Den nye LC-MS/MS-metoden for bestemmelse av ubundet takrolimus i plasma (FreeTAC)

Siden det er over 15 000 pasienter i Polen på kontinuerlig takrolimus (TAC) terapi, er identifisering og validering av mer sensitive og spesifikke biomarkører av største betydning. Etterforskerne foreslår en flertrinnsvurdering av TAC terapeutisk medikamentovervåking (TDM) hos nyre- og levermottakere. En rolle for genetisk profilering på legemiddelkonsentrasjon og kliniske effekter vil også bli tatt opp. Prosjektet vil i betydelig grad bidra til å forstå takrolimus farmakokinetikk og kroppens respons på legemiddeleksponering. Dessuten er det foreslåtte prosjektet det første forsøket på å integrere både ulike TDM-målemetoder og pasientgenetikk i en streng, prospektiv studie med vurdering av kliniske over- og undereksponering TAC-effekter. Det forventes å gi et argument for implementering av enda mer personlig, forutsigbar immunsuppressiv terapi.

Etterforskerne antar at:

1. Det er en korrelasjon av fritt TAC-nivå med legemiddeltoksisitet på den ene siden, og graftavstøtning og underimmunsuppresjon til tross for målfullblodkonsentrasjon på den andre.
2. CYP3A5-ekspressorer og ikke-ekspressorer vil presentere ulike nivåer av TAC i både fullblods C0 og fri TAC C0, samt ulike effektivitets- og toksisitetsprofiler.
3. Konsentrasjonen av fri TAC er relatert til endringer i konsentrasjonen av blodkomponenter, og derfor er det mulig å utlede ligningen for å beregne fri TAC-konsentrasjon som et nyttig verktøy for justering av medikamentdose

Studere design

Mål:

Fase 1) Et hovedmål med denne studien er å utvikle og validere en ny metode for måling av ubundet takrolimus. – Publisert: 12. mars 2022 (https://doi.org/10.3390/pharmaceutics14030632)

Fase 2) Et primært mål er å beregne fri fraksjon av TAC fra hematokritnivå, albuminkonsentrasjon og rutinemessig TAC C0 i fullblod for å forutsi dosejustering mer nøyaktig. Den genererte ligningen vil bli plottet mot CYP3A polymorfismer.

Fase 3) Et primært mål er å se etter en korrelasjon mellom ubundet TAC-nivå i et ultrafiltrat med graftavstøtingsepisoder.

Sekundære endepunkter:

En kompleks sammenligning av ulike metoder for bestemmelse av TAC-konsentrasjon i fullblod, plasma og ultrafiltrat er planlagt.

Fordelen med genotyping før administrering av TAC for doseprediksjon vil bli evaluert.

De studerte gruppene:

1. 40 påfølgende nyre- eller levertransplanterte på TAC-basert immunsuppresjon.
2. 300 nyretransplanterte på lokal poliklinikk.
3. 40 nyretransplanterte pasienter som opplever akutt avstøtning av nyretransplantatet.

TAC målinger:

Målinger av ubundne takrolimuskonsentrasjoner i plasmaultrafiltrat og takrolimuskonsentrasjoner i plasma og fullblod vil bli utført ved bruk av et Nexera LC-system med LCMS-8050 MS trippelkvadrupol med ascomycin og deuterert takrolimus som interne standarder.

Genotyping:

DNA fra pasienter vil bli renset og analysert ved bruk av RT-PCR for CYP3A4 og CYP3A5 polymorfismer Studievarighet: Studien er planlagt til 3 år: 2,5 år for innsamling av prøver, 0,5 år for analyse og publisering av resultatene.

Effektvariabler: Standard overvåking av laboratorieparametre for blod og urin, bunnnivå av TAC i fullblod (C0), plasma TAC-konsentrasjon, fri TAC-konsentrasjon i plasmaultrafiltrat, TAC daglige doser.