- ICH GCP
- Registro degli studi clinici negli Stati Uniti
- Sperimentazione clinica NCT04562883
Cultura CAPA-IVM singola vs. di gruppo dei complessi cumulo-ovocita
Effetto della coltura CAPA-IVM singola vs. di gruppo dei complessi cumulo-ovociti umani da piccoli follicoli antrali in un disegno di studio sugli ovociti di un fratello gemello
Panoramica dello studio
Stato
Condizioni
Intervento / Trattamento
Descrizione dettagliata
La maturazione in vitro degli ovociti (IVM) è una ART a stimolazione minima con ridotti effetti collaterali ormonali e rischi per i pazienti. Tuttavia, l'approccio non è ampiamente utilizzato a causa di un divario di efficienza rispetto all'ART convenzionale.
Gli ovociti recuperati per le procedure IVM derivano da un pool eterogeneo con caratteristiche cellulari e molecolari variabili che ne indicano lo stato immaturo. Pertanto, i sistemi in vitro che consentono e migliorano l'acquisizione e la sincronizzazione della competenza meiotica (capacità di riprendere la meiosi in risposta a uno stimolo ovulatorio) e della competenza evolutiva (capacità di essere fecondati e supportare lo sviluppo precoce dell'embrione) prima del trigger meiotico sono cruciali per l'ottimizzazione dei sistemi IVM umani.
Un nuovo sistema di coltura IVM in due fasi (denominato CAPA-IVM) che prevede una coltura di pre-maturazione con peptide natriuretico di tipo C (CNP) e una fase di maturazione in presenza di amphiregulin (AREG), entrambi composti più fisiologici che migliorano la competenza degli ovociti, hanno stato introdotto in precedenti studi clinici. Finora questi studi pilota hanno dimostrato di aumentare i tassi di maturazione degli ovociti, embrioni di buona qualità il giorno 3, blastocisti di buona qualità e, di conseguenza, una maggiore resa embrionale. Le blastocisti CAPA-IVM hanno mostrato tassi simili di metilazione ed espressione genica nei gDMR rispetto agli embrioni COS; e l'espressione dei principali regolatori epigenetici era simile tra i due gruppi. Inoltre, un miglioramento dei tassi di gravidanza rafforza la rilevanza clinica dell'uso della strategia CAPA-IVM.
Al fine di ottimizzare e adattare ulteriormente il sistema CAPA-IVM nella clinica IVM, questo studio pilota mira a verificare la fattibilità dell'applicazione di una singola strategia COC CAPA-IVM rispetto alla cultura COC di gruppo CAPA-IVM. Una singola coltura di COC consentirebbe di eseguire un'analisi molecolare non invasiva per ovocita maturo, al fine di identificare i geni di qualità espressi nelle cellule del cumulo post-IVM (biomarcatori del cumulo), che potrebbero essere successivamente utilizzati per identificare l'embrione o gli embrioni. con il più alto potenziale di impianto.
Tipo di studio
Iscrizione (Effettivo)
Fase
- Non applicabile
Contatti e Sedi
Luoghi di studio
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Ho Chi Minh City, Vietnam
- My Duc Hospital
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Criteri di partecipazione
Criteri di ammissibilità
Età idonea allo studio
Accetta volontari sani
Descrizione
Criterio di inclusione:
- Avere la morfologia dell'ovaio policistico: almeno 25 follicoli (2-9 mm) in tutto l'ovaio e/o volume ovarico aumentato (>10 ml) (è sufficiente che 1 ovaio soddisfi questi criteri)
- Non gravi anomalie uterine o ovariche
- Avere almeno 15 follicoli nel giorno dell'OPU
- I pazienti acconsentono a partecipare allo studio
Criteri di esclusione:
- Endometriosi di alto grado (> grado 2).
- Casi con sperma estremamente scarso (servire OAT: densità
Piano di studio
Come è strutturato lo studio?
Dettagli di progettazione
- Scopo principale: Trattamento
- Assegnazione: Non randomizzato
- Modello interventistico: Assegnazione parallela
- Mascheramento: Nessuno (etichetta aperta)
Armi e interventi
Gruppo di partecipanti / Arm |
Intervento / Trattamento |
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Sperimentale: Cultura Unica
Trasferire i COC coltivati individualmente nel mezzo di capacitazione alle singole goccioline di lavaggio dal "piatto di lavaggio" contenente "mezzo di maturazione" e lavarli accuratamente.
Quindi trasferire i COC uno per uno nel "Culture dish" con "Maturation Medium".
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I complessi cumulo-ovociti (COC) saranno coltivati in condizioni standard CAPA-IVM: 24 ore di capacitazione seguite da 30 ore di maturazione.
Il primo gruppo sarà la cultura nei pool (cultura di gruppo).
Il secondo gruppo sarà coltivato individualmente in goccioline da 20 µl.
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Sperimentale: Cultura di gruppo
Trasferire metà dei COC (5-10 alla volta) dal piatto di coltura di capacitazione al "piatto di lavaggio" contenente "terreno di maturazione (coltura di gruppo)" utilizzando una micropipetta Eppendorf e lavarli accuratamente (caricare i puntali delle pipette con 5 µl, max .
10µl).
Quindi trasferire i COC nel "piatto IVM" con "mezzo di maturazione (cultura di gruppo)".
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I complessi cumulo-ovociti (COC) saranno coltivati in condizioni standard CAPA-IVM: 24 ore di capacitazione seguite da 30 ore di maturazione.
Il primo gruppo sarà la cultura nei pool (cultura di gruppo).
Il secondo gruppo sarà coltivato individualmente in goccioline da 20 µl.
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Cosa sta misurando lo studio?
Misure di risultato primarie
Misura del risultato |
Misura Descrizione |
Lasso di tempo |
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Numero di embrioni di buona qualità
Lasso di tempo: Almeno 3 giorni dopo l'iniezione intracitoplasmatica di spermatozoi
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Numero di embrioni ottenuti al giorno 3 di buona qualità
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Almeno 3 giorni dopo l'iniezione intracitoplasmatica di spermatozoi
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Misure di risultato secondarie
Misura del risultato |
Misura Descrizione |
Lasso di tempo |
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Consegna multipla
Lasso di tempo: A 24 settimane di gestazione
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Nascita di più di un bambino oltre le 24 settimane
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A 24 settimane di gestazione
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Tasso di maturazione
Lasso di tempo: Due giorni dopo il prelievo degli ovociti
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Percentuale di ovociti maturi per 2 tipi di coltura COC
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Due giorni dopo il prelievo degli ovociti
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Tasso di fecondazione
Lasso di tempo: 16-18 ore dopo l'iniezione intracitoplasmatica di spermatozoi
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Percentuale di ovociti fecondati da 2 tipi di coltura COC
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16-18 ore dopo l'iniezione intracitoplasmatica di spermatozoi
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Tasso di scissione
Lasso di tempo: Almeno 3 giorni dopo l'iniezione intracitoplasmatica di spermatozoi
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Percentuale di embrioni al terzo giorno rispetto agli ovociti fecondati da 2 tipi di coltura COC
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Almeno 3 giorni dopo l'iniezione intracitoplasmatica di spermatozoi
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Tasso di espansione
Lasso di tempo: Dopo almeno 30 ore di maturazione coltura
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Percentuale di complessi cumulo-ovocita espansi dopo la coltura da 2 tipi di coltura COC
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Dopo almeno 30 ore di maturazione coltura
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Il rapporto di espressione relativa ( R ) dei geni delle cellule del cumulo umano
Lasso di tempo: le cellule del cumulo saranno raccolte dopo almeno 30 ore di maturazione della coltura, conservate a -80oC fino alla purificazione dell'RNA
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Verranno raccolte le cellule del cumulo, sintesi del cDNA dopo la purificazione dell'mRNA, quantificazione relativa PCR per la rilevazione dell'espressione genica
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le cellule del cumulo saranno raccolte dopo almeno 30 ore di maturazione della coltura, conservate a -80oC fino alla purificazione dell'RNA
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Gravidanza clinica
Lasso di tempo: 5 settimane dopo il posizionamento dell'embrione dopo il completamento del primo trasferimento
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almeno un sacco gestazionale all'ecografia a 7 settimane di gestazione con rilevamento dell'attività del battito cardiaco
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5 settimane dopo il posizionamento dell'embrione dopo il completamento del primo trasferimento
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Tasso di impianto
Lasso di tempo: 3 settimane dopo il trasferimento dell'embrione dopo il completamento del primo trasferimento
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come numero di sacchi gestazionali per numero di embrioni trasferiti
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3 settimane dopo il trasferimento dell'embrione dopo il completamento del primo trasferimento
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Gravidanza in corso
Lasso di tempo: A 12 settimane di gestazione
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La gravidanza in corso è definita come gravidanza con frequenza cardiaca rilevabile a 12 settimane di gestazione o oltre, dopo il completamento del primo trasferimento
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A 12 settimane di gestazione
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Cattiva amministrazione
Lasso di tempo: a 24 settimane di gestazione dopo il completamento del primo trasferimento
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perdita di gravidanza a < 24 settimane
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a 24 settimane di gestazione dopo il completamento del primo trasferimento
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Gravidanza multipla
Lasso di tempo: 5 settimane dopo il posizionamento dell'embrione dopo il completamento del primo trasferimento
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Definita come presenza di più di una sacca all'ecografia precoce della gravidanza (6-8 settimane di gestazione)
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5 settimane dopo il posizionamento dell'embrione dopo il completamento del primo trasferimento
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Test di gravidanza positivo
Lasso di tempo: a 2 settimane dopo il posizionamento dell'embrione dopo il completamento del primo trasferimento
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Livello sierico di gonadotropina corionica umana superiore a 25 mIU/mL
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a 2 settimane dopo il posizionamento dell'embrione dopo il completamento del primo trasferimento
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Nascita viva
Lasso di tempo: A 24 settimane di gestazione
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definito come almeno un neonato dopo 24 settimane di gestazione e che mostra qualsiasi segno di vita; i gemelli sono stati contati come un'unica nascita
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A 24 settimane di gestazione
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Collaboratori e investigatori
Sponsor
Investigatori
- Investigatore principale: Tuong M Ho, MD, MCE, Hope Research Center
Pubblicazioni e link utili
Pubblicazioni generali
- Sanchez F, Le AH, Ho VNA, Romero S, Van Ranst H, De Vos M, Gilchrist RB, Ho TM, Vuong LN, Smitz J. Biphasic in vitro maturation (CAPA-IVM) specifically improves the developmental capacity of oocytes from small antral follicles. J Assist Reprod Genet. 2019 Oct;36(10):2135-2144. doi: 10.1007/s10815-019-01551-5. Epub 2019 Aug 9.
- Vuong LN, Le AH, Ho VNA, Pham TD, Sanchez F, Romero S, De Vos M, Ho TM, Gilchrist RB, Smitz J. Live births after oocyte in vitro maturation with a prematuration step in women with polycystic ovary syndrome. J Assist Reprod Genet. 2020 Feb;37(2):347-357. doi: 10.1007/s10815-019-01677-6. Epub 2020 Jan 4.
- Sanchez F, Romero S, De Vos M, Verheyen G, Smitz J. Human cumulus-enclosed germinal vesicle oocytes from early antral follicles reveal heterogeneous cellular and molecular features associated with in vitro maturation capacity. Hum Reprod. 2015 Jun;30(6):1396-409. doi: 10.1093/humrep/dev083. Epub 2015 Apr 22.
- Saenz-de-Juano MD, Ivanova E, Billooye K, Herta AC, Smitz J, Kelsey G, Anckaert E. Genome-wide assessment of DNA methylation in mouse oocytes reveals effects associated with in vitro growth, superovulation, and sexual maturity. Clin Epigenetics. 2019 Dec 19;11(1):197. doi: 10.1186/s13148-019-0794-y. Erratum In: Clin Epigenetics. 2020 Jan 27;12(1):18.
- Sanchez F, Lolicato F, Romero S, De Vos M, Van Ranst H, Verheyen G, Anckaert E, Smitz JEJ. An improved IVM method for cumulus-oocyte complexes from small follicles in polycystic ovary syndrome patients enhances oocyte competence and embryo yield. Hum Reprod. 2017 Oct 1;32(10):2056-2068. doi: 10.1093/humrep/dex262.
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Ultimo aggiornamento inviato che soddisfa i criteri QC
Ultimo verificato
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- 13/20/DD-BVMD
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Prove cliniche su PCOS
-
University Of PerugiaReclutamento
-
AdventHealth Translational Research InstituteAttivo, non reclutante
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Guangdong Women and Children HospitalCompletato
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Khyber Medical University PeshawarCompletato
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Ain Shams Maternity HospitalSconosciuto
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Assiut UniversitySconosciuto
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Mst.Sumyara KhatunBangladesh Medical UniversityReclutamento
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Reproductive & Genetic Hospital of CITIC-XiangyaReclutamento
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Mst.Sumyara KhatunCompletato
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Amina AltutunjiHuazhong University of Science and TechnologyCompletato