Evaluatie van het eosinofiele fenotype bij COPD-patiënten (V-FEO)

Bij ongeveer 30% van de COPD-patiënten is er een verhoogd aantal circulerende eosinofielen. Op hun membraan brengen eosinofielen verschillende moleculen tot expressie, ook gerelateerd aan hun fysiologie, namelijk major histocompatibility complex (MHC) klasse II, nodig voor antigeenpresentatie; CCR3, receptor voor een verscheidenheid aan chemokinen, waaronder eotaxine (CCL11), eotaxine-3 (CCL26), monocyt chemotactict eiwit (MCP)-3 (CCL7), MCP-4 (CCL13) en RANTES (CCL5); cluster van differentiatie (CD)125, dat IL-5 bindt en de proliferatie van eosinofielen stimuleert; CD63, een marker die wordt opgereguleerd na degranulatie van eosinofielen; en CD294 (CRTH2), de prostaglandine D2-receptor, en wordt geassocieerd met allergie en ontsteking. De hypothese voor de huidige proef is dat verschillende klinische fenotypes van COPD-patiënten kunnen worden geassocieerd met verschillende activeringsstatussen van eosinofielen, die kunnen worden geëvalueerd door middel van flowcytometrie de membraanexpressie van de bovengenoemde moleculen te analyseren. In het bijzonder veronderstellen de onderzoekers dat membraanmoleculen kunnen worden gemoduleerd in verschillende stadia van de ziekte, en kunnen veranderen na medische en revalidatietherapieën.

De onderzoekers zullen het fenotype van eosinofielen analyseren uit bloedmonsters van patiënten met COPD, opgenomen in het ziekenhuis na een episode van exacerbatie, of voor routinecontroles. Op deze manier zal de associatie tussen een bepaald patroon van moleculen uitgedrukt op eosinofielenmembraan en de ernst van COPD worden gedefinieerd. Bovendien zal voor gehospitaliseerde patiënten het fenotype van eosinofielen ook op de dag van ontslag worden geanalyseerd. Op deze manier zal het effect van therapieën op de activering van eosinofielen worden beoordeeld. De klinische status van patiënten wordt beoordeeld door middel van standaardtests zoals St George Respiratory Questionnaire (SGRQ), BODE-index, COPD Assessment Test (CAT), zes minuten. Looptest (6'WT), longfunctietesten (PFT).

Het fenotype van eosinofielen en de productie van in vitro cytokines zullen worden geanalyseerd door middel van multicolor flowcytometrie. Om het effect van manipulatie te minimaliseren, zullen membraanmoleculen worden gekleurd op volbloedmonsters, gevolgd door lysis van erytrocyten. De volgende moleculen zullen worden geanalyseerd: CD45, CD16, CD15, CD63, CCR3, CD125, CD294, Siglec-8. Na in vitro stimulatie met lipopolysaccharide (LPS) of CCL11 zal de productie van interleukine (IL)-4, TGFbeta en IL-2 geanalyseerd worden.