Evaluering av eosinofil fenotype hos KOLS-pasienter (V-FEO)

Hos omtrent 30 % av KOLS-pasientene er det et økt antall sirkulerende eosinofiler. På deres membran uttrykker eosinofiler flere molekyler, også relatert til deres fysiologi, nemlig major histocompatibility complex (MHC) klasse II, nødvendig for antigenpresentasjon; CCR3, reseptor for en rekke kjemokiner, inkludert eotaxin (CCL11), eotaxin-3 (CCL26), monocytt kjemotaktisk protein (MCP)-3 (CCL7), MCP-4 (CCL13) og RANTES (CCL5); cluster of differentiation (CD)125, som binder IL-5 og stimulerer eosinofilproliferasjon; CD63, en markør som er oppregulert etter degranulering av eosinofiler; og CD294 (CRTH2) som er prostaglandin D2-reseptoren, og er assosiert med allergi og betennelse. Hypotesen for denne studien er at forskjellige kliniske fenotyper av KOLS-pasienter kan være assosiert med forskjellige aktiveringsstatuser av eosinofiler, som kan evalueres ved å analysere ved hjelp av flowcytometri membranuttrykket til de ovenfor nevnte molekylene. Spesielt antar etterforskerne at membranmolekyler kan moduleres i forskjellige stadier av sykdommene, og kan endres etter medisinske og rehabiliterende terapier.

Etterforskerne vil analysere fenotypen av eosinofiler fra blodprøver fra pasienter med KOLS, innlagt på sykehus etter en episode med forverring, eller for rutinemessige kontroller. På denne måten vil assosiasjonen mellom et bestemt mønster av molekyler uttrykt på eosinofilers membran og alvorlighetsgraden av KOLS bli definert. Dessuten, for innlagte pasienter, vil eosinofilers fenotype også på utskrivelsesdagen bli analysert. På denne måten vil effekten av terapier på eosinofilaktivering bli vurdert. Den kliniske statusen til pasientene vil bli vurdert ved standardtester som St George Respiratory Questionnaire (SGRQ), BODE-indeks, COPD Assessment Test (CAT), Six min. Gangtest (6'WT), lungefunksjonstester (PFT).

Eosinofilers fenotype og in vitro cytokinproduksjon vil bli analysert ved flerfarget flowcytometri. For å minimere effekten av manipulasjon vil det bli utført farging av membranmolekyler på helblodsprøver, etterfulgt av lysering av erytrocytter. Følgende molekyler vil bli analysert: CD45, CD16, CD15, CD63, CCR3, CD125, CD294, Siglec-8. Etter in vitro stimulering med lipopolysakkarid (LPS) eller CCL11 vil produksjonen av interleukin (IL)-4, TGFbeta og IL-2 bli analysert.