Effet de l'administration de probiotiques antioxydants sur la qualité séminale et les résultats de la reproduction.

Il s'agit d'une étude d'intervention prospective randomisée, unicentrique visant à évaluer l'effet de la combinaison de deux probiotiques sur la qualité séminale et les résultats reproductifs ultérieurs des patients infertiles. Comme il s'agit d'un complément alimentaire, nous serons soumis au règlement sur la biomédecine et non au règlement sur les essais cliniques, comme déjà classé par l'Agence espagnole du médicament. L'étude sera menée sur des patients infertiles à la clinique IVIRMA Valencia pendant deux ans pour compléter les interventions prévues et la collecte et l'analyse des données. La population de référence comprend les patientes infertiles venant à la clinique pour un traitement de procréation assistée par FIV/ICSI avec leurs propres ovocytes ou des dons.

Les patients viendront à la clinique pour subir le traitement. Si leurs caractéristiques sont en accord avec les critères d'inclusion, l'étude leur sera présentée et expliquée ainsi qu'à leurs partenaires afin qu'ils puissent évaluer leur participation à celle-ci. S'ils souhaitent participer, ils signeront un formulaire de consentement éclairé et seront randomisés à l'aide d'une liste de randomisation générée par ordinateur dans le groupe témoin (qui recevra le placebo) ou le groupe de traitement (qui recevra le composé probiotique).

Le taux de réussite chez les patientes présentant ces caractéristiques, confirmé par l'évaluation des informations historiques de la propre base de données de la clinique, est d'environ 35 % des cycles utilisant leurs propres ovocytes, ce qui peut être utilisé comme une approximation valable. Dans un test de contraste unilatéral, en supposant un risque d'erreur alpha de 0,05 et un bêta (puissance statistique) de 80 %, pour démontrer une différence de 15 % grâce à l'intervention, il faut un nombre de 134 cas par bras et, en supposant des pertes de 5 % au cours du suivi, ce nombre serait arrondi à 140 cas par groupe d'étude, ce qui fait un total de 280 couples à inclure dans l'étude.

L'essai est en double aveugle : le patient, l'investigateur et tout le personnel du site (à l'exception de l'infirmier/coordinateur de l'essai et/ou de l'assistant en pharmacie) resteront en aveugle tout au long de l'essai quant au traitement que chaque sujet a reçu, y compris le médecin évaluateur, l'embryologiste et les autres membres auxiliaires de l'équipe.

Le mâle affecté au groupe expérimental commencera à prendre une combinaison à 50 % des deux probiotiques (Lactobacillus rhamnosus CECT8361 et Bifidobacterium longum CECT7347) à une dose de 109 UFC/jour le jour même de la première visite. Les probiotiques seront fournis par la société ADM Biopolis S.L. (Valence, Espagne). Le support des probiotiques lyophilisés est la maltodextrine et le mélange est encapsulé dans des capsules d'hypromellose. Le patient prendra une gélule par jour correspondant à l'administration de 109 ufc/jour. Le patient doit prendre ces probiotiques pendant au moins 21 jours avant de subir un cycle de procréation assistée. Les patients recevant le placebo suivront les mêmes instructions. Pour les deux groupes de patients, un échantillon séminal sera prélevé lors de leur première visite pour évaluer la qualité de base du sperme, ainsi qu'une analyse du microbiome sera effectuée à l'aide d'un séquençage d'ARNr 16S (par ADM Biopolis) pour déterminer l'état de la sperme au point de départ de l'étude. Après 21 jours, les patientes seront désignées pour déposer un second échantillon de sperme afin de réaliser le cycle FIV/ICSI. Cet échantillon sera également analysé, à la fois pour les paramètres du sperme et le microbiome. Les valeurs obtenues à partir des deux échantillons prélevés seront comparées pour observer l'effet de l'administration du probiotique sur la qualité du sperme et sa population microbienne.

Les échantillons de sperme frais seront évalués au moyen d'un spermogramme selon les procédures opératoires standard, dans lequel des données seront recueillies sur le volume, le pH, la concentration de sperme, la mobilité des spermatozoïdes, la viabilité cellulaire et la morphologie. De plus, une analyse de la fragmentation de l'ADN sera réalisée à l'aide du kit Halosperm G2 (Halotech) basé sur la technique de dispersion de la chromatine du sperme. Une partie de l'échantillon frais sera congelée par immersion dans de l'azote liquide puis stockée dans un congélateur à -80°C, et envoyée à ADM Biopolis pour effectuer l'identification taxonomique des populations bactériennes dans les échantillons de sperme en utilisant le séquençage d'ARNr 16S avec la plateforme Ion Torrent (Technologies de la vie).

Une fois la FIV/ICSI réalisée et les ovocytes correctement fécondés, la sélection des embryons et le transfert des blastocystes seront effectués selon la pratique médicale habituelle dans l'utérus de la femme, afin qu'ils puissent poursuivre leur développement dans l'utérus.

Lors du recrutement, le couple signera également un formulaire de consentement permettant à l'équipe de recueillir des données à partir des résultats du cycle, tant pendant le développement de l'embryon que pendant la grossesse et l'accouchement.

Une base de données sera définie avec les variables destinées à être analysées en fonction des objectifs fixés : analyse de la qualité du sperme, fragmentation de l'ADN du sperme, analyse microbienne, développement embryonnaire, gestation et accouchement. Les données exportées seront dûment codifiées afin de protéger les informations cliniques et personnelles des patients conformément à la loi espagnole sur la protection des données. Enfin, et préalablement à l'étude statistique, une analyse exploratoire des données sera effectuée pour examiner la qualité des informations extraites.

La principale variable de l'étude est le taux de naissances vivantes par cycle défini comme le pourcentage de cas dans lesquels un traitement complet de procréation assistée est effectué avec du sperme témoin ou expérimental, qui parviennent à obtenir une progéniture pour chaque cycle de stimulation ovarienne inclus dans le étude.