치은 상피세포에서 치과용 임플란트의 유전독성 평가

환자는 치료에 사용되는 치과 임플란트 시스템에 따라 두 그룹으로 나뉩니다. Ankylos 치과용 임플란트(Dentsplay Sirona, Charlotte, USA)를 첫 번째 환자군에, Dentium SuperLine(Dentium Co., Seoul, Korea)을 두 번째 환자군에 사용하였다.

각 임플란트 시스템 제조사의 지시에 따라 임플란트를 식립하고 환자의 기준과 적응증에 따라 치료를 진행하였다. 모든 환자에 대한 수술 절차는 동일한 외과적 접근 방식, 프로토콜 및 장비를 사용하여 동일한 작업자에 의해 수행됩니다.

수술은 국소마취 하에 시행되며, 표준 절차에 따라 전신 항생제를 투여하였다. 수술 후 구강 위생을 보장하기 위해 환자는 봉합사를 제거하는 날까지 클로르헥시딘으로 구강을 헹구는 것이 좋습니다. 봉합사는 이식 후 10일 후에 제거됩니다. 임플란트는 외과의사의 임상적 판단, 주어진 적응증, 환자의 필요와 선호도에 따라 12주 동안 침수되어 치유됩니다. 치유 후 치은 포머를 배치합니다.

치은 상피 세포에서 샘플 수집 및 소핵 분석 개인차를 줄이기 위해 환자를 세로로 관찰하고 각 피험자를 자신의 대조군으로 삼았습니다. 잇몸 상피 세포의 샘플은 세 가지 다른 시점에서 면봉 기술을 사용하여 각 참가자의 구현 사이트에서 수집됩니다. 제어 면봉은 치과 임플란트 배치 직전에 채취됩니다(T0). 두 번째 면봉 채취는 이식 후 90일, 치은 형성기(T1) 배치 직전을 의미합니다. 세 번째 면봉은 치은 형성기(T2) 배치 후 21일에 채취합니다.

샘플링 1시간 전에 참가자는 음식과 음료를 섭취하지 않습니다. 박리된 세포를 제거하기 위해 미지근한 물로 구강을 3회 헹구고 T0 면봉을 채취하여 임플란트 식립을 위해 표시된 치은 주위를 부드럽게 닦고 나중에 임플란트 주위의 T1 및 T2를 사이토브러시(Cytobrush Plus; GmbH. Dietramszell-Linden, 독일). 이후 샘플은 코딩된 실험실 유리 슬라이드에 적용됩니다.

현미경 슬라이드에 적용된 세포를 공기 건조시키고 4°C에서 20분 동안 메탄올(80% v/v)에 고정합니다. 염색은 5% Giemsa 용액으로 10분 동안 수행한다. 그런 다음 슬라이드를 아쿠아 증류액으로 헹구고 공기 중에서 건조시킵니다. 슬라이드는 Olympus CX40 광학 현미경(Olympus. 도쿄. 일본)을 400배로 확대하고, 1000배로 확대하여 각 소핵 및 기타 핵이상을 추가로 검증한다. 각 피험자에 대해 2개의 복제 슬라이드를 준비하고 각 샘플링 시간에 대해 준비당 1000개의 상피 세포를 분석했습니다.

소핵, karyorrhexis(세포 사멸을 나타내는 핵 붕괴), 핵 용해(대부분 괴사와 세포 사멸을 나타내는 핵의 용해), pyknosis(세포 사멸로 인한 핵 수축), 응축된 염색질(단백질 및 세포 사멸과 복합된 DNA), 핵 싹과 같은 핵 이상 (소핵 또는 고밀도 DNA 복구 복합체의 전구체) 및 부러진 알(잘록하게 보이는 핵, 이핵 세포(세포 증식의 손상된 속도를 나타냄))이 추정되고 검증됩니다.