Effekt af antioxidant probiotisk administration på sædkvalitet og reproduktive resultater.

Dette er et prospektivt randomiseret, unicentrisk interventionsstudie, der har til formål at evaluere effekten af ​​kombinationen af ​​to probiotika på sædkvaliteten og efterfølgende reproduktive resultater hos infertile patienter. Da det er et kosttilskud, vil vi være underlagt forordningen om biomedicin og ikke forordningen om kliniske forsøg, som allerede er klassificeret af det spanske lægemiddelagentur. Undersøgelsen vil blive udført på infertile patienter på IVIRMA Valencia klinikken i to år for at gennemføre planlagte interventioner og dataindsamling og analyse. Referencepopulationen omfatter infertile patienter, der kommer til klinikken til IVF/ICSI assisteret reproduktionsbehandling med egne eller donerede oocytter.

Patienter vil komme til klinikken for at gennemgå behandlingen. Hvis deres karakteristika er i overensstemmelse med inklusionskriterierne, vil undersøgelsen blive præsenteret og forklaret for dem og deres partnere, så de kan evaluere deres deltagelse i den. Hvis de ønsker at deltage, underskriver de en informeret samtykkeerklæring, og de vil ved hjælp af en computergenereret randomiseringsliste blive randomiseret til kontrolgruppen (som får placebo) eller behandlingsgruppen (som får den probiotiske forbindelse).

Succesraten hos patienter med disse karakteristika, bekræftet af evalueringen af ​​historisk information fra klinikkens egen database, er ca. 35 % af cyklusserne med egne oocytter, hvilket kan bruges som en gyldig tilnærmelse. I en ensidig kontrasttest, der antager en risiko for en alfa-fejl på 0,05 og en beta (statistisk styrke) på 80 %, for at påvise en forskel på 15 % takket være interventionen, har vi brug for et antal på 134 tilfælde pr. arm, og forudsat tab på 5 % under opfølgningen, ville dette tal blive afrundet til 140 tilfælde pr. undersøgelsesgruppe, hvilket gør, at i alt 280 par skal indgå i undersøgelsen.

Forsøget er dobbeltblindt: patienten, investigatoren og alt personale på stedet (med undtagelse af forsøgssygeplejersken/koordinatoren og/eller apoteksassistenten) vil forblive blinde gennem hele forsøgsforløbet med hensyn til, hvilken behandling hver enkelt forsøgsperson modtog, inkl. den vurderende læge, embryologen og andre hjælpemedlemmer i teamet.

Hannen, der er tildelt forsøgsgruppen, vil begynde at tage en 50% kombination af de to probiotika (Lactobacillus rhamnosus CECT8361 og Bifidobacterium longum CECT7347) i en dosis på 109 CFU/dag samme dag som det første besøg. Probiotikaen vil blive leveret af firmaet ADM Biopolis S.L. (Valencia, Spanien). Bæreren af ​​frysetørrede probiotika er maltodextrin, og blandingen er indkapslet i hypromellosekapsler. Patienten vil tage en kapsel dagligt svarende til administration af 109 cfu/dag. Patienten skal tage disse probiotika i mindst 21 dage, før han gennemgår en assisteret reproduktionscyklus. Patienter, der får placebo, vil følge de samme instruktioner. For begge grupper af patienter vil der blive indsamlet en sædprøve ved deres første besøg for at evaluere sædens basislinjekvalitet, ligesom der vil blive udført en mikrobiomanalyse ved hjælp af 16S rRNA-sekventering (af ADM Biopolis) for at bestemme status for sæd ved undersøgelsens startpunkt. Efter 21 dage vil patienterne blive udpeget til at deponere en anden sædprøve for at udføre IVF/ICSI-cyklussen. Denne prøve vil også blive analyseret, både for sædparametre og mikrobiom. Værdier opnået fra begge de indsamlede prøver vil blive sammenlignet for at observere effekten af ​​administrationen af ​​probiotikumet på kvaliteten af ​​sædceller og dens mikrobielle population.

Friske sædprøver vil blive evalueret ved hjælp af et spermiogram efter standard operationsprocedurer, hvor data vil blive indsamlet om volumen, pH, sædkoncentration, sædmobilitet, cellelevedygtighed og morfologi. Derudover vil der blive udført en DNA-fragmenteringsanalyse ved brug af Halosperm G2-kittet (Halotech) baseret på sædkromatin-dispersionsteknikken. En del af den friske prøve vil blive frosset ved nedsænkning i flydende nitrogen og derefter opbevaret i en -80ºC fryser og sendt til ADM Biopolis for at udføre den taksonomiske identifikation af bakteriepopulationerne i sædprøverne ved hjælp af 16S rRNA-sekventering med Ion Torrent-platformen (Livsteknologier).

Når IVF/ICSI er udført og oocytter er blevet korrekt befrugtet, vil embryoselektion og blastocystoverførsel blive udført efter sædvanlig lægepraksis til kvindens livmoder, så de kan fortsætte deres udvikling i livmoderen.

Under rekrutteringen vil parret også underskrive en samtykkeerklæring, der giver teamet mulighed for at indsamle data fra resultaterne af cyklussen, både under embryoudvikling og under graviditeten og fødslen.

En database vil blive defineret med de variabler, der er bestemt til at blive analyseret i henhold til de opstillede mål: sædkvalitetsanalyse, sæd-DNA-fragmentering, mikrobiel analyse, embryoudvikling, graviditet og levering. De eksporterede data vil blive behørigt kodificeret for at beskytte de kliniske og personlige oplysninger om patienterne i henhold til den spanske databeskyttelseslov. Endelig vil der forud for den statistiske undersøgelse blive gennemført en eksplorativ dataanalyse for at gennemgå kvaliteten af ​​de udtrukne oplysninger.

Studiets hovedvariabel er den levende fødselsrate pr. cyklus defineret som procentdelen af ​​tilfælde, hvor en komplet behandling af assisteret reproduktion udføres med kontrol- eller forsøgssæd, som formår at få afkom for hver cyklus af ovariestimulering inkluderet i undersøgelse.