Um ensaio clínico multicêntrico de teste de DNA baseado em fezes para detecção precoce de câncer de cólon na China

O ensaio clínico multicêntrico será conduzido usando um método simples-cego. As amostras de fezes fornecidas pelos participantes serão avaliadas pelo Kit de Detecção de Metilação Multigênica Humana (PCR fluorescente). O kit será usado para detectar qualitativamente os níveis de metilação de múltiplos genes em amostras de fezes humanas in vitro usando Quantitative Metilation Specific PCR (qMSP). O princípio do método é o seguinte. Primeiro, o DNA alvo nas fezes humanas é extraído pela tecnologia de captura de contas magnéticas e depois tratado com bissulfito de sódio. A sequência do DNA não metilado será alterada, enquanto a do DNA metilado permanecerá a mesma após o tratamento com bissulfito de sódio. Subsequentemente, o qMSP é empregado para detectar os níveis de metilação dos genes alvo, além do gene ACTB (um gene de referência). Controles do gene ACTB com e sem metilação são testados simultaneamente. O resultado do qMSP é dicotomizado como positivo e negativo com base no valor de Ct obtido. O resultado do teste é então verificado pelo sequenciamento de Sanger e comparado com o exame de colonoscopia e relatório de patologia. Os principais índices de avaliação do desempenho do teste são sensibilidade, especificidade, taxa de consistência, coeficiente kappa.