Evaluering af eosinofil fænotype hos KOL-patienter (V-FEO)

Hos omkring 30 % af KOL-patienterne er der et øget antal cirkulerende eosinofiler. På deres membran udtrykker eosinofiler adskillige molekyler, også relateret til deres fysiologi, nemlig major histocompatibility complex (MHC) klasse II, der er nødvendige for antigenpræsentation; CCR3, receptor for en række forskellige kemokiner, herunder eotaxin (CCL11), eotaxin-3 (CCL26), monocytkemotaktisk protein (MCP)-3 (CCL7), MCP-4 (CCL13) og RANTES (CCL5); cluster of differentiation (CD)125, som binder IL-5 og stimulerer eosinofilproliferation; CD63, en markør, der opreguleres efter eosinofile degranulering; og CD294 (CRTH2), som er prostaglandin D2-receptoren og er forbundet med allergi og inflammation. Hypotesen for nærværende forsøg er, at forskellige kliniske fænotyper af KOL-patienter kan associeres med forskellige aktiveringsstatusser af eosinofiler, som kan evalueres ved at analysere ved flowcytometri af membranekspressionen af ​​de ovennævnte molekyler. Især antager efterforskerne, at membranmolekyler kan moduleres i forskellige stadier af sygdommene og kan ændre sig efter medicinske og rehabiliterende terapier.

Efterforskerne vil analysere fænotypen af ​​eosinofiler fra blodprøver fra patienter med KOL, indlagt på hospitalet efter en episode med forværring, eller til rutinemæssige kontroller. På denne måde vil sammenhængen mellem et bestemt mønster af molekyler udtrykt på eosinofilers membran og sværhedsgraden af ​​KOL blive defineret. Desuden vil eosinofilers fænotype også på udskrivelsesdagen blive analyseret for indlagte patienter. På denne måde vil effekten af ​​terapier på eosinofilaktivering blive vurderet. Patienternes kliniske status vil blive vurderet ved standardtests såsom St George Respiratory Questionnaire (SGRQ), BODE-indeks, COPD Assessment Test (CAT), Six min. Gangtest (6'WT), lungefunktionstest (PFT).

Eosinofilers fænotype og in vitro cytokinproduktion vil blive analyseret ved flerfarvet flowcytometri. For at minimere effekten af ​​manipulation vil der blive udført farvning af membranmolekyler på fuldblodsprøver efterfulgt af lysering af erytrocytter. Følgende molekyler vil blive analyseret: CD45, CD16, CD15, CD63, CCR3, CD125, CD294, Siglec-8. Efter in vitro-stimulering med lipopolysaccharid (LPS) eller CCL11 vil produktionen af ​​interleukin (IL)-4, TGFbeta og IL-2 blive analyseret.