Hammasimplanttien genotoksisuuden arviointi ienepiteelisoluissa

Potilaat jaetaan kahteen ryhmään terapiassa käytetyn hammasimplanttijärjestelmän mukaan. Ensimmäisessä potilasryhmässä käytetään Ankylos-hammasimplantteja (Dentsplay Sirona, Charlotte, USA) ja toisessa ryhmässä Dentium SuperLinea (Dentium Co., Soul, Korea).

Implantit asetetaan kunkin implanttijärjestelmän valmistajan ohjeiden mukaisesti ja hoito suoritettiin potilaan standardien ja indikaatioiden mukaisesti. Kaikkien potilaiden kirurgiset toimenpiteet suorittaa sama operaattori samalla kirurgisella lähestymistavalla, protokollalla ja instrumenteilla.

Leikkaukset tehdään paikallispuudutuksessa ja systeemisiä antibiootteja annettiin standardimenettelyn mukaisesti. Leikkauksen jälkeisen suuhygienian varmistamiseksi potilaita kehotetaan huuhtelemaan suuontelo klooriheksidiinillä ompeleiden poistopäivään asti. Ompeleet poistetaan 10 päivää implantoinnin jälkeen. Implantit paranevat olemalla veden alla 12 viikon ajan kirurgin kliinisen arvion, annettujen indikaatioiden ja potilaiden tarpeiden ja mieltymysten perusteella. Paranemisen jälkeen asetetaan ienmuodostajat.

Näytteenotto ja mikrotumamääritys ienepiteelisoluissa Yksittäisten vaihteluiden vähentämiseksi potilaita tarkkaillaan pitkittäissuunnassa ja jokainen koehenkilö toimii omana kontrollinaan. Näytteitä ienepiteelisoluista kerätään kunkin osallistujan toteutuspaikalta vanupuikkotekniikkaa käyttäen kolmessa eri ajankohdassa: kontrollinäyte otetaan juuri ennen hammasimplanttia (T0); toinen vanupuikko otetaan 90 päivää implantoinnin jälkeen, mikä tarkoittaa juuri ennen ienmuodostajan (T1) asettamista; ja kolmas vanupuikko otetaan 21 päivää ienmuodostajan (T2) asettamisen jälkeen.

Tuntia ennen näytteenottoa osallistujat pidättäytyvät syömästä ruokaa ja juomaa. Sen jälkeen, kun suuontelo on huuhdeltu 3 kertaa haalealla vedellä kuoriutuneiden solujen poistamiseksi, otetaan T0-puikko harjaamalla varovasti ientä implantin sijoitukseen tarkoitetun paikan ympäriltä ja myöhemmin T1 ja T2 implantin ympäriltä sytoharjalla (Cytobrush Plus; GmbH. Dietramszell-Linden, Saksa). Näytteet levitetään tämän jälkeen koodatuille laboratorion lasilevyille.

Mikroskooppisille objektilaseille levitettyjen solujen annetaan kuivua ilmassa ja ne kiinnitetään metanoliin (80 % tilavuus/tilavuus) 4 °C:ssa 20 minuutin ajan. Värjäys suoritetaan 5-prosenttisella Giemsa-liuoksella 10 minuutin ajan. Tämän jälkeen objektilasit huuhdellaan vesitisleellä ja ilmakuivataan. Objektilasit tutkitaan Olympus CX40 -valomikroskoopilla (Olympus. Tokio. Japani) 400-kertaisella suurennuksella, ja jokainen mikroydin ja muut ydinpoikkeamat varmistetaan lisäksi 1000-kertaisella suurennuksella. Kullekin kohteelle valmistetaan kaksi rinnakkaislevyä ja 1 000 epiteelisolua valmistetta kohti analysoitiin jokaista näytteenottoaikaa varten.

Ydinpoikkeamat, kuten mikrotuma, karyorrhexis (ytimen hajoaminen, joka viittaa apoptoosiin), karyolyysi (ytimen hajoaminen, joka viittaa enimmäkseen nekroosiin ja apoptoosiin), pyknoosi (ytimen kutistuminen apoptoosin vuoksi), kondensoitunut kromatiini (DNA, joka on kompleksoitunut apoptoosin kanssa). (mikrotumien esiasteet tai suuri tiheys DNA-korjauskomplekseja) ja rikkoutuneita munasoluja (tumat, jotka näyttävät puristuneilta, kaksitumaisia ​​soluja (osoittaa heikentynyttä soluproliferaationopeutta)) on arvioitu ja hyväksytty.