Nová metoda LC-MS/MS pro stanovení nenavázaného takrolimu v plazmě (FreeTAC)

Vzhledem k tomu, že v Polsku je více než 15 000 pacientů na kontinuální léčbě takrolimem (TAC), je nanejvýš důležité identifikace a validace citlivějších a specifičtějších biomarkerů. Výzkumníci navrhují vícestupňové hodnocení TAC terapeutického monitorování léčiv (TDM) u příjemců ledvin a jater. Bude také řešena úloha genetického profilování na koncentraci léčiva a klinické účinky. Projekt významně přispěje k pochopení farmakokinetiky takrolimu a odezvy organismu na expozici léčivu. Kromě toho je navrhovaný projekt prvním pokusem o integraci různých metod měření TDM a genetiky pacienta do rigorózní, prospektivní studie s hodnocením klinických účinků nadměrné a podexpozice TAC. Očekává se, že poskytne argument pro implementaci ještě personalizovanější, předvídatelnější imunosupresivní terapie.

Vyšetřovatelé předpokládají, že:

1. Existuje korelace hladiny volného TAC s toxicitou léčiva na jedné straně a rejekcí štěpu a podimunosupresí navzdory cílové koncentraci v plné krvi na straně druhé.
2. Exprimující a neexprimující CYP3A5 budou prezentovat různé hladiny TAC v plné krvi C0 a volné TAC C0, stejně jako různé profily účinnosti a toxicity.
3. Koncentrace volného TAC souvisí se změnami v koncentraci krevních složek, proto je možné odvodit rovnici pro výpočet koncentrace volného TAC jako užitečný nástroj pro úpravu dávkování léčiva.

Studovat design

Cíle:

Fáze 1) Primárním cílem této studie je vyvinout a ověřit novou metodu pro měření nevázaného takrolimu. – Zveřejněno: 12. března 2022 (https://doi.org/10.3390/pharmaceutics14030632)

Fáze 2) Primárním cílem je vypočítat volnou frakci TAC z hladiny hematokritu, koncentrace albuminu a rutinního TAC C0 v plné krvi, aby bylo možné přesněji předpovědět úpravu dávky. Vytvořená rovnice bude vynesena proti polymorfismům CYP3A.

Fáze 3) Primárním cílem je hledat korelaci mezi hladinou nenavázaného TAC v ultrafiltrátu a epizodami odmítnutí štěpu.

Sekundární koncové body:

Plánuje se komplexní srovnání různých metod stanovení koncentrace TAC v plné krvi, plazmě a ultrafiltrátu.

Bude vyhodnocen přínos genotypizace před podáním TAC pro predikci dávky.

Studované skupiny:

1. 40 po sobě jdoucích příjemců transplantace ledvin nebo jater na imunosupresi na bázi TAC.
2. 300 příjemců transplantované ledviny navštěvujících místní ambulanci.
3. 40 příjemců transplantátu ledviny, u kterých došlo k akutní rejekci renálního aloštěpu.

Měření TAC:

Měření koncentrací nenavázaného takrolimu v ultrafiltrátu plazmy a koncentrací takrolimu v plazmě a plné krvi bude provedeno pomocí systému Nexera LC s trojitým kvadrupólem LCMS-8050 MS s askomycinem a deuterovaným takrolimem jako vnitřními standardy.

Genotypizace:

DNA pacientů bude purifikována a analyzována pomocí RT-PCR na polymorfismy CYP3A4 a CYP3A5 Délka studie: Studie je naplánována na 3 roky: 2,5 roku pro odběr vzorků, 0,5 roku pro analýzu a publikaci výsledků.

Proměnné účinnosti: Standardní monitorování laboratorních parametrů krve a moči, minimální hladina TAC v plné krvi (C0), koncentrace TAC v plazmě, koncentrace volného TAC v ultrafiltrátu plazmy, denní dávky TAC.