Efecto de la administración de probióticos antioxidantes sobre la calidad seminal y los resultados reproductivos.

Este es un estudio de intervención prospectivo, aleatorizado, unicéntrico, destinado a evaluar el efecto de la combinación de dos probióticos en la calidad seminal y los resultados reproductivos posteriores de pacientes infértiles. Al tratarse de un complemento alimenticio, estaremos sujetos al Reglamento de Biomedicina y no al Reglamento de Ensayos Clínicos, como ya clasifica la Agencia Española del Medicamento. El estudio se realizará en pacientes infértiles en la clínica IVIRMA Valencia durante dos años para completar las intervenciones previstas y la recogida y análisis de datos. La población de referencia incluye pacientes infértiles que acuden a la consulta para tratamiento de reproducción asistida FIV/ICSI con ovocitos propios o donados.

Los pacientes acudirán a la clínica para someterse al tratamiento. Si sus características están de acuerdo con los criterios de inclusión, se les presentará y explicará el estudio a ellos y a sus socios para que puedan evaluar su participación en el mismo. Si desean participar, firmarán un formulario de consentimiento informado y serán aleatorizados utilizando una lista de aleatorización generada por computadora en el grupo de control (que recibirá el placebo) o el grupo de tratamiento (que recibirá el compuesto probiótico).

La tasa de éxito en pacientes de estas características, confirmada por la evaluación de la información histórica de la propia base de datos de la clínica, es de aproximadamente el 35% de los ciclos utilizando ovocitos propios, lo que puede utilizarse como una aproximación válida. En una prueba de contraste unilateral, asumiendo un riesgo de error alfa de 0,05 y un beta (poder estadístico) del 80%, para demostrar una diferencia del 15% gracias a la intervención, necesitamos un número de 134 casos por brazo y, suponiendo pérdidas del 5% durante el seguimiento, este número se redondearía a 140 casos por grupo de estudio, lo que hace un total de 280 parejas a incluir en el estudio.

El ensayo es doble ciego: el paciente, el investigador y todo el personal del sitio (con la excepción del enfermero/coordinador del ensayo y/o asistente de farmacia) permanecerán ciegos durante el transcurso del ensayo en cuanto al tratamiento que recibió cada sujeto, incluido el médico evaluador, el embriólogo y otros auxiliares del equipo.

El varón asignado al grupo experimental comenzará a tomar una combinación al 50% de los dos probióticos (Lactobacillus rhamnosus CECT8361 y Bifidobacterium longum CECT7347) a una dosis de 109 UFC/día el mismo día de la primera visita. Los probióticos serán suministrados por la empresa ADM Biopolis S.L. (Valencia, España). El portador de los probióticos liofilizados es la maltodextrina y la mezcla se encapsula en cápsulas de hipromelosa. El paciente tomará una cápsula diaria correspondiente a la administración de 109 ufc/día. La paciente debe tomar estos probióticos durante al menos 21 días antes de someterse a un ciclo de reproducción asistida. Los pacientes que reciban el placebo seguirán las mismas instrucciones. Para ambos grupos de pacientes, se recogerá una muestra seminal en su primera visita para evaluar la calidad basal del semen, así como se realizará un análisis de microbioma mediante secuenciación 16S rRNA (por ADM Biopolis) para determinar el estado del semen. semen en el punto de partida del estudio. Después de 21 días, los pacientes serán designados para depositar una segunda muestra de semen para realizar el ciclo de FIV/ICSI. Esta muestra también será analizada, tanto para parámetros seminales como para microbioma. Se compararán los valores obtenidos de ambas muestras recolectadas para observar el efecto de la administración del probiótico en la calidad del esperma y su población microbiana.

Las muestras de semen fresco se evaluarán mediante un seminograma siguiendo los procedimientos operativos estándar, en el que se recogerán datos de volumen, pH, concentración espermática, movilidad espermática, viabilidad celular y morfología. Además, se realizará un análisis de fragmentación del ADN mediante el kit Halosperm G2 (Halotech) basado en la técnica de dispersión de la cromatina espermática. Una parte de la muestra fresca será congelada por inmersión en nitrógeno líquido y posteriormente almacenada en un congelador a -80ºC, y enviada a ADM Biopolis para realizar la identificación taxonómica de las poblaciones bacterianas en las muestras de semen mediante secuenciación 16S rRNA con la plataforma Ion Torrent (Tecnologías de la vida).

Una vez realizada la FIV/ICSI y los ovocitos correctamente fecundados, se procederá a la selección de embriones y transferencia de blastocistos según práctica médica habitual al útero de la mujer, para que puedan continuar su desarrollo en el útero materno.

Durante el reclutamiento, la pareja también firmará un formulario de consentimiento que permitirá al equipo recopilar datos de los resultados del ciclo, tanto durante el desarrollo del embrión como durante el embarazo y el parto.

Se definirá una base de datos con las variables destinadas a ser analizadas según los objetivos planteados: análisis de calidad seminal, fragmentación del ADN espermático, análisis microbiano, desarrollo embrionario, gestación y parto. Los datos exportados serán debidamente codificados con el fin de proteger la información clínica y personal de los pacientes según la ley española de protección de datos. Finalmente, y previo al estudio estadístico, se realizará un análisis exploratorio de datos para revisar la calidad de la información extraída.

La variable principal del estudio es la tasa de nacidos vivos por ciclo definida como el porcentaje de casos en los que se realiza un tratamiento completo de reproducción asistida con semen control o experimental, que consiguen obtener descendencia por cada ciclo de estimulación ovárica incluido en el estudiar.