Évaluation du phénotype des éosinophiles chez les patients atteints de MPOC (V-FEO)

Chez environ 30 % des patients atteints de BPCO, il y a une augmentation du nombre d'éosinophiles circulants. Les éosinophiles expriment sur leur membrane plusieurs molécules, également liées à leur physiologie, à savoir le complexe majeur d'histocompatibilité (MHC) de classe II, nécessaire à la présentation de l'antigène ; CCR3, récepteur pour une variété de chimiokines, y compris l'éotaxine (CCL11), l'éotaxine-3 (CCL26), la protéine chimiotactique monocyte (MCP)-3 (CCL7), MCP-4 (CCL13) et RANTES (CCL5); cluster de différenciation (CD)125, qui lie l'IL-5 et stimule la prolifération des éosinophiles ; CD63, un marqueur qui est régulé positivement après la dégranulation des éosinophiles ; et CD294 (CRTH2) qui est le récepteur de la prostaglandine D2 et qui est associé à l'allergie et à l'inflammation . L'hypothèse pour le présent essai est que différents phénotypes cliniques de patients atteints de BPCO pourraient être associés à différents statuts d'activation des éosinophiles, qui peuvent être évalués en analysant par cytométrie en flux l'expression membranaire des molécules mentionnées ci-dessus. En particulier, les chercheurs émettent l'hypothèse que les molécules membranaires peuvent être modulées à différents stades des maladies et peuvent changer après des thérapies médicales et de réadaptation.

Les enquêteurs analyseront le phénotype des éosinophiles à partir d'échantillons sanguins de patients atteints de BPCO, admis à l'hôpital après un épisode d'exacerbation, ou pour des contrôles de routine. De cette manière, l'association entre un modèle particulier de molécules exprimées sur la membrane des éosinophiles et la sévérité de la BPCO sera définie. De plus, pour les patients hospitalisés, le phénotype des éosinophiles également le jour de la sortie sera analysé. De cette manière, l'effet des thérapies sur l'activation des éosinophiles sera évalué. L'état clinique des patients sera évalué par des tests standard tels que le questionnaire respiratoire St George (SGRQ), l'indice BODE, le test d'évaluation de la MPOC (CAT), Six min. Test de marche (6'WT), tests de la fonction pulmonaire (PFT).

Le phénotype des éosinophiles et la production de cytokines in vitro seront analysés par cytométrie en flux multicolore. Pour minimiser l'effet de la manipulation, la coloration des molécules membranaires sera effectuée sur des échantillons de sang total, suivie d'une lyse des érythrocytes. Les molécules suivantes seront analysées : CD45, CD16, CD15, CD63, CCR3, CD125, CD294, Siglec-8. Après stimulation in vitro avec un lipopolysaccharide (LPS) ou CCL11, la production d'interleukine (IL)-4, TGFbeta et IL-2 sera analysée.