Новый метод ЖХ-МС/МС для определения несвязанного такролимуса в плазме (FreeTAC)

Поскольку в Польше более 15 000 пациентов получают непрерывную терапию такролимусом (ТАЦ), идентификация и проверка более чувствительных и специфичных биомаркеров имеет первостепенное значение. Исследователи предлагают многоэтапную оценку терапевтического лекарственного мониторинга TAC (TDM) у реципиентов почек и печени. Также будет рассмотрена роль генетического профилирования в отношении концентрации лекарственного средства и клинических эффектов. Проект внесет значительный вклад в понимание фармакокинетики такролимуса и реакции организма на воздействие препарата. Кроме того, предлагаемый проект является первой попыткой объединить как различные методы измерения TDM, так и генетику пациентов в тщательном проспективном исследовании с оценкой клинических эффектов TAC при чрезмерном и недостаточном воздействии. Ожидается, что это послужит аргументом в пользу внедрения еще более персонализированной и предсказуемой иммуносупрессивной терапии.

Исследователи предполагают, что:

1. Существует корреляция уровня свободного TAC с токсичностью препарата, с одной стороны, и отторжением трансплантата и недостаточной иммуносупрессией, несмотря на целевую концентрацию в цельной крови, с другой.
2. Экспрессоры и неэкспрессоры CYP3A5 будут демонстрировать разные уровни TAC как в C0 цельной крови, так и в свободном C0 TAC, а также разные профили эффективности и токсичности.
3. Концентрация свободного ТАС связана с изменениями концентрации компонентов крови, поэтому можно вывести уравнение для расчета концентрации свободного ТАС как полезный инструмент для корректировки дозировки лекарственного средства.

Дизайн исследования

Цели:

Фаза 1) Основная цель этого исследования заключается в разработке и проверке нового метода измерения несвязанного такролимуса. - Опубликовано: 12 марта 2022 г. (https://doi.org/10.3390/pharmaceutics14030632)

Фаза 2) Основная цель состоит в том, чтобы рассчитать свободную фракцию TAC по уровню гематокрита, концентрации альбумина и обычному TAC C0 в цельной крови для более точного прогнозирования корректировки дозы. Сгенерированное уравнение будет построено в зависимости от полиморфизмов CYP3A.

Фаза 3) Основная цель состоит в том, чтобы найти корреляцию между уровнем несвязанного ТАС в ультрафильтрате и эпизодами отторжения трансплантата.

Вторичные конечные точки:

Планируется комплексное сравнение различных методов определения концентрации ТАС в цельной крови, плазме и ультрафильтрате.

Будут оценены преимущества генотипирования перед введением TAC для прогнозирования дозы.

Изучаемые группы:

1. 40 последовательных реципиентов трансплантата почки или печени на иммуносупрессии на основе TAC.
2. 300 реципиентов почечных трансплантатов посещают местную поликлинику.
3. 40 реципиентов почечного трансплантата с острым отторжением почечного аллотрансплантата.

Измерения ТАС:

Измерения концентрации несвязанного такролимуса в ультрафильтрате плазмы и концентрации такролимуса в плазме и цельной крови будут выполняться с использованием системы ЖХ Nexera с тройным квадруполем LCMS-8050 MS с аскомицином и дейтерированным такролимусом в качестве внутренних стандартов.

Генотипирование:

ДНК пациентов будет очищена и проанализирована с помощью ОТ-ПЦР на полиморфизмы CYP3A4 и CYP3A5. Продолжительность исследования: Исследование рассчитано на 3 года: 2,5 года на сбор образцов, 0,5 года на анализ и публикацию результатов.

Показатели эффективности: стандартный мониторинг лабораторных параметров крови и мочи, минимального уровня ОАС в цельной крови (C0), концентрации ОАС в плазме, концентрации свободного ОАС в ультрафильтрате плазмы, суточных доз ОАС.