécrétion et l'agrégation plaquettaire au niveau d'un espace vasculaire pour prévenir la perte de sang. Les thrombopathies constitutionnelles sont principalement à risque d'hémorragie cutanéo-muqueuse spontanée ou induite. Certaines thrombopathies font également partie de schémas syndromiques plus complexes. Au cours des dernières décennies, des progrès considérables ont été réalisés dans la compréhension des thrombopathies, permettant de mieux les identifier. Des précisions ont été apportées sur les dysfonctionnements plaquettaires liés à des anomalies des processus de biogenèse et de sécrétion des granules, et à des défauts de signalisation (notamment déficit en récepteurs de surface). Actuellement, plus d'une trentaine de gènes sont le siège de mutations autosomiques dominantes, récessives ou liées à l'X et peuvent être séquencés.

Une organisation nationale a été mise en place pour le diagnostic moléculaire de ces pathologies. Des échantillons d'ADN de patients répondant à des critères stricts (caractère familial, pathologie chronique, signes associés) sont transmis aux services de biologie moléculaire. Un panel de 80 gènes est ensuite séquencé afin d'identifier les variations génétiques potentiellement responsables de la pathologie. Dans 40% des cas, un diagnostic de certitude sera posé. Pour les 60% restants, l'analyse restera non informative pour plusieurs raisons :

• Soit il s'agit de révéler une variation d'un gène connu mais non encore décrite dans la littérature dont le caractère délétère doit être confirmé ;
• ou aucun gène n'a été identifié et il y aura une indication d'un séquençage plus large impliquant tous les exons du génome. Cette stratégie a déjà permis au site coordinateur d'identifier plusieurs nouveaux gènes particulièrement importants ;
• soit il s'agit d'individus dont le caractère constitutionnel n'a pas été suffisamment documenté, une réorientation diagnostique sera alors nécessaire.

Ce projet consistera à prouver le caractère délétère de nouvelles variations génétiques par des méthodes de biologie cellulaire et moléculaire. Ces variations seront soit celles identifiées sur un gène connu dans le cadre du diagnostic (séquençage d'un panel de gènes) soit celles identifiées par séquençage d'exons sur un gène non encore connu pour être impliqué dans des pathologies plaquettaires constitutionnelles. Le séquençage des exons fait partie intégrante du projet.