Évaluation de la génotoxicité des implants dentaires dans les cellules épithéliales gingivales

Les patients sont divisés en deux groupes en fonction du système d'implant dentaire utilisé dans la thérapie. Les implants dentaires Ankylos (Dentsplay Sirona, Charlotte, États-Unis) sont utilisés dans le premier groupe de patients et Dentium SuperLine (Dentium Co., Séoul, Corée) dans le second groupe.

Les implants sont placés conformément aux instructions du fabricant de chaque système d'implant et le traitement a été effectué selon les normes et les indications du patient. Les interventions chirurgicales sur tous les patients sont réalisées par le même opérateur avec la même approche chirurgicale, le même protocole et la même instrumentation.

Les chirurgies sont réalisées sous anesthésie locale et des antibiotiques systémiques ont été administrés selon la procédure standard. Pour assurer l'hygiène bucco-dentaire post-chirurgicale, il est conseillé aux patients de rincer la cavité buccale avec de la chlorhexidine jusqu'au jour du retrait des sutures. Les sutures sont retirées 10 jours après l'implantation. Les implants guérissent en étant immergés pendant 12 semaines en fonction du jugement clinique du chirurgien, des indications données et des besoins et préférences des patients. Après cicatrisation, des gabarits gingivaux sont mis en place.

Prélèvement d'échantillons et dosage du micronoyau dans les cellules épithéliales gingivales Pour réduire les variations individuelles, les patients sont observés longitudinalement et chaque sujet est servi comme son propre témoin. Des échantillons de cellules épithéliales gingivales sont prélevés sur le site de mise en œuvre de chaque participant en utilisant la technique de l'écouvillon à trois moments différents : un écouvillon de contrôle est prélevé juste avant la pose de l'implant dentaire (T0) ; le deuxième écouvillon est prélevé 90 jours après l'implantation, c'est-à-dire immédiatement avant la mise en place de la prothèse gingivale (T1) ; et le troisième écouvillon est prélevé 21 jours après la mise en place de la prothèse gingivale (T2).

Une heure avant le prélèvement, les participants s'abstiennent de consommer de la nourriture et des boissons. Après rinçage de la cavité buccale 3 fois avec de l'eau tiède pour éliminer les cellules exfoliées, un écouvillon T0 est prélevé en brossant doucement la gencive autour de l'endroit indiqué pour la pose de l'implant et plus tard T1 et T2 autour de l'implant avec une cytobrosse (Cytobrush Plus ; GmbH. Dietramszell-Tilleul, Allemagne). Les échantillons sont ensuite appliqués sur des lames de verre de laboratoire codées.

Les cellules appliquées sur des lames microscopiques sont laissées sécher à l'air et fixées dans du méthanol (80 % v/v) à 4°C pendant 20 minutes. La coloration est réalisée avec une solution de Giemsa à 5% pendant 10 minutes. Ensuite, les lames sont rincées avec de l'eau distillée et séchées à l'air. Les lames sont examinées au microscope optique Olympus CX40 (Olympus. Tokyo. Japon) avec un grossissement de 400×, et chaque micronoyau et autres anomalies nucléaires sont également vérifiés sous un grossissement de 1000×. Deux lames répliquées sont préparées pour chaque sujet et 1000 cellules épithéliales par préparation ont été analysées pour chaque temps d'échantillonnage.

Anomalies nucléaires, telles que micronoyau, caryorrhexis (désintégration nucléaire indiquant l'apoptose), caryolyse (dissolution du noyau indiquant principalement la nécrose et l'apoptose), pycnose (rétrécissement nucléaire dû à l'apoptose), chromatine condensée (ADN complexé avec des protéines et apoptose), bourgeons nucléaires (précurseurs de micronoyaux, ou haute densité de complexes de réparation de l'ADN) et les œufs cassés (noyaux qui apparaissent comme des cellules binucléées (indiquant une vitesse réduite de prolifération cellulaire)) sont estimés et qualifiés.