Un ensayo clínico multicéntrico de pruebas de ADN en heces para la detección temprana del cáncer de colon en China

El ensayo clínico multicéntrico se llevará a cabo utilizando un método simple ciego. Las muestras de heces proporcionadas por los participantes se evaluarán mediante el kit de detección de metilación multigénica humana (PCR fluorescente). El kit se utilizará para detectar cualitativamente los niveles de metilación de múltiples genes en muestras de heces humanas in vitro mediante PCR específica de metilación cuantitativa (qMSP). El principio del método es el siguiente. Primero, el ADN objetivo en las heces humanas se extrae mediante tecnología de captura de perlas magnéticas y luego se trata con bisulfito de sodio. La secuencia del ADN no metilado cambiará mientras que la del ADN metilado permanece igual después del tratamiento con bisulfito de sodio. Posteriormente, qMSP se emplea para detectar niveles de metilación de genes diana además del gen ACTB (un gen de referencia). Los controles del gen ACTB con y sin metilación se prueban simultáneamente. El resultado de qMSP se dicotomiza como positivo y negativo según el valor de Ct obtenido. Luego, el resultado de la prueba se verifica mediante la secuenciación de Sanger y se compara con el del examen de colonoscopia y el informe patológico. Los principales índices de evaluación del rendimiento de la prueba son la sensibilidad, la especificidad, la tasa de consistencia y el coeficiente kappa.