Die neue LC-MS/MS-Methode zur Bestimmung von ungebundenem Tacrolimus in Plasma (FreeTAC)

Da sich in Polen über 15.000 Patienten unter kontinuierlicher Tacrolimus (TAC)-Therapie befinden, ist die Identifizierung und Validierung sensitiverer und spezifischerer Biomarker von größter Bedeutung. Die Forscher schlagen eine mehrstufige Bewertung der Überwachung von TAC-Therapeutika (TDM) bei Nieren- und Leberempfängern vor. Eine Rolle der genetischen Profilerstellung für die Arzneimittelkonzentration und die klinischen Wirkungen wird ebenfalls angesprochen. Das Projekt wird wesentlich zum Verständnis der Pharmakokinetik von Tacrolimus und der Reaktion des Körpers auf eine Arzneimittelexposition beitragen. Darüber hinaus ist das vorgeschlagene Projekt der erste Versuch, sowohl verschiedene TDM-Messmethoden als auch die Patientengenetik in eine rigorose, prospektive Studie mit der Bewertung der klinischen Über- und Unterexposition von TAC-Effekten zu integrieren. Es wird erwartet, dass es ein Argument für die Implementierung einer noch stärker personalisierten, vorhersagbaren immunsuppressiven Therapie liefert.

Die Ermittler vermuten:

1. Es besteht einerseits eine Korrelation des freien TAC-Spiegels mit der Arzneimitteltoxizität und andererseits der Transplantatabstoßung und Unterimmunsuppression trotz Ziel-Vollblutkonzentration.
2. CYP3A5-Expressoren und Nicht-Expressoren weisen unterschiedliche TAC-Spiegel sowohl im Vollblut-C0 als auch im freien TAC-C0 sowie unterschiedliche Wirksamkeits- und Toxizitätsprofile auf.
3. Die Konzentration von freiem TAC hängt von Änderungen in der Konzentration von Blutbestandteilen ab, daher ist es möglich, die Gleichung zur Berechnung der Konzentration von freiem TAC als nützliches Werkzeug für die Anpassung der Arzneimitteldosis abzuleiten

Studiendesign

Ziele:

Phase 1) Ein Hauptziel dieser Studie ist die Entwicklung und Validierung einer neuen Methode zur Messung von ungebundenem Tacrolimus. - Veröffentlicht: 12. März 2022 (https://doi.org/10.3390/pharmaceutics14030632)

Phase 2) Ein primäres Ziel ist die Berechnung der freien TAC-Fraktion aus dem Hämatokritspiegel, der Albuminkonzentration und der routinemäßigen Vollblut-TAC C0, um die Dosisanpassung genauer vorhersagen zu können. Die generierte Gleichung wird gegen CYP3A-Polymorphismen aufgetragen.

Phase 3) Ein primäres Ziel ist es, nach einer Korrelation zwischen dem Gehalt an ungebundenem TAC in einem Ultrafiltrat mit Transplantatabstoßungsepisoden zu suchen.

Sekundäre Endpunkte:

Geplant ist ein komplexer Vergleich verschiedener Methoden zur Bestimmung der TAC-Konzentration in Vollblut, Plasma und Ultrafiltrat.

Der Nutzen der Genotypisierung vor der Verabreichung von TAC zur Dosisvorhersage wird bewertet.

Die untersuchten Gruppen:

1. 40 konsekutive Nieren- oder Lebertransplantatempfänger mit TAC-basierter Immunsuppression.
2. 300 Empfänger von Nierentransplantationen in der örtlichen Ambulanz.
3. 40 Nierentransplantatempfänger mit akuter Abstoßung des Nierenallotransplantats.

TAC-Messungen:

Messungen der Konzentrationen von ungebundenem Tacrolimus in Plasma-Ultrafiltrat und Tacrolimus-Konzentrationen in Plasma und Vollblut werden unter Verwendung eines Nexera LC-Systems mit LCMS-8050 MS Triple Quadrupole mit Ascomycin und deuteriertem Tacrolimus als internen Standards durchgeführt.

Genotypisierung:

Die DNA der Patienten wird gereinigt und mittels RT-PCR auf CYP3A4- und CYP3A5-Polymorphismen analysiert. Studiendauer: Die Studie ist auf 3 Jahre angelegt: 2,5 Jahre für die Entnahme von Proben, 0,5 Jahre für die Analyse und Veröffentlichung der Ergebnisse.

Wirksamkeitsvariablen: Standardüberwachung von Blut- und Urinlaborparametern, Vollblut-TAC-Talspiegel (C0), Plasma-TAC-Konzentration, freie TAC-Konzentration im Plasma-Ultrafiltrat, TAC-Tagesdosen.