Den nye LC-MS/MS-metode til bestemmelse af ubundet tacrolimus i plasma (FreeTAC)

Da der er over 15.000 patienter i Polen i behandling med kontinuerlig tacrolimus (TAC), er identifikation og validering af mere følsomme og specifikke biomarkører af yderste vigtighed. Efterforskerne foreslår en flertrinsvurdering af TAC terapeutisk lægemiddelmonitorering (TDM) hos nyre- og leverrecipienter. En rolle af genetisk profilering for lægemiddelkoncentration og kliniske virkninger vil også blive behandlet. Projektet vil bidrage væsentligt til at forstå tacrolimus farmakokinetik og kroppens respons på lægemiddeleksponering. Desuden er det foreslåede projekt det første forsøg på at integrere både forskellige TDM-målemetoder og patientgenetik i et stringent, prospektivt studie med vurdering af de kliniske over- og undereksponering TAC-effekter. Det forventes at give et argument for implementering af endnu mere personlig, forudsigelig immunsuppressiv terapi.

Efterforskerne antager, at:

1. Der er en sammenhæng mellem fri TAC-niveau med lægemiddeltoksicitet på den ene side og graftafstødning og underimmunosuppression på trods af målkoncentrationen i fuldblod på den anden side.
2. CYP3A5-ekspressorer og ikke-ekspressorer vil præsentere forskellige niveauer af TAC i både fuldblods C0 og fri TAC C0 samt forskellige effektivitets- og toksicitetsprofiler.
3. Koncentrationen af ​​fri TAC er relateret til ændringer i koncentrationen af ​​blodkomponenter, så det er muligt at udlede ligningen for beregning af fri TAC-koncentration som et nyttigt værktøj til justering af lægemiddeldosis

Studere design

Mål:

Fase 1) Et primært formål med denne undersøgelse er at udvikle og validere en ny metode til måling af ubundet tacrolimus. - Udgivet: 12. marts 2022 (https://doi.org/10.3390/pharmaceutics14030632)

Fase 2) Et primært mål er at beregne fri fraktion af TAC ud fra hæmatokritniveau, albuminkoncentration og rutinemæssig fuldblods TAC C0 for at forudsige dosisjustering mere præcist. Den genererede ligning vil blive plottet mod CYP3A polymorfismer.

Fase 3) Et primært formål er at se efter en sammenhæng mellem ubundet TAC-niveau i et ultrafiltrat med graftafstødningsepisoder.

Sekundære endepunkter:

En kompleks sammenligning af forskellige metoder til bestemmelse af TAC-koncentration i fuldblod, plasma og ultrafiltrat er planlagt.

Fordelen ved genotypebestemmelse før administration af TAC til dosisforudsigelse vil blive evalueret.

De undersøgte grupper:

1. 40 på hinanden følgende nyre- eller levertransplanterede modtagere på TAC-baseret immunsuppression.
2. 300 nyretransplanterede modtagere i det lokale ambulatorium.
3. 40 nyretransplanterede modtagere, der oplever akut afstødning af det renale allograft.

TAC målinger:

Målinger af ubundet tacrolimus-koncentrationer i plasma-ultrafiltrat og tacrolimus-koncentrationer i plasma og fuldblod vil blive udført ved hjælp af et Nexera LC-system med LCMS-8050 MS triple quadrupol med ascomycin og deutereret tacrolimus som interne standarder.

Genotyping:

DNA fra patienter vil blive oprenset og analyseret ved hjælp af RT-PCR for CYP3A4 og CYP3A5 polymorfismer. Undersøgelsens varighed: Undersøgelsen er planlagt til 3 år: 2,5 år til indsamling af prøver, 0,5 år til analyse og offentliggørelse af resultaterne.

Effektvariabler: Standardmonitorering af blod- og urinlaboratorieparametre, TAC-dalniveau i fuldblod (C0), plasma-TAC-koncentration, fri TAC-koncentration i plasmaultrafiltrat, TAC daglige doser.