De nieuwe LC-MS/MS-methode voor de bepaling van ongebonden tacrolimus in plasma (FreeTAC)

Aangezien er in Polen meer dan 15.000 patiënten zijn die continu met tacrolimus (TAC) worden behandeld, is de identificatie en validatie van meer gevoelige en specifieke biomarkers van het grootste belang. De onderzoekers stellen een beoordeling in meerdere stappen voor van TAC-therapeutische medicijnmonitoring (TDM) bij nier- en leverontvangers. Er zal ook aandacht worden besteed aan de rol van genetische profilering op de geneesmiddelconcentratie en klinische effecten. Het project zal aanzienlijk bijdragen aan het begrijpen van de farmacokinetiek van tacrolimus en de reactie van het lichaam op blootstelling aan geneesmiddelen. Bovendien is het voorgestelde project de eerste poging om zowel verschillende TDM-meetmethoden als patiëntgenetica te integreren in een rigoureuze, prospectieve studie met de beoordeling van de klinische over- en onderbelichting TAC-effecten. Verwacht wordt dat het een argument zal zijn voor de implementatie van nog meer gepersonaliseerde, voorspelbare immunosuppressieve therapie.

De onderzoekers veronderstellen dat:

1. Er is een correlatie tussen het vrije TAC-gehalte en geneesmiddeltoxiciteit aan de ene kant, en transplantaatafstoting en onderimmunosuppressie ondanks de beoogde volbloedconcentratie aan de andere kant.
2. CYP3A5-expressoren en niet-expressoren zullen verschillende niveaus van TAC vertonen in zowel volbloed C0 als vrij TAC C0, evenals verschillende effectiviteits- en toxiciteitsprofielen.
3. De concentratie van vrij TAC is gerelateerd aan veranderingen in de concentratie van bloedbestanddelen, dus het is mogelijk om de vergelijking af te leiden voor het berekenen van de vrije TAC-concentratie als een nuttig hulpmiddel voor de aanpassing van de geneesmiddeldosering

Studie ontwerp

Doelstellingen:

Fase 1) Een hoofddoel van deze studie is het ontwikkelen en valideren van een nieuwe methode voor het meten van ongebonden tacrolimus. - Gepubliceerd: 12 maart 2022 (https://doi.org/10.3390/pharmaceutics14030632)

Fase 2) Een primaire doelstelling is het berekenen van de vrije fractie van TAC uit hematocrietniveau, albumineconcentratie en standaard volbloed TAC C0 om dosisaanpassing nauwkeuriger te voorspellen. De gegenereerde vergelijking wordt uitgezet tegen CYP3A-polymorfismen.

Fase 3) Een primaire doelstelling is het zoeken naar een correlatie tussen het ongebonden TAC-niveau in een ultrafiltraat met episoden van transplantaatafstoting.

Secundaire eindpunten:

Een complexe vergelijking van verschillende methoden voor het bepalen van de TAC-concentratie in volbloed, plasma en ultrafiltraat is gepland.

Het voordeel van genotypering vóór toediening van TAC voor dosisvoorspelling zal worden geëvalueerd.

De bestudeerde groepen:

1. 40 opeenvolgende ontvangers van een nier- of levertransplantatie op TAC-gebaseerde immunosuppressie.
2. 300 ontvangers van een niertransplantatie die de plaatselijke polikliniek bezoeken.
3. 40 ontvangers van een niertransplantaat ervaren acute afstoting van het niertransplantaat.

TAC-metingen:

Metingen van ongebonden tacrolimusconcentraties in plasma-ultrafiltraat en tacrolimusconcentraties in plasma en volbloed zullen worden uitgevoerd met behulp van een Nexera LC-systeem met LCMS-8050 MS triple quadrupool met ascomycine en gedeutereerde tacrolimus als interne standaarden.

genotypering:

DNA van patiënten zal worden gezuiverd en geanalyseerd met behulp van RT-PCR voor CYP3A4- en CYP3A5-polymorfismen Studieduur: De studie is gepland voor 3 jaar: 2,5 jaar voor het verzamelen van monsters, 0,5 jaar voor analyse en publicatie van de resultaten.

Werkzaamheidsvariabelen: standaardcontrole van bloed- en urinelaboratoriumparameters, TAC-dalspiegel (C0) in volbloed, TAC-plasmaconcentratie, vrije TAC-concentratie in plasma-ultrafiltraat, dagelijkse TAC-doses.