Studio della malattia piastrinica costituzionale (EVGPP)

Le piastrine sono cellule del sangue circolanti. Si legano tra loro e alla parete del vaso danneggiato per prevenire un'eccessiva perdita di sangue.

Le piastrine possono essere:

• numero insufficiente in caso di trombocitopenia;
• o non funzionale in caso di trombopatia. Le trombopatie costituzionali e le trombopenie sono malattie rare. Le trombopenie costituzionali provocano emorragie di intensità variabile e talvolta sono segno di patologie ematologiche più gravi. Il rischio evolutivo di alcune trombopenie costituzionali è la comparsa di mielofibrosi, dismielopoiesi o proliferazione maligna. Mentre la posta in gioco evolutiva di alcune trombopenie e in particolare delle trombopenie sindromiche sarà più probabile che colpisca altri organi (rene, cuore, ossa, cervello, ...), altre trombopenie costituzionali avranno poche conseguenze. La loro diagnosi avrà quindi la sfida principale di distinguerle dalle trombopenie immunologiche ed evitare l'uso di trattamenti inappropriati e talvolta gravi (corticosteroidi, immunoglobuline EV, immunosoppressori, splenectomia). Ad oggi sono state identificate mutazioni in più di quaranta geni responsabili della trombocitopenia.

Le trombopatie costituzionali sono eterogenee e possono coinvolgere diversi costituenti piastrinici. In breve, quando le piastrine vengono stimolate in un sito della lesione, vari agonisti solubili o di matrice si legano ai recettori piastrinici per indurre il flusso di calcio, la secrezione e l'aggregazione piastrinica in corrispondenza di un gap vascolare per prevenire la perdita di sangue. Le trombopatie costituzionali sono principalmente a rischio di sanguinamento mucocutaneo spontaneo o indotto. Alcune trombopatie fanno anche parte di schemi sindromici più complessi. Negli ultimi decenni, sono stati compiuti notevoli progressi nella comprensione delle trombopatie, consentendo loro di essere meglio identificate. Sono stati forniti dettagli sulle disfunzioni piastriniche legate ad anomalie nei processi di biogenesi e secrezione dei granuli ea difetti di segnalazione (in particolare carenza di recettori di superficie). Attualmente, più di trenta geni sono sede di mutazioni autosomiche dominanti, recessive o legate all'X e possono essere sequenziati.

È stata istituita un'organizzazione nazionale per la diagnosi molecolare di queste patologie. I campioni di DNA di pazienti che soddisfano criteri rigorosi (natura familiare, patologia cronica, segni associati) vengono inviati ai dipartimenti di biologia molecolare. Viene quindi sequenziato un pannello di 80 geni al fine di identificare le variazioni genetiche potenzialmente responsabili della patologia. Nel 40% dei casi verrà fatta una diagnosi certa. Per il restante 60%, l'analisi rimarrà non informativa per diversi motivi:

• O si tratta di rivelare una variazione in un gene noto ma non ancora descritto in letteratura, la cui natura deleteria deve essere confermata;
• o nessun gene è stato identificato e ci sarà un'indicazione di un sequenziamento più ampio che coinvolge tutti gli esoni nel genoma. Questa strategia ha già consentito al sito coordinatore di identificare diversi nuovi geni di particolare importanza;
• o si tratta di individui per i quali il carattere costituzionale non era sufficientemente documentato, sarà allora necessario un riorientamento diagnostico.

Questo progetto consisterà nel dimostrare la natura deleteria di nuove variazioni genetiche utilizzando metodi di biologia cellulare e molecolare. Queste variazioni saranno o quelle identificate su un gene noto nel contesto della diagnosi (sequenziamento di un pannello di geni) o quelle identificate mediante sequenziamento di esoni su un gene non ancora noto per essere coinvolto in patologie piastriniche costituzionali. Il sequenziamento degli esoni è parte integrante del progetto.