La nouvelle méthode LC-MS/MS pour la détermination du tacrolimus non lié dans le plasma (FreeTAC)

Comme il y a plus de 15 000 patients en Pologne sous traitement continu au tacrolimus (TAC), l'identification et la validation de biomarqueurs plus sensibles et spécifiques sont de la plus haute importance. Les chercheurs proposent une évaluation en plusieurs étapes de la surveillance thérapeutique des médicaments (TDM) TAC chez les receveurs rénaux et hépatiques. Un rôle du profilage génétique sur la concentration des médicaments et les effets cliniques sera également abordé. Le projet contribuera de manière significative à la compréhension de la pharmacocinétique du tacrolimus et de la réponse corporelle à l'exposition aux médicaments. De plus, le projet proposé est la première tentative d'intégrer à la fois différentes méthodes de mesure TDM et la génétique des patients dans une étude prospective rigoureuse avec l'évaluation des effets cliniques de surexposition et de sous-exposition TAC. On s'attend à ce qu'elle fournisse un argument pour la mise en place d'une thérapie immunosuppressive encore plus personnalisée et prévisible.

Les enquêteurs émettent l'hypothèse que :

1. Il existe une corrélation entre le niveau de TAC libre et la toxicité des médicaments d'une part, et le rejet de greffe et la sous-immunosuppression malgré la concentration cible dans le sang total d'autre part.
2. Les expresseurs et les non-expresseurs du CYP3A5 présenteront différents niveaux de TAC dans le C0 du sang total et le TAC libre ainsi que des profils d'efficacité et de toxicité différents.
3. La concentration de TAC libre est liée aux changements de concentration des composants sanguins, il est donc possible de dériver l'équation pour calculer la concentration de TAC libre en tant qu'outil utile pour l'ajustement de la posologie du médicament

Étudier le design

Objectifs:

Phase 1) Un objectif principal de cette étude est de développer et de valider une nouvelle méthode de mesure du tacrolimus non lié. - Publication : 12 mars 2022 (https://doi.org/10.3390/pharmaceutics14030632)

Phase 2) Un objectif principal est de calculer la fraction libre du TAC à partir du niveau d'hématocrite, de la concentration d'albumine et du TAC C0 du sang total de routine pour prédire plus précisément l'ajustement de la dose. L'équation générée sera tracée par rapport aux polymorphismes du CYP3A.

Phase 3) Un objectif principal est de rechercher une corrélation entre le niveau de TAC non lié dans un ultrafiltrat avec des épisodes de rejet de greffe.

Critères secondaires :

Une comparaison complexe de différentes méthodes de détermination de la concentration de TAC dans le sang total, le plasma et l'ultrafiltrat est prévue.

Le bénéfice du génotypage avant l'administration de TAC pour la prédiction de dose sera évalué.

Les groupes étudiés :

1. 40 greffés rénaux ou hépatiques consécutifs sous immunosuppression basée sur TAC.
2. 300 greffés rénaux fréquentant la clinique externe locale.
3. 40 greffés rénaux ayant subi un rejet aigu de l'allogreffe rénale.

Mesures TAC :

Les mesures des concentrations de tacrolimus non lié dans l'ultrafiltrat plasmatique et des concentrations de tacrolimus dans le plasma et le sang total seront effectuées à l'aide d'un système Nexera LC avec LCMS-8050 MS triple quadripôle avec ascomycine et tacrolimus deutéré comme étalons internes.

Génotypage :

L'ADN des patients sera purifié et analysé par RT-PCR pour les polymorphismes CYP3A4 et CYP3A5 Durée de l'étude : L'étude est prévue sur 3 ans : 2,5 ans pour le prélèvement des échantillons, 0,5 an pour l'analyse et la publication des résultats.

Variables d'efficacité : surveillance standard des paramètres de laboratoire sanguins et urinaires, niveau minimal de TAC dans le sang total (C0), concentration de TAC plasmatique, concentration de TAC libre dans l'ultrafiltrat plasmatique, doses quotidiennes de TAC.