Un essai clinique multicentrique de tests ADN basés sur les selles pour la détection précoce du cancer du côlon en Chine

L'essai clinique multicentrique sera mené selon une méthode en simple aveugle. Les échantillons de selles fournis par les participants seront évalués par le kit de détection de méthylation multigène humain (PCR fluorescente). Le kit sera utilisé pour détecter qualitativement les niveaux de méthylation de plusieurs gènes dans des échantillons de selles humaines in vitro en utilisant la PCR quantitative spécifique à la méthylation (qMSP). Le principe de la méthode est le suivant. Tout d'abord, l'ADN cible dans les selles humaines est extrait par la technologie de capture de billes magnétiques, puis traité avec du bisulfite de sodium. La séquence de l'ADN non méthylé sera modifiée tandis que celle de l'ADN méthylé restera la même après le traitement au bisulfite de sodium. Par la suite, qMSP est utilisé pour détecter les niveaux de méthylation des gènes cibles en plus du gène ACTB (un gène de référence). Les contrôles du gène ACTB avec et sans méthylation sont testés simultanément. Le résultat de qMSP est dichotomisé en positif et négatif en fonction de la valeur Ct obtenue. Le résultat du test est ensuite vérifié par séquençage Sanger et comparé à celui de l'examen coloscopie et du rapport de pathologie. Les principaux indices d'évaluation des performances des tests sont la sensibilité, la spécificité, le taux de cohérence, le coefficient kappa.