Culture CAPA-IVM individuelle ou en groupe de complexes Cumulus-ovocytes
Effet de la culture CAPA-IVM unique ou en groupe de complexes cumulus-ovocytes humains à partir de petits follicules antraux dans une conception d'étude d'ovocytes SIBLING
Aperçu de l'étude
Statut
Intervention / Traitement
Description détaillée
La maturation in vitro des ovocytes (IVM) est un ART à stimulation minimale avec des effets secondaires et des risques hormonaux réduits pour les patientes. Cependant, l'approche n'est pas largement utilisée en raison d'un écart d'efficacité par rapport à l'ART conventionnel.
Les ovocytes récupérés pour les procédures IVM proviennent d'un pool hétérogène avec des caractéristiques cellulaires et moléculaires variables qui indiquent son statut immature. Ainsi, les systèmes in vitro qui permettent et améliorent l'acquisition et la synchronisation de la compétence méiotique (capacité à reprendre la méiose en réponse à un stimulus ovulatoire) et de la compétence développementale (capacité à être fécondé et à soutenir le développement précoce de l'embryon) avant le déclenchement méiotique sont cruciaux pour l'optimisation. des systèmes IVM humains.
Un nouveau système de culture IVM en deux étapes (nommé CAPA-IVM) impliquant une culture de pré-maturation avec un peptide natriurétique de type C (CNP) et une étape de maturation en présence d'Amphiregulin (AREG), deux composés plus physiologiques améliorant la compétence ovocytaire, a introduit dans des études cliniques antérieures. Jusqu'à présent, ces études pilotes se sont avérées augmenter les taux de maturation des ovocytes, des embryons de bonne qualité au jour 3, des blastocystes de bonne qualité et, par conséquent, un rendement embryonnaire plus élevé. Les blastocystes CAPA-IVM ont montré des taux similaires de méthylation et d'expression génique au niveau des gDMR par rapport aux embryons COS ; et l'expression des principaux régulateurs épigénétiques était similaire entre les deux groupes. De plus, une amélioration des taux de grossesse renforce la pertinence clinique de l'utilisation de la stratégie CAPA-IVM.
Afin d'optimiser et d'adapter davantage le système CAPA-IVM dans la clinique IVM, cette étude pilote vise à vérifier la faisabilité de l'application d'une seule stratégie COC CAPA-IVM par rapport au groupe COC culture CAPA-IVM. Une seule culture de COC permettrait d'effectuer une analyse moléculaire non invasive par ovocyte mature, afin d'identifier des gènes de qualité exprimés dans les cellules du cumulus post-IVM (cumulus biomarkers), qui pourraient ensuite être utilisés pour identifier le ou les embryon(s) avec le plus haut potentiel d'implantation.
Type d'étude
Inscription (Réel)
Phase
- N'est pas applicable
Contacts et emplacements
Lieux d'étude
-
-
-
Ho Chi Minh City, Viêt Nam
- My Duc Hospital
-
-
Critères de participation
Critère d'éligibilité
Âges éligibles pour étudier
Accepte les volontaires sains
La description
Critère d'intégration:
- Avoir une morphologie ovarienne polykystique : au moins 25 follicules (2-9 mm) dans tout l'ovaire et/ou un volume ovarien accru (> 10 ml) (il suffit qu'un ovaire corresponde à ces critères)
- Aucune anomalie utérine ou ovarienne majeure
- Avoir au moins 15 follicules le jour de l'OPU
- Les patients consentent à participer à l'étude
Critère d'exclusion:
- Endométriose de haut grade (> grade 2)
- Cas avec un sperme extrêmement pauvre (servir OAT : densité
Plan d'étude
Comment l'étude est-elle conçue ?
Détails de conception
- Objectif principal: Traitement
- Répartition: Non randomisé
- Modèle interventionnel: Affectation parallèle
- Masquage: Aucun (étiquette ouverte)
Armes et Interventions
Groupe de participants / Bras |
Intervention / Traitement |
|---|---|
|
Expérimental: Culture unique
Transférer les COC cultivés individuellement dans un milieu de capacitation aux gouttelettes de lavage individuelles du "plat de lavage" contenant le "milieu de maturation" et les laver soigneusement.
Transférez ensuite les COC un par un dans la « Boîte de culture » avec le « Milieu de maturation ».
|
Les complexes cumulus-ovocytes (COC) seront cultivés dans les conditions standards CAPA-IVM : 24h de capacitation suivie de 30h de maturation.
Le premier groupe sera la culture en bassins (culture de groupe).
Le second groupe sera cultivé individuellement en gouttelettes de 20µl.
|
|
Expérimental: Culture de groupe
Transférer la moitié des COC (5-10 à la fois) de la boîte de culture Capacitation à la "boîte de lavage" contenant le "milieu de maturation (culture de groupe)" en utilisant une micropipette Eppendorf et les laver soigneusement (charger les pointes de pipette avec 5 µl, max .
10µl).
Transférez ensuite les COC dans la "boîte IVM" avec "Maturation Medium (Group Culture)".
|
Les complexes cumulus-ovocytes (COC) seront cultivés dans les conditions standards CAPA-IVM : 24h de capacitation suivie de 30h de maturation.
Le premier groupe sera la culture en bassins (culture de groupe).
Le second groupe sera cultivé individuellement en gouttelettes de 20µl.
|
Que mesure l'étude ?
Principaux critères de jugement
Mesure des résultats |
Description de la mesure |
Délai |
|---|---|---|
|
Nombre d'embryons de bonne qualité
Délai: Au moins 3 jours après l'injection intra-cytoplasmique de spermatozoïdes
|
Nombre d'embryons de bonne qualité au jour 3 obtenus
|
Au moins 3 jours après l'injection intra-cytoplasmique de spermatozoïdes
|
Mesures de résultats secondaires
Mesure des résultats |
Description de la mesure |
Délai |
|---|---|---|
|
Livraison multiple
Délai: A 24 semaines de gestation
|
Naissance de plus d'un bébé au-delà de 24 semaines
|
A 24 semaines de gestation
|
|
Taux de maturité
Délai: Deux jours après le prélèvement des ovocytes
|
Pourcentage d'ovocytes matures par 2 types de culture COC
|
Deux jours après le prélèvement des ovocytes
|
|
Taux de fécondation
Délai: 16-18 heures après l'injection intra-cytoplasmique de spermatozoïdes
|
Pourcentage d'ovocytes fécondés par 2 types de culture COC
|
16-18 heures après l'injection intra-cytoplasmique de spermatozoïdes
|
|
Taux de clivage
Délai: Au moins 3 jours après l'injection intra-cytoplasmique de spermatozoïdes
|
Pourcentage d'embryons au jour 3 par rapport aux ovocytes fécondés par 2 types de culture COC
|
Au moins 3 jours après l'injection intra-cytoplasmique de spermatozoïdes
|
|
Taux d'expansion
Délai: Après au moins 30 heures de culture de maturation
|
Pourcentage de complexes cumulus-ovocytes expansés après culture par 2 types de culture COC
|
Après au moins 30 heures de culture de maturation
|
|
Le rapport d'expression relatif ( R ) des gènes des cellules du cumulus humain
Délai: les cellules cumulus seront collectées après au moins 30 heures de culture de maturation, stockées à -80oC jusqu'à la purification de l'ARN
|
Les cellules de Cumulus seront collectées, synthèse d'ADNc après purification de l'ARNm, PCR de quantification relative pour détecter l'expression des gènes
|
les cellules cumulus seront collectées après au moins 30 heures de culture de maturation, stockées à -80oC jusqu'à la purification de l'ARN
|
|
Grossesse clinique
Délai: 5 semaines après le placement de l'embryon après la fin du premier transfert
|
au moins un sac gestationnel à l'échographie à 7 semaines de gestation avec détection de l'activité des battements cardiaques
|
5 semaines après le placement de l'embryon après la fin du premier transfert
|
|
Taux d'implantation
Délai: 3 semaines après le transfert d'embryon après la fin du premier transfert
|
comme le nombre de sacs gestationnels par nombre d'embryons transférés
|
3 semaines après le transfert d'embryon après la fin du premier transfert
|
|
Grossesse en cours
Délai: A 12 semaines de gestation
|
La grossesse en cours est définie comme une grossesse avec une fréquence cardiaque détectable à 12 semaines de gestation ou au-delà, après la fin du premier transfert
|
A 12 semaines de gestation
|
|
Fausse-couche
Délai: à 24 semaines de gestation après la fin du premier transfert
|
perte de grossesse à < 24 semaines
|
à 24 semaines de gestation après la fin du premier transfert
|
|
Grossesse multiple
Délai: 5 semaines après le placement de l'embryon après la fin du premier transfert
|
Défini comme la présence de plus d'un sac lors de l'échographie de début de grossesse (6-8 semaines de gestation)
|
5 semaines après le placement de l'embryon après la fin du premier transfert
|
|
Test de grossesse positif
Délai: à 2 semaines après le placement de l'embryon après l'achèvement du premier transfert
|
Taux sérique de gonadotrophine chorionique humaine supérieur à 25 mUI/mL
|
à 2 semaines après le placement de l'embryon après l'achèvement du premier transfert
|
|
Naissance vivante
Délai: A 24 semaines de gestation
|
défini comme au moins un nouveau-né après 24 semaines de gestation et présentant tout signe de vie ; les jumeaux étaient comptés comme une seule naissance
|
A 24 semaines de gestation
|
Collaborateurs et enquêteurs
Parrainer
Les enquêteurs
- Chercheur principal: Tuong M Ho, MD, MCE, Hope Research Center
Publications et liens utiles
Publications générales
- Sanchez F, Le AH, Ho VNA, Romero S, Van Ranst H, De Vos M, Gilchrist RB, Ho TM, Vuong LN, Smitz J. Biphasic in vitro maturation (CAPA-IVM) specifically improves the developmental capacity of oocytes from small antral follicles. J Assist Reprod Genet. 2019 Oct;36(10):2135-2144. doi: 10.1007/s10815-019-01551-5. Epub 2019 Aug 9.
- Vuong LN, Le AH, Ho VNA, Pham TD, Sanchez F, Romero S, De Vos M, Ho TM, Gilchrist RB, Smitz J. Live births after oocyte in vitro maturation with a prematuration step in women with polycystic ovary syndrome. J Assist Reprod Genet. 2020 Feb;37(2):347-357. doi: 10.1007/s10815-019-01677-6. Epub 2020 Jan 4.
- Sanchez F, Romero S, De Vos M, Verheyen G, Smitz J. Human cumulus-enclosed germinal vesicle oocytes from early antral follicles reveal heterogeneous cellular and molecular features associated with in vitro maturation capacity. Hum Reprod. 2015 Jun;30(6):1396-409. doi: 10.1093/humrep/dev083. Epub 2015 Apr 22.
- Saenz-de-Juano MD, Ivanova E, Billooye K, Herta AC, Smitz J, Kelsey G, Anckaert E. Genome-wide assessment of DNA methylation in mouse oocytes reveals effects associated with in vitro growth, superovulation, and sexual maturity. Clin Epigenetics. 2019 Dec 19;11(1):197. doi: 10.1186/s13148-019-0794-y. Erratum In: Clin Epigenetics. 2020 Jan 27;12(1):18.
- Sanchez F, Lolicato F, Romero S, De Vos M, Van Ranst H, Verheyen G, Anckaert E, Smitz JEJ. An improved IVM method for cumulus-oocyte complexes from small follicles in polycystic ovary syndrome patients enhances oocyte competence and embryo yield. Hum Reprod. 2017 Oct 1;32(10):2056-2068. doi: 10.1093/humrep/dex262.
Dates d'enregistrement des études
Dates principales de l'étude
Début de l'étude (Réel)
Achèvement primaire (Réel)
Achèvement de l'étude (Réel)
Dates d'inscription aux études
Première soumission
Première soumission répondant aux critères de contrôle qualité
Première publication (Réel)
Mises à jour des dossiers d'étude
Dernière mise à jour publiée (Réel)
Dernière mise à jour soumise répondant aux critères de contrôle qualité
Dernière vérification
Plus d'information
Termes liés à cette étude
Mots clés
Autres numéros d'identification d'étude
- 13/20/DD-BVMD
Plan pour les données individuelles des participants (IPD)
Prévoyez-vous de partager les données individuelles des participants (DPI) ?
Informations sur les médicaments et les dispositifs, documents d'étude
Étudie un produit pharmaceutique réglementé par la FDA américaine
Étudie un produit d'appareil réglementé par la FDA américaine
Ces informations ont été extraites directement du site Web clinicaltrials.gov sans aucune modification. Si vous avez des demandes de modification, de suppression ou de mise à jour des détails de votre étude, veuillez contacter register@clinicaltrials.gov. Dès qu'un changement est mis en œuvre sur clinicaltrials.gov, il sera également mis à jour automatiquement sur notre site Web .