Cultura CAPA-IVM individual vs. grupo de complexos cumulus-oócitos
23 de julho de 2023 atualizado por: Mỹ Đức Hospital
Efeito da Cultura CAPA-IVM Individual vs. Grupo de Complexos Cumulus-oócito Humano de Pequenos Folículos Antrais em um Projeto de Estudo de Oócito IRMÃO
A maturação in vitro (IVM) de ovócitos é uma ART de estimulação mínima com efeitos colaterais hormonais reduzidos e riscos para as pacientes.
No entanto, a abordagem não é amplamente utilizada devido a uma lacuna de eficiência em comparação com a ART convencional.
A fim de otimizar e adaptar ainda mais o sistema CAPA-IVM na clínica IVM, este estudo piloto visa verificar a viabilidade de aplicar uma única estratégia COC CAPA-IVM versus o grupo COC cultura CAPA-IVM
Visão geral do estudo
Status
Concluído
Intervenção / Tratamento
Descrição detalhada
A maturação in vitro (IVM) de ovócitos é uma ART de estimulação mínima com efeitos colaterais hormonais reduzidos e riscos para as pacientes. No entanto, a abordagem não é amplamente utilizada devido a uma lacuna de eficiência em comparação com a ART convencional.
Os oócitos recuperados para procedimentos IVM derivam de um pool heterogêneo com características celulares e moleculares variáveis que indicam seu estado imaturo. Assim, sistemas in vitro que permitem e aumentam a aquisição e sincronização da competência meiótica (capacidade de retomar a meiose em resposta a um estímulo ovulatório) e competência de desenvolvimento (capacidade de ser fertilizado e apoiar o desenvolvimento inicial do embrião) antes do início da meiose são cruciais para a otimização de sistemas IVM humanos.
Um novo sistema de cultura IVM em duas etapas (denominado CAPA-IVM) envolvendo uma cultura de pré-maturação com peptídeo natriurético tipo C (CNP) e uma etapa de maturação na presença de anfirregulina (AREG), ambos compostos mais fisiológicos que melhoram a competência oocitária, tem sido introduzido em estudos clínicos anteriores. Até agora, esses estudos piloto provaram aumentar as taxas de maturação do oócito, embriões de boa qualidade no dia 3, blastocisto de boa qualidade e, como resultado, um maior rendimento embrionário. Os blastocistos CAPA-IVM mostraram taxas semelhantes de metilação e expressão gênica em gDMRs em comparação com embriões COS; e a expressão dos principais reguladores epigenéticos foi semelhante entre os dois grupos. Além disso, uma melhora nas taxas de gravidez reforça a relevância clínica do uso da estratégia CAPA-IVM.
A fim de otimizar e adaptar ainda mais o sistema CAPA-IVM na clínica IVM, este estudo piloto visa verificar a viabilidade de aplicar uma única estratégia COC CAPA-IVM versus o grupo COC cultura CAPA-IVM. Uma única cultura COC permitiria realizar uma análise molecular não invasiva por oócito maturado, a fim de identificar genes de qualidade expressos em células cumulus pós-IVM (biomarcadores cumulus), que poderiam ser posteriormente utilizados para identificar o(s) embrião(es) com maior potencial de implantação.
Tipo de estudo
Intervencional
Inscrição (Real)
15
Estágio
- Não aplicável
Contactos e Locais
Esta seção fornece os detalhes de contato para aqueles que conduzem o estudo e informações sobre onde este estudo está sendo realizado.
Locais de estudo
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Ho Chi Minh City, Vietnã
- My Duc Hospital
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Critérios de participação
Os pesquisadores procuram pessoas que se encaixem em uma determinada descrição, chamada de critérios de elegibilidade. Alguns exemplos desses critérios são a condição geral de saúde de uma pessoa ou tratamentos anteriores.
Critérios de elegibilidade
Idades elegíveis para estudo
18 anos a 37 anos (Adulto)
Aceita Voluntários Saudáveis
Sim
Descrição
Critério de inclusão:
- Com morfologia ovariana policística: pelo menos 25 folículos (2-9 mm) em todo o ovário e/ou volume ovariano aumentado (>10ml) (é suficiente que 1 ovário se enquadre nestes critérios)
- Sem grandes anormalidades uterinas ou ovarianas
- Ter pelo menos 15 folículos no dia da OPU
- Os pacientes consentem em participar do estudo
Critério de exclusão:
- Endometriose de alto grau (>grau 2)
- Casos com esperma extremamente pobre (servir OAT: densidade
Plano de estudo
Esta seção fornece detalhes do plano de estudo, incluindo como o estudo é projetado e o que o estudo está medindo.
Como o estudo é projetado?
Detalhes do projeto
- Finalidade Principal: Tratamento
- Alocação: Não randomizado
- Modelo Intervencional: Atribuição Paralela
- Mascaramento: Nenhum (rótulo aberto)
Armas e Intervenções
Grupo de Participantes / Braço |
Intervenção / Tratamento |
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Experimental: Cultura única
Transfira os COCs cultivados individualmente em meio de Capacitação para as gotas de lavagem individuais do "prato de lavagem" contendo "Meio de Maturação" e lave-os bem.
Em seguida, transfira os COCs um a um para o "Prato de cultura" com "Meio de maturação".
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Complexos cumulus-oócitos (COC) serão cultivados em condições padrão CAPA-IVM: 24 horas de capacitação seguidas de 30 horas de maturação.
O primeiro grupo será de cultura em pools (cultura de grupo).
O segundo grupo será cultivado individualmente em gotículas de 20µl.
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Experimental: Cultura de grupo
Transfira metade dos COCs (5-10 de cada vez) do prato de cultura Capacitation para o "prato de lavagem" contendo "Maturation Medium (Group Culture)" usando uma micropipeta Eppendorf e lave-os bem (carregue as pontas das pipetas com 5µl, máx. .
10µl).
Em seguida, transfira COCs para o "prato IVM" com "Maturation Medium (Group Culture)".
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Complexos cumulus-oócitos (COC) serão cultivados em condições padrão CAPA-IVM: 24 horas de capacitação seguidas de 30 horas de maturação.
O primeiro grupo será de cultura em pools (cultura de grupo).
O segundo grupo será cultivado individualmente em gotículas de 20µl.
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O que o estudo está medindo?
Medidas de resultados primários
Medida de resultado |
Descrição da medida |
Prazo |
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Número de embriões de boa qualidade
Prazo: Pelo menos 3 dias após a injeção intracitoplasmática de espermatozoides
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Número de embriões de 3º dia de boa qualidade obtidos
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Pelo menos 3 dias após a injeção intracitoplasmática de espermatozoides
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Medidas de resultados secundários
Medida de resultado |
Descrição da medida |
Prazo |
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Entrega múltipla
Prazo: Com 24 semanas de gestação
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Nascimento de mais de um bebê além de 24 semanas
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Com 24 semanas de gestação
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Taxa de maturação
Prazo: Dois dias após a coleta dos ovócitos
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Porcentagem de oócitos maduros por 2 tipos de cultura COC
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Dois dias após a coleta dos ovócitos
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Taxa de fertilização
Prazo: 16-18 horas após a injeção intracitoplasmática de espermatozoides
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Porcentagem de oócitos fertilizados por 2 tipos de cultura COC
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16-18 horas após a injeção intracitoplasmática de espermatozoides
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Taxa de clivagem
Prazo: Pelo menos 3 dias após a injeção intracitoplasmática de espermatozoides
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Porcentagem de embriões de dia 3 sobre oócitos fertilizados por 2 tipos de cultura COC
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Pelo menos 3 dias após a injeção intracitoplasmática de espermatozoides
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Taxa de expansão
Prazo: Após pelo menos 30 horas de cultura de maturação
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Porcentagem de complexos cumulus-oócitos expandidos após cultura por 2 tipos de cultura COC
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Após pelo menos 30 horas de cultura de maturação
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A razão de expressão relativa ( R ) de genes de células cumulus humanas
Prazo: as células do cumulus serão coletadas após pelo menos 30 horas de cultura de maturação, armazenadas a -80oC até a purificação do RNA
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Serão coletadas células do cumulus, síntese de cDNA após purificação do mRNA, PCR de quantificação relativa para detecção da expressão gênica
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as células do cumulus serão coletadas após pelo menos 30 horas de cultura de maturação, armazenadas a -80oC até a purificação do RNA
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Gravidez clínica
Prazo: 5 semanas após a colocação do embrião após a conclusão da primeira transferência
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pelo menos um saco gestacional na ultrassonografia com 7 semanas de gestação com a detecção da atividade do batimento cardíaco
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5 semanas após a colocação do embrião após a conclusão da primeira transferência
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Taxa de implantação
Prazo: 3 semanas após a transferência do embrião após a conclusão da primeira transferência
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como o número de sacos gestacionais por número de embriões transferidos
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3 semanas após a transferência do embrião após a conclusão da primeira transferência
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Gravidez em curso
Prazo: Com 12 semanas de gestação
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Gravidez em curso é definida como gravidez com frequência cardíaca detectável na 12ª semana de gestação ou mais, após a conclusão da primeira transferência
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Com 12 semanas de gestação
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Aborto espontâneo
Prazo: às 24 semanas de gestação após a conclusão da primeira transferência
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perda de gravidez em < 24 semanas
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às 24 semanas de gestação após a conclusão da primeira transferência
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Gravidez múltipla
Prazo: 5 semanas após a colocação do embrião após a conclusão da primeira transferência
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Definido como presença de mais de um saco no ultrassom no início da gravidez (6-8 semanas de gestação)
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5 semanas após a colocação do embrião após a conclusão da primeira transferência
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Teste de gravidez positivo
Prazo: 2 semanas após a colocação do embrião após a conclusão da primeira transferência
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Nível sérico de gonadotrofina coriônica humana maior que 25 mIU/mL
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2 semanas após a colocação do embrião após a conclusão da primeira transferência
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Nascido vivo
Prazo: Com 24 semanas de gestação
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definido como pelo menos um recém-nascido após 24 semanas de gestação e exibindo qualquer sinal de vida; gêmeos foram contados como um único nascimento
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Com 24 semanas de gestação
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Colaboradores e Investigadores
É aqui que você encontrará pessoas e organizações envolvidas com este estudo.
Patrocinador
Investigadores
- Investigador principal: Tuong M Ho, MD, MCE, Hope Research Center
Publicações e links úteis
A pessoa responsável por inserir informações sobre o estudo fornece voluntariamente essas publicações. Estes podem ser sobre qualquer coisa relacionada ao estudo.
Publicações Gerais
- Sanchez F, Le AH, Ho VNA, Romero S, Van Ranst H, De Vos M, Gilchrist RB, Ho TM, Vuong LN, Smitz J. Biphasic in vitro maturation (CAPA-IVM) specifically improves the developmental capacity of oocytes from small antral follicles. J Assist Reprod Genet. 2019 Oct;36(10):2135-2144. doi: 10.1007/s10815-019-01551-5. Epub 2019 Aug 9.
- Vuong LN, Le AH, Ho VNA, Pham TD, Sanchez F, Romero S, De Vos M, Ho TM, Gilchrist RB, Smitz J. Live births after oocyte in vitro maturation with a prematuration step in women with polycystic ovary syndrome. J Assist Reprod Genet. 2020 Feb;37(2):347-357. doi: 10.1007/s10815-019-01677-6. Epub 2020 Jan 4.
- Sanchez F, Romero S, De Vos M, Verheyen G, Smitz J. Human cumulus-enclosed germinal vesicle oocytes from early antral follicles reveal heterogeneous cellular and molecular features associated with in vitro maturation capacity. Hum Reprod. 2015 Jun;30(6):1396-409. doi: 10.1093/humrep/dev083. Epub 2015 Apr 22.
- Saenz-de-Juano MD, Ivanova E, Billooye K, Herta AC, Smitz J, Kelsey G, Anckaert E. Genome-wide assessment of DNA methylation in mouse oocytes reveals effects associated with in vitro growth, superovulation, and sexual maturity. Clin Epigenetics. 2019 Dec 19;11(1):197. doi: 10.1186/s13148-019-0794-y. Erratum In: Clin Epigenetics. 2020 Jan 27;12(1):18.
- Sanchez F, Lolicato F, Romero S, De Vos M, Van Ranst H, Verheyen G, Anckaert E, Smitz JEJ. An improved IVM method for cumulus-oocyte complexes from small follicles in polycystic ovary syndrome patients enhances oocyte competence and embryo yield. Hum Reprod. 2017 Oct 1;32(10):2056-2068. doi: 10.1093/humrep/dex262.
Datas de registro do estudo
Essas datas acompanham o progresso do registro do estudo e os envios de resumo dos resultados para ClinicalTrials.gov. Os registros do estudo e os resultados relatados são revisados pela National Library of Medicine (NLM) para garantir que atendam aos padrões específicos de controle de qualidade antes de serem publicados no site público.
Datas Principais do Estudo
Início do estudo (Real)
1 de outubro de 2020
Conclusão Primária (Real)
30 de novembro de 2020
Conclusão do estudo (Real)
24 de outubro de 2021
Datas de inscrição no estudo
Enviado pela primeira vez
5 de setembro de 2020
Enviado pela primeira vez que atendeu aos critérios de CQ
23 de setembro de 2020
Primeira postagem (Real)
24 de setembro de 2020
Atualizações de registro de estudo
Última Atualização Postada (Real)
25 de julho de 2023
Última atualização enviada que atendeu aos critérios de controle de qualidade
23 de julho de 2023
Última verificação
1 de julho de 2023
Mais Informações
Termos relacionados a este estudo
Palavras-chave
Outros números de identificação do estudo
- 13/20/DD-BVMD
Plano para dados de participantes individuais (IPD)
Planeja compartilhar dados de participantes individuais (IPD)?
NÃO
Informações sobre medicamentos e dispositivos, documentos de estudo
Estuda um medicamento regulamentado pela FDA dos EUA
Não
Estuda um produto de dispositivo regulamentado pela FDA dos EUA
Não
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