牙种植体在牙龈上皮细胞中的遗传毒性评估

根据治疗中使用的牙种植体系统，患者被分为两组。 Ankylos 牙种植体（Dentsplay Sirona，夏洛特，美国）用于第一组患者，Dentium SuperLine（Dentium Co.，韩国首尔）用于第二组。

植入物是根据每个植入系统制造商的说明放置的，治疗是根据患者的标准和适应症进行的。 所有患者的外科手术均由同一名操作员使用相同的手术方法、方案和仪器进行。

手术在局部麻醉下进行，并根据标准程序给予全身抗生素。 为确保术后口腔卫生，建议患者在拆线前用洗必泰冲洗口腔。 植入后 10 天拆除缝合线。 根据外科医生的临床判断、给出的适应症以及患者的需要和偏好，将植入物浸入水中 12 周即可愈合。 愈合后，放置牙龈模型。

牙龈上皮细胞的样本采集和微核测定 为了减少个体差异，对患者进行纵向观察，并将每个受试者作为他们自己的对照。 在三个不同的时间点使用拭子技术从每个参与者的实施部位收集牙龈上皮细胞样本：在植入牙种植体之前（T0）采集对照拭子；第二个拭子在植入后 90 天采集，即在放置牙龈成型器之前立即采集 (T1)；第三次拭子取自放置牙龈成型器 (T2) 后 21 天。

采样前一小时，参与者禁食任何食物和饮料。 用温水冲洗口腔 3 次以去除脱落的细胞后，取 T0 拭子，轻轻刷牙种植体周围的牙龈，然后用细胞刷（Cytobrush Plus；GmbH. Dietramszell-Linden，德国）。 随后将样品应用于编码实验室载玻片。

将应用于显微镜载玻片的细胞风干并在 4°C 的甲醇 (80% v/v) 中固定 20 分钟。 用 5% Giemsa 溶液染色 10 分钟。 然后，载玻片用蒸馏水冲洗并风干。 在 Olympus CX40 光学显微镜（Olympus. 东京。 日本）400倍放大，每个微核和其他核异常在1000倍放大下进行补充验证。 为每个受试者准备了两个重复的载玻片，并且在每个采样时间分析了每个准备工作的 1000 个上皮细胞。

核异常，如微核、核破裂（核解体表明细胞凋亡）、核溶解（细胞核溶解主要表明坏死和细胞凋亡）、固缩（由于细胞凋亡导致核收缩）、浓缩染色质（DNA 与蛋白质复合和细胞凋亡）、核芽（微核的前体，或高密度的 DNA 修复复合物）和破损的卵（出现收紧的细胞核，双核细胞（表明细胞增殖速度受损））被估计和鉴定。