Одиночная и групповая культура CAPA-IVM комплексов кумулюс-ооцит
23 июля 2023 г. обновлено: Mỹ Đức Hospital
Влияние одиночной и групповой культуры CAPA-IVM комплексов кумулюс-ооцит человека из небольших антральных фолликулов в дизайне исследования ооцитов SIBLING
Созревание ооцитов in vitro (IVM) представляет собой ВРТ с минимальной стимуляцией, с меньшими гормональными побочными эффектами и рисками для пациентов.
Однако этот подход не получил широкого распространения из-за разницы в эффективности по сравнению с традиционной АРТ.
В целях дальнейшей оптимизации и адаптации системы CAPA-IVM в клинике IVM это пилотное исследование направлено на проверку возможности применения единой стратегии COC CAPA-IVM по сравнению с групповой культурой COC CAPA-IVM.
Обзор исследования
Статус
Завершенный
Вмешательство/лечение
Подробное описание
Созревание ооцитов in vitro (IVM) представляет собой ВРТ с минимальной стимуляцией, с меньшими гормональными побочными эффектами и рисками для пациентов. Однако этот подход не получил широкого распространения из-за разницы в эффективности по сравнению с традиционной АРТ.
Ооциты, полученные для процедур IVM, происходят из гетерогенного пула с различными клеточными и молекулярными характеристиками, которые указывают на его незрелый статус. Таким образом, системы in vitro, которые позволяют и улучшают приобретение и синхронизацию мейотической компетентности (способность возобновлять мейоз в ответ на овуляторный стимул) и онтогенетическую компетентность (способность к оплодотворению и поддержку раннего развития эмбриона) до запуска мейотического триггера, имеют решающее значение для оптимизации. систем IVM человека.
Новая двухэтапная система культивирования IVM (названная CAPA-IVM), включающая культуру предварительного созревания с натрийуретическим пептидом C-типа (CNP) и стадию созревания в присутствии амфирегулина (AREG), оба более физиологических соединения, улучшающие компетентность ооцитов, имеют были введены в предыдущих клинических исследованиях. До сих пор эти пилотные исследования показали увеличение скорости созревания ооцитов, эмбрионов хорошего качества на 3-й день, бластоцист хорошего качества и, как результат, более высокий выход эмбрионов. Бластоцисты CAPA-IVM показали сходную скорость метилирования и экспрессии генов в gDMR по сравнению с эмбрионами COS; и экспрессия основных эпигенетических регуляторов была одинаковой в обеих группах. Кроме того, улучшение частоты наступления беременности усиливает клиническую значимость использования стратегии CAPA-IVM.
В целях дальнейшей оптимизации и адаптации системы CAPA-IVM в клинике IVM это экспериментальное исследование направлено на проверку возможности применения единой стратегии COC CAPA-IVM по сравнению с групповой культурой COC CAPA-IVM. Одна культура КОК позволила бы выполнить неинвазивный молекулярный анализ созревшего ооцита, чтобы идентифицировать гены качества, экспрессированные в клетках кумулюса после IVM (биомаркеры кумулюса), которые впоследствии можно было бы использовать для идентификации эмбриона(ов). с высоким потенциалом имплантации.
Тип исследования
Интервенционный
Регистрация (Действительный)
15
Фаза
- Непригодный
Контакты и местонахождение
В этом разделе приведены контактные данные лиц, проводящих исследование, и информация о том, где проводится это исследование.
Места учебы
-
-
-
Ho Chi Minh City, Вьетнам
- My Duc Hospital
-
-
Критерии участия
Исследователи ищут людей, которые соответствуют определенному описанию, называемому критериям приемлемости. Некоторыми примерами этих критериев являются общее состояние здоровья человека или предшествующее лечение.
Критерии приемлемости
Возраст, подходящий для обучения
От 18 лет до 37 лет (Взрослый)
Принимает здоровых добровольцев
Да
Описание
Критерии включения:
- Наличие поликистозной морфологии яичников: не менее 25 фолликулов (2-9 мм) во всем яичнике и/или увеличенный объем яичника (>10 мл) (достаточно, чтобы 1 яичник соответствовал этим критериям)
- Нет серьезных аномалий матки или яичников
- Наличие не менее 15 фолликулов в день OPU
- Пациенты дают согласие на участие в исследовании
Критерий исключения:
- Эндометриоз высокой (> степени 2) степени
- Случаи с крайне плохой спермой (подача ОАТ: плотность
Учебный план
В этом разделе представлена подробная информация о плане исследования, в том числе о том, как планируется исследование и что оно измеряет.
Как устроено исследование?
Детали дизайна
- Основная цель: Уход
- Распределение: Нерандомизированный
- Интервенционная модель: Параллельное назначение
- Маскировка: Нет (открытая этикетка)
Оружие и интервенции
Группа участников / Армия |
Вмешательство/лечение |
|---|---|
|
Экспериментальный: Единая культура
Перенесите КОК, культивированные индивидуально в среде капацитации, в отдельные капли промывки из «промывочной посуды», содержащей «среду созревания», и тщательно промойте их.
Затем перенесите КОК один за другим в «Чашку для культивирования» со «Средой для созревания».
|
Комплексы кумулюс-ооцит (КОК) будут культивировать в стандартных условиях CAPA-IVM: 24-часовая капацитация с последующим 30-часовым созреванием.
Первой группой будет культура в бассейнах (групповая культура).
Вторая группа будет культивироваться индивидуально в каплях по 20 мкл.
|
|
Экспериментальный: Групповая культура
С помощью микропипетки Eppendorf перенесите половину КОК (по 5-10 за раз) из чашки для культивирования капацитации в «чашку для промывания», содержащую «среду для созревания (групповая культура)», и тщательно промойте их (загрузите наконечники пипетки 5 мкл, макс. .
10 мкл).
Затем перенесите КОК в «чашку IVM» с «средой созревания (групповая культура)».
|
Комплексы кумулюс-ооцит (КОК) будут культивировать в стандартных условиях CAPA-IVM: 24-часовая капацитация с последующим 30-часовым созреванием.
Первой группой будет культура в бассейнах (групповая культура).
Вторая группа будет культивироваться индивидуально в каплях по 20 мкл.
|
Что измеряет исследование?
Первичные показатели результатов
Мера результата |
Мера Описание |
Временное ограничение |
|---|---|---|
|
Количество эмбрионов хорошего качества
Временное ограничение: По крайней мере, через 3 дня после внутрицитоплазматической инъекции спермы
|
Количество эмбрионов хорошего качества, полученных на 3-й день
|
По крайней мере, через 3 дня после внутрицитоплазматической инъекции спермы
|
Вторичные показатели результатов
Мера результата |
Мера Описание |
Временное ограничение |
|---|---|---|
|
Многократная доставка
Временное ограничение: На 24 неделе беременности
|
Рождение более одного ребенка после 24 недель
|
На 24 неделе беременности
|
|
Скорость созревания
Временное ограничение: Через два дня после забора ооцитов
|
Процент зрелых ооцитов по 2 типам культуры КОК
|
Через два дня после забора ооцитов
|
|
Скорость внесения удобрений
Временное ограничение: Через 16-18 часов после внутрицитоплазматической инъекции сперматозоидов
|
Процент оплодотворенных ооцитов двумя типами культуры КОК
|
Через 16-18 часов после внутрицитоплазматической инъекции сперматозоидов
|
|
Скорость расщепления
Временное ограничение: По крайней мере, через 3 дня после внутрицитоплазматической инъекции спермы
|
Процент эмбрионов 3-го дня над оплодотворенными ооцитами при 2 типах культуры КОК
|
По крайней мере, через 3 дня после внутрицитоплазматической инъекции спермы
|
|
Скорость расширения
Временное ограничение: После не менее 30 часов созревания культуры
|
Процент комплексов кумулюс-ооцит, разросшихся после культивирования двумя типами культуры КОК
|
После не менее 30 часов созревания культуры
|
|
Относительный коэффициент экспрессии ( R ) генов кумулюсных клеток человека
Временное ограничение: кумулюсные клетки будут собираться по крайней мере через 30 часов после созревания культуры и храниться при -80°C до очистки РНК.
|
Будут собраны клетки кумулюса, синтез кДНК после очистки мРНК, относительная количественная ПЦР для обнаружения экспрессии генов
|
кумулюсные клетки будут собираться по крайней мере через 30 часов после созревания культуры и храниться при -80°C до очистки РНК.
|
|
Клиническая беременность
Временное ограничение: 5 недель после размещения эмбриона после завершения первого переноса
|
не менее одного плодного яйца на УЗИ в 7 недель беременности с определением активности сердечных сокращений
|
5 недель после размещения эмбриона после завершения первого переноса
|
|
Скорость имплантации
Временное ограничение: Через 3 недели после переноса эмбриона после завершения первого переноса
|
как количество плодных яиц на количество перенесенных эмбрионов
|
Через 3 недели после переноса эмбриона после завершения первого переноса
|
|
Текущая беременность
Временное ограничение: На 12 неделе беременности
|
Текущая беременность определяется как беременность с обнаруживаемой частотой сердечных сокращений на 12-й неделе беременности или дольше после завершения первого переноса.
|
На 12 неделе беременности
|
|
Выкидыш
Временное ограничение: на 24 неделе беременности после завершения первого переноса
|
невынашивание беременности в сроке < 24 недель
|
на 24 неделе беременности после завершения первого переноса
|
|
Многоплодная беременность
Временное ограничение: 5 недель после размещения эмбриона после завершения первого переноса
|
Определяется как наличие более одного мешка на УЗИ на ранних сроках беременности (6-8 недель гестации).
|
5 недель после размещения эмбриона после завершения первого переноса
|
|
Положительный тест на беременность
Временное ограничение: через 2 недели после размещения эмбриона после завершения первого переноса
|
Уровень хорионического гонадотропина человека в сыворотке выше 25 мМЕ/мл
|
через 2 недели после размещения эмбриона после завершения первого переноса
|
|
Живорождение
Временное ограничение: На 24 неделе беременности
|
определяется как по крайней мере один новорожденный после 24 недель беременности и проявляющий какие-либо признаки жизни; близнецы считались одним рождением
|
На 24 неделе беременности
|
Соавторы и исследователи
Здесь вы найдете людей и организации, участвующие в этом исследовании.
Спонсор
Следователи
- Главный следователь: Tuong M Ho, MD, MCE, Hope Research Center
Публикации и полезные ссылки
Лицо, ответственное за внесение сведений об исследовании, добровольно предоставляет эти публикации. Это может быть что угодно, связанное с исследованием.
Общие публикации
- Sanchez F, Le AH, Ho VNA, Romero S, Van Ranst H, De Vos M, Gilchrist RB, Ho TM, Vuong LN, Smitz J. Biphasic in vitro maturation (CAPA-IVM) specifically improves the developmental capacity of oocytes from small antral follicles. J Assist Reprod Genet. 2019 Oct;36(10):2135-2144. doi: 10.1007/s10815-019-01551-5. Epub 2019 Aug 9.
- Vuong LN, Le AH, Ho VNA, Pham TD, Sanchez F, Romero S, De Vos M, Ho TM, Gilchrist RB, Smitz J. Live births after oocyte in vitro maturation with a prematuration step in women with polycystic ovary syndrome. J Assist Reprod Genet. 2020 Feb;37(2):347-357. doi: 10.1007/s10815-019-01677-6. Epub 2020 Jan 4.
- Sanchez F, Romero S, De Vos M, Verheyen G, Smitz J. Human cumulus-enclosed germinal vesicle oocytes from early antral follicles reveal heterogeneous cellular and molecular features associated with in vitro maturation capacity. Hum Reprod. 2015 Jun;30(6):1396-409. doi: 10.1093/humrep/dev083. Epub 2015 Apr 22.
- Saenz-de-Juano MD, Ivanova E, Billooye K, Herta AC, Smitz J, Kelsey G, Anckaert E. Genome-wide assessment of DNA methylation in mouse oocytes reveals effects associated with in vitro growth, superovulation, and sexual maturity. Clin Epigenetics. 2019 Dec 19;11(1):197. doi: 10.1186/s13148-019-0794-y. Erratum In: Clin Epigenetics. 2020 Jan 27;12(1):18.
- Sanchez F, Lolicato F, Romero S, De Vos M, Van Ranst H, Verheyen G, Anckaert E, Smitz JEJ. An improved IVM method for cumulus-oocyte complexes from small follicles in polycystic ovary syndrome patients enhances oocyte competence and embryo yield. Hum Reprod. 2017 Oct 1;32(10):2056-2068. doi: 10.1093/humrep/dex262.
Даты записи исследования
Эти даты отслеживают ход отправки отчетов об исследованиях и сводных результатов на сайт ClinicalTrials.gov. Записи исследований и сообщаемые результаты проверяются Национальной медицинской библиотекой (NLM), чтобы убедиться, что они соответствуют определенным стандартам контроля качества, прежде чем публиковать их на общедоступном веб-сайте.
Изучение основных дат
Начало исследования (Действительный)
1 октября 2020 г.
Первичное завершение (Действительный)
30 ноября 2020 г.
Завершение исследования (Действительный)
24 октября 2021 г.
Даты регистрации исследования
Первый отправленный
5 сентября 2020 г.
Впервые представлено, что соответствует критериям контроля качества
23 сентября 2020 г.
Первый опубликованный (Действительный)
24 сентября 2020 г.
Обновления учебных записей
Последнее опубликованное обновление (Действительный)
25 июля 2023 г.
Последнее отправленное обновление, отвечающее критериям контроля качества
23 июля 2023 г.
Последняя проверка
1 июля 2023 г.
Дополнительная информация
Термины, связанные с этим исследованием
Ключевые слова
Другие идентификационные номера исследования
- 13/20/DD-BVMD
Планирование данных отдельных участников (IPD)
Планируете делиться данными об отдельных участниках (IPD)?
НЕТ
Информация о лекарствах и устройствах, исследовательские документы
Изучает лекарственный продукт, регулируемый FDA США.
Нет
Изучает продукт устройства, регулируемый Управлением по санитарному надзору за качеством пищевых продуктов и медикаментов США.
Нет
Эта информация была получена непосредственно с веб-сайта clinicaltrials.gov без каких-либо изменений. Если у вас есть запросы на изменение, удаление или обновление сведений об исследовании, обращайтесь по адресу register@clinicaltrials.gov. Как только изменение будет реализовано на clinicaltrials.gov, оно будет автоматически обновлено и на нашем веб-сайте. .