Az új LC-MS/MS módszer a nem kötött takrolimusz meghatározására plazmában (FreeTAC)

Mivel Lengyelországban több mint 15 000 beteg részesül folyamatos takrolimusz (TAC) kezelésben, az érzékenyebb és specifikusabb biomarkerek azonosítása és validálása rendkívül fontos. A kutatók a TAC terápiás gyógyszer-monitoring (TDM) többlépcsős értékelését javasolják vese- és májrecipienseknél. A genetikai profilalkotásnak a gyógyszerkoncentrációban és a klinikai hatásokban betöltött szerepével is foglalkozni fognak. A projekt jelentősen hozzájárul majd a takrolimusz farmakokinetikájának és a szervezet gyógyszerexpozícióra adott válaszának megértéséhez. Ezenkívül a javasolt projekt az első kísérlet arra, hogy mind a különböző TDM mérési módszereket, mind a beteggenetikát egy szigorú, prospektív vizsgálatba integrálják a klinikai túl- és alulexpozíciós TAC hatások értékelésével. Várhatóan érvként szolgál majd a még személyre szabottabb, kiszámíthatóbb immunszuppresszív terápia megvalósítása mellett.

A kutatók azt feltételezik, hogy:

1. Egyrészt összefüggés van a szabad TAC-szint és a gyógyszertoxicitás között, másrészt a graft kilökődése és az immunszuppresszió a megcélzott teljes vérkoncentráció ellenére.
2. A CYP3A5 expresszáló és nem expresszáló szerek eltérő TAC-szintet mutatnak mind a teljes vér C0-ban, mind a szabad TAC C0-ban, valamint eltérő hatékonysági és toxicitási profillal.
3. A szabad TAC koncentrációja összefügg a vérkomponensek koncentrációjának változásával, így levezethető a szabad TAC koncentráció kiszámításának egyenlete, amely hasznos eszköz a gyógyszeradagolás beállításához.

Dizájnt tanulni

Célok:

1. fázis A vizsgálat elsődleges célja egy új módszer kifejlesztése és validálása a kötetlen takrolimusz mérésére. - Közzétéve: 2022. március 12. (https://doi.org/10.3390/pharmaceutics14030632)

2. fázis) Az elsődleges cél a TAC szabad frakciójának kiszámítása a hematokrit szintből, az albumin koncentrációból és a rutin teljes vér TAC C0-ból, hogy pontosabban előre jelezzük a dózismódosítást. A generált egyenletet a CYP3A polimorfizmusok függvényében ábrázoljuk.

3. fázis) Az elsődleges cél az, hogy összefüggést keressünk az ultrafiltrátumban lévő kötetlen TAC szint és a graft kilökődési epizódjai között.

Másodlagos végpontok:

A teljes vérben, plazmában és ultrafiltrátumban a TAC-koncentráció meghatározásának különböző módszereinek komplex összehasonlítását tervezik.

Értékelni fogják a TAC beadása előtti genotipizálás előnyeit a dózis előrejelzéséhez.

A vizsgált csoportok:

1. 40 egymást követő vese- vagy májátültetett beteg TAC-alapú immunszuppresszióban részesült.
2. 300 vesetranszplantált beteg jár a helyi ambulancián.
3. 40 vesetranszplantált recipiens tapasztalta a vese allograft akut kilökődését.

TAC mérések:

A plazma ultrafiltrátumban a nem kötött takrolimusz-koncentráció, valamint a plazmában és a teljes vérben lévő takrolimusz-koncentráció mérése Nexera LC rendszerrel történik, LCMS-8050 MS tripla kvadrupollal, belső standardként aszkomicinnel és deuterált takrolimuszszal.

Genotipizálás:

A betegek DNS-ét megtisztítják és RT-PCR segítségével elemzik a CYP3A4 és CYP3A5 polimorfizmusok kimutatására. A vizsgálat időtartama: A vizsgálat tervezett időtartama 3 év: 2,5 év mintagyűjtés, 0,5 év elemzés és az eredmények publikálása.

Hatékonysági változók: A vér és a vizelet laboratóriumi paramétereinek standard monitorozása, teljes vér TAC minimális szintje (C0), plazma TAC koncentráció, szabad TAC koncentráció plazma ultrafiltrátumban, TAC napi adagok.