Effekt av antioksidant probiotisk administrering på sædkvalitet og reproduktive resultater.

Dette er en prospektiv randomisert, unsentrisk intervensjonsstudie rettet mot å evaluere effekten av kombinasjonen av to probiotika på sædkvaliteten og påfølgende reproduktive utfall hos infertile pasienter. Siden det er et kosttilskudd, vil vi være underlagt biomedisinforordningen og ikke forskriften om kliniske utprøvinger, som allerede er klassifisert av det spanske legemiddelbyrået. Studien vil bli utført på infertile pasienter ved IVIRMA Valencia-klinikken i to år for å fullføre planlagte intervensjoner og datainnsamling og analyse. Referansepopulasjonen inkluderer infertile pasienter som kommer til klinikken for IVF/ICSI assistert reproduksjonsbehandling med egne eller donerte oocytter.

Pasienter vil komme til klinikken for å gjennomgå behandlingen. Hvis egenskapene deres er i samsvar med inklusjonskriteriene, vil studien bli presentert og forklart for dem og deres partnere slik at de kan evaluere deres deltakelse i den. Hvis de ønsker å delta, vil de signere et informert samtykkeskjema, og de vil bli randomisert ved hjelp av en datagenerert randomiseringsliste til kontrollgruppen (som vil motta placebo) eller behandlingsgruppen (som vil motta den probiotiske forbindelsen).

Suksessraten hos pasienter med disse egenskapene, bekreftet ved evaluering av historisk informasjon fra klinikkens egen database, er omtrent 35 % av syklusene ved bruk av egne oocytter, som kan brukes som en gyldig tilnærming. I en ensidig kontrasttest, forutsatt en risiko for en alfafeil på 0,05 og en beta (statistisk styrke) på 80 %, for å demonstrere en forskjell på 15 % takket være intervensjonen, trenger vi et antall på 134 tilfeller per arm, og forutsatt at tap på 5 % under oppfølgingen, vil dette tallet bli avrundet til 140 tilfeller per studiegruppe, noe som gjør at totalt 280 par skal inkluderes i studien.

Forsøket er dobbeltblindt: Pasienten, etterforskeren og alt personell på stedet (med unntak av sykepleieren/koordinatoren og/eller apotekassistenten) vil forbli blindet i løpet av forsøket med hensyn til hvilken behandling hver enkelt forsøksperson mottok, inkludert den vurderende legen, embryologen og andre hjelpemedlemmer i teamet.

Hannen som er tildelt den eksperimentelle gruppen vil begynne å ta en 50 % kombinasjon av de to probiotika (Lactobacillus rhamnosus CECT8361 og Bifidobacterium longum CECT7347) i en dose på 109 CFU/dag samme dag som det første besøket. Probiotikaen vil bli levert av selskapet ADM Biopolis S.L. (Valencia, Spania). Bæreren av lyofiliserte probiotika er maltodekstrin og blandingen er innkapslet i hypromellosekapsler. Pasienten vil ta en kapsel daglig tilsvarende administrering av 109 cfu/dag. Pasienten bør ta disse probiotika i minst 21 dager før de gjennomgår en assistert befruktningssyklus. Pasienter som får placebo vil følge de samme instruksjonene. For begge gruppene av pasienter vil en sædprøve bli samlet inn ved deres første besøk for å evaluere baselinekvaliteten til sæden, samt en mikrobiomanalyse vil bli utført ved bruk av 16S rRNA-sekvensering (av ADM Biopolis) for å bestemme statusen til sæd ved studiens startpunkt. Etter 21 dager vil pasientene bli oppnevnt til å deponere en ny sædprøve for å utføre IVF/ICSI-syklusen. Denne prøven vil også bli analysert, både for sædparametre og mikrobiom. Verdier oppnådd fra begge prøvene som samles inn, vil bli sammenlignet for å observere effekten av administreringen av probiotikaet på kvaliteten på sædceller og dens mikrobielle populasjon.

Ferske sædprøver vil bli evaluert ved hjelp av et spermiogram etter standard operasjonsprosedyrer, hvor data vil bli samlet inn om volum, pH, sædkonsentrasjon, sædmobilitet, cellelevedyktighet og morfologi. I tillegg vil det bli utført en DNA-fragmenteringsanalyse ved bruk av Halosperm G2-settet (Halotech) basert på spermkromatin-dispersjonsteknikken. En del av den ferske prøven vil fryses ved nedsenking i flytende nitrogen og deretter lagres i en -80ºC fryser, og sendes til ADM Biopolis for å utføre taksonomisk identifisering av bakteriepopulasjonene i sædprøvene ved bruk av 16S rRNA-sekvensering med Ion Torrent-plattformen (Livsteknologier).

Når IVF/ICSI er utført og oocytter er korrekt befruktet, vil embryoseleksjon og blastocystoverføring bli utført i henhold til vanlig medisinsk praksis til kvinnens livmor, slik at de kan fortsette utviklingen i livmoren.

Under rekrutteringen vil paret også signere et samtykkeskjema som lar teamet samle inn data fra resultatene av syklusen, både under embryoutvikling og under graviditet og fødsel.

En database vil bli definert med variablene som skal analyseres i henhold til målene som er satt: sædkvalitetsanalyse, sperm-DNA-fragmentering, mikrobiell analyse, embryoutvikling, svangerskap og levering. De eksporterte dataene vil bli behørig kodifisert for å beskytte den kliniske og personlige informasjonen til pasientene i henhold til den spanske databeskyttelsesloven. Til slutt, og i forkant av den statistiske studien, vil det bli utført en utforskende dataanalyse for å vurdere kvaliteten på informasjonen som trekkes ut.

Hovedvariabelen i studien er fødselsraten per syklus definert som prosentandelen av tilfeller der en fullstendig behandling av assistert befruktning utføres med kontroll- eller eksperimentell sæd, som klarer å få avkom for hver syklus av eggstokkstimulering inkludert i studere.